Тест нейтрализации уменьшения зубного налета - Википедия - Plaque reduction neutralization test

В тест нейтрализации уменьшения зубного налета используется для количественной оценки титр нейтрализации антитело для вируса.

Образец сыворотки или раствор исследуемого антитела разбавляют и смешивают с вирусной суспензией. Это инкубируется, чтобы позволить антителу реагировать с вирусом. Его выливают на конфлюэнтный монослой клеток-хозяев. Поверхность клеточного слоя покрыта слоем агар или же карбоксиметилцеллюлоза чтобы предотвратить беспорядочное распространение вируса. Концентрация блоки формирования зубного налета можно оценить по количеству бляшки (области инфицированных клеток) образовались через несколько дней. В зависимости от вируса, бляшкообразующие единицы измеряются под микроскопом, флуоресцентными антителами или специфическими красителями, которые реагируют с инфицированными клетками.[1]

Концентрация сыворотки для уменьшения количества бляшек на 50% по сравнению с бессывороточным вирусом дает представление о том, сколько антител присутствует или насколько они эффективны. Это измерение обозначается как PRNT.50 ценить.

В настоящее время он считается «золотым стандартом» для обнаружения и измерения антител, которые могут нейтрализовать вирусы, вызывающие многие заболевания.[2][3] Имеет высшее чувствительность чем другие тесты, такие как гемагглютинация и многие коммерческие Иммуноферментный анализ без компромиссов специфичность. Более того, он более специфичен, чем другие серологические методы диагностики некоторых арбовирусов.

Однако тест является относительно громоздким и требует много времени (несколько дней) по сравнению с наборами EIA, которые дают быстрые результаты (обычно от нескольких минут до нескольких часов).

Проблема этого анализа, которая была недавно выявлена, заключается в том, что нейтрализующая способность антител зависит от состояния созревания вириона и типа клеток, используемых в анализе.[4] Следовательно, если для анализа используется неправильная клеточная линия, может показаться, что антитела обладают нейтрализующей способностью, хотя на самом деле ее нет, или наоборот, они могут показаться неэффективными, если они действительно обладают нейтрализующей способностью.[нужна цитата ]

Смотрите также

Рекомендации

  1. ^ Шмидт, Нью-Джерси; Дж. Деннис; Э. Х. Леннетт (июль 1976 г.). «Тест нейтрализации уменьшения образования зубного налета для цитомегаловируса человека, основанный на повышенном поглощении нейтрального красного цвета инфицированными вирусом клетками» (PDF). Журнал клинической микробиологии. 4 (1): 61–66. ISSN  0095-1137. PMID  182716.
  2. ^ Томас, Стивен Дж .; Ананда Нисалак; Кэтрин Б. Андерсон; Дэниел Х. Либрати; Сирипен Калаянарудж; Дэвид В. Вон; Роберт Путнак; Роберт В. Гиббонс; Ричард Джарман; Тимоти П. Энди (ноябрь 2009 г.). «Тест нейтрализации уменьшения налета денге (PRNT) при первичных и вторичных инфекциях, вызванных вирусом денге: как изменения условий анализа влияют на производительность». Американский журнал тропической медицины и гигиены. 81 (5): 825–833. Дои:10.4269 / ajtmh.2009.08-0625. ISSN  0002-9637. ЧВК  2835862. PMID  19861618.
  3. ^ Ратнам, S; V Гадаг; R West; Дж. Беррис; Э. Оутс; F Stead; Н. Буйлианн (1995-04-01). «Сравнение коммерческих наборов для иммуноферментного анализа с тестом нейтрализации уменьшения зубного налета для выявления антител к вирусу кори». J. Clin. Микробиол. 33 (4): 811–815. Дои:10.1128 / JCM.33.4.811-815.1995. ЧВК  228046. PMID  7790442.
  4. ^ Mukherjee, S .; Dowd, K. A .; Manhart, C.J .; Ledgerwood, J. E .; Дурбин, А. П .; Whitehead, S. S .; Пирсон, Т. К. (2014). «Механизм и значение клеточной нейтрализации флавивирусов». Журнал вирусологии. 88 (13): 7210–7220. Дои:10.1128 / JVI.03690-13. ISSN  0022-538X. ЧВК  4054442. PMID  24741083.