Асимметричная ПЦР - Википедия - Asymmetric PCR

Асимметричная ПЦР это вариант ПЦР используется для преимущественного усиления одной нити оригинального ДНК больше, чем другие.[1] Методика находит применение в некоторых типах последовательность действий и гибридизационное зондирование где имеется только один из двух дополнительных пряди необходимо.[2]

Методология

Асимметричная ПЦР отличается от обычной ПЦР чрезмерным количеством грунтовки для выбранной пряди. Из-за медленной (арифметической) амплификации на более поздних стадиях реакции (после того, как ограничивающий праймер израсходован) требуются дополнительные циклы ПЦР.[3]

Модификация этого процесса, известная как Линейная после экспоненциальной ПЦР (LATE-PCR), использует ограничивающий грунт с более высокой температура плавления чем избыток праймера для поддержания эффективности реакции, так как предельная концентрация праймера уменьшается в середине реакции.[4]

Приложения

Асимметричная ПЦР может использоваться для образования одноцепочечной ДНК из двухцепочечной ДНК, которая затем используется для секвенирования ДНК в метод мутагенеза.[нужна цитата ] Одноцепочечная ДНК также важна для аптамер поколение.[1]

Рекомендации

  1. ^ а б Читартан, Маримуту; и другие. (Декабрь 2011 г.). «Асимметричная ПЦР для получения хорошего качества оцДНК по отношению к производству ДНК-аптамера» (PDF). Songklanakarin J. Sci. Technol. 34 (2): 125–131.
  2. ^ Wooddell, C. I; Берджесс, Р. Р. (1996). «Использование асимметричной ПЦР для создания длинных праймеров и одноцепочечной ДНК для включения сшивающих аналогов в конкретные сайты в ДНК-зонде». Genome Res. 6 (9): 886–892. Дои:10.1101 / гр.6.9.886. PMID  8889557.
  3. ^ Хейат, Мохаммад; и другие. (14 января 2017 г.). «Основные стратегии оптимизации условий асимметричной ПЦР как надежного метода для создания большого количества аптамеров оцДНК». Биотехнология и прикладная биохимия. 64 (4): 541–548. Дои:10.1002 / баб.1507. PMID  27222205.
  4. ^ Санчес, Дж. Акилес; и другие. (4 декабря 2003 г.). «Linear-After-The-Exponential (LATE) –PCR: усовершенствованный метод асимметричной ПЦР и его использование в количественном анализе в реальном времени». Труды Национальной академии наук. 101 (7): 1933–1938. Дои:10.1073 / pnas.0305476101. ЧВК  357030. PMID  14769930.