CALUX - CALUX

Экспрессия гена химической активированной люциферазы (CALUX) представляет собой лиганд-зависимый ядерный рецептор на основе биоанализ используется для обнаружения конкретных химических веществ или классов химических веществ в образцах. Он состоит из модифицированной клеточной линии, стабильно трансфицированной Конструкция ДНК с люцифераза репортерный ген под контролем рецептор-специфической ДНК элементы ответа что может стимулировать транскрипция вставленной люциферазы ген и производить светообразующий фермент, который можно легко измерить. Элементы ответа ДНК можно варьировать, чтобы обеспечить сайты связывания для других рецепторов, которые регулируются химическим веществом или классом химических веществ, представляющих интерес, которые необходимо обнаружить. Таким образом, были разработаны многочисленные биоанализы CALUX для обнаружения различных представляющих интерес химических веществ. Большинство приложений было направлено на обнаружение экологически вредных химических веществ, например, влияющих на эндокринную систему (гормоны окружающей среды ).

CALUX - это метод скрининга на основе эффекта, поскольку он измеряет общий эффект лиганды (из образца) на конкретный рецептор. В отличие от химический анализ Таким образом, CALUX может измерять общую активность интересующего рецептора. Сюда входят как идентифицированные, так и неидентифицированные активаторы (агонисты ) и ингибиторы (антагонисты рецепторов ).

Приложения

Биоанализ, реагирующий на арилуглеводородные рецепторы (AhR) (AhR-CALUX), обычно используется для обнаружения диоксины и диоксиноподобные соединения в экстрактах образцов. Он основан на молекулярном механизме, с помощью которого AhR активирует экспрессию генов.[1]AhR-CALUX используется исследователями и компаниями, которые хотят проверить наличие диоксины и диоксиноподобные соединения в широком спектре биологических и экологических матриц, коммерческих и потребительских товаров, а также в пищевых продуктах и ​​кормах для оценки их безопасности и / или уровня загрязнения. [2] Хотя измерение диоксина и связанных с ним диоксиноподобных химических веществ в экстракте образца с использованием биоанализа AhR-CALUX значительно дешевле химического анализа, требующего газовой хроматографии - масс-спектрометрии высокого разрешения (GC-HRMS), оно обеспечивает только измерение общий уровень AhR-активных диоксинов и родственных диоксиноподобных химических веществ в экстракте пробы и определение конкретных конгенеров требует анализа с помощью любой GC-HRMS. Кроме того, учитывая недавно установленную роль AhR в здоровье и заболеваниях человека, биоанализ AhR-CALUX также широко используется в качестве высокопроизводительного метода скрининга для выявления и характеристики AhR-активных химических веществ как потенциальных терапевтических препаратов для человека.[3]

Химические вещества окружающей среды, обладающие активностью, подобной половым гормонам, также обнаруживаются с помощью аналогичных биоанализов, включая CALUX, реагирующий на эстрогеновые рецепторы (ER-CALUX) и CALUX, чувствительный к рецепторам андрогенов (AR-CALUX).

Рекомендации

  1. ^ Murk, A.J .; Дж. Леглер; РС. Денисон; Дж. П. Гизи; К. ван де Гухте; А. Брауэр (1 сентября 1996 г.). «Химически активированная экспрессия гена люциферазы (CALUX): новый биоанализ in-vitro для активных соединений рецептора Ah в отложениях и поровой воде». Фундаментальная и прикладная токсикология. 33 (2): 149–160. Дои:10.1006 / faat.1996.0152. PMID  8812260.
  2. ^ Денисон, M.S .; Б. Чжао; Д.С. Бастон; G.C. Кларк; Х. Мурата; Д.-Х. Хан (8 августа 2004 г.). «Системы биотестирования рекомбинантных клеток для обнаружения и относительного количественного определения галогенированных диоксинов и родственных химикатов». Таланта. 63 (5): 1123–1133. Дои:10.1016 / j.talanta.2004.05.032. PMID  18969542.
  3. ^ Esser, C .; Б.П. Лоуренс; Д. Х. Шерр; G.H. Perdew; А. Пуга; Р. Баруки; X. Coumoul (15 ноября 2018 г.). «Старый рецептор, новые уловки - постоянно расширяющаяся вселенная функций рецептора арильных углеводородов. Отчет о 4-м заседании AHR, 29–31 августа 2018 г. в Париже, Франция». Международный журнал молекулярных наук. 19 (11): E3603. Дои:10.3390 / ijms19113603. ЧВК  6274973. PMID  30445691.