Иммунохирургия - Immunosurgery

Иммунохирургия из бластоциста. Добавляются антитела, которые прикрепляются к внешнему слою клеток, который на бластоцисте является трофобласт. После удаления всех несвязанных антител и добавления дополнять, клетки трофобласта разрушаются, оставляя только внутренняя клеточная масса.[1]

Иммунохирургия метод выборочного удаления внешних клетка слой (трофобласт ) из бластоциста через цитотоксичность процедура. Протокол иммунохирургии включает преинкубацию с антисыворотка, промывая его hES производная среда для удаления антител, подвергая ее воздействию дополнять, а затем удаление лизированной трофоэктодермы с помощью пипетки.[1] Этот метод используется для изоляции внутренняя клеточная масса бластоцисты. Трофоэктодермы клеточные соединения и плотно эпителий «защищать» ICM от связывания антител, эффективно делая клетку непроницаемой для макромолекулы.[2][3]

Иммунохирургия может использоваться для получения больших количеств чистых внутренних клеточных масс за относительно короткий период времени. Полученный ICM можно затем использовать для стволовая клетка исследования и лучше использовать, чем взрослые или фетальные стволовые клетки, потому что на ICM не повлияли внешние факторы, такие как ручное деление клетки пополам.[4][5] Однако, если структурная целостность бластоцисты нарушена до эксперимента, ICM подвержен иммунологической реакции. Таким образом, качество эмбрион Использование обязательно для успеха эксперимента. Кроме того, при использовании комплемента, полученного от животных, имеет значение источник животного. Их следует хранить в без специфических патогенов окружающей среды, чтобы увеличить вероятность того, что у животного не выработались естественные антитела против бактериальных углеводов, присутствующих в сыворотке (которые могут быть получены от другого животного).[6]

Солтер и Ноулз разработали первый метод иммунохирургии в своей статье 1975 года. «Иммунохирургия бластоцисты мыши». Они в основном использовали его для раннего обучения эмбриональное развитие.[4][7] Хотя иммунохирургия является наиболее распространенным методом выделения ICM, различные эксперименты улучшили этот процесс, например, за счет использования лазеров (выполненных Танакой, и другие.) и микроманипуляторы (в исполнении Дин, и другие.).[8][9] Эти новые методы снижают риск заражения животными материалами в пределах эмбриональные стволовые клетки полученных из ICM, что может вызвать осложнения позже, если эмбриональные стволовые клетки трансплантируются человеку для клеточная терапия.

Рекомендации

  1. ^ а б Хэггстрем, Микаэль (2014). «Аллогенный компонент для преодоления отторжения при межвидовой беременности». WikiJournal of Медицина. 1 (1). Дои:10.15347 / wjm / 2014.004.
  2. ^ Cruz, Y.P .; Treichel, R. S .; Harsay, E .; Чи, К. Д. (1993-01-01). "Иммунохирургия бластоцист мыши с коммерческой антисывороткой к эритроцитам мыши". Клеточная биология и биология развития in vitro. Животное. 29A (8): 671–675. JSTOR  4294104.
  3. ^ Николс, Дженнифер; Боровяк, Торстен (2015). «Максимизация производства клональных эмбриональных стволовых клеток путем ингибирования пути ERK». Протоколы эмбриональных стволовых клеток. Методы молекулярной биологии. 1341. С. 1–13. Дои:10.1007/7651_2015_253. ISBN  978-1-4939-2953-5. PMID  26026883.
  4. ^ а б Солтер, Д; Ноулз, BB (1975). «Иммунохирургия бластоцисты мыши». Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки. 72 (12): 5099–102. Bibcode:1975PNAS ... 72.5099S. Дои:10.1073 / pnas.72.12.5099. ЧВК  388883. PMID  1108013.
  5. ^ Крук, Джереми М .; Кравец, Люси; Пеура, Тейджа; Фирпо, Мери Т. (2017). «Получение человеческих эмбриональных стволовых клеток». Банк стволовых клеток. Методы молекулярной биологии. 1590. С. 115–129. Дои:10.1007/978-1-4939-6921-0_8. ISBN  978-1-4939-6919-7. PMID  28353265.
  6. ^ «Производство химер», глава 11, в Манипулирование эмбрионом мыши, 3-е издание, Андраш Надь, Марина Герценштейн, Кристина Винтерстен и Ричард Берингер. Лабораторный пресс Колд-Спринг-Харбор, Колд-Спринг-Харбор, Нью-Йорк, США, 2003.
  7. ^ Амит, Михал (2013). «Источники и происхождение стволовых клеток эмбриона человека». Плюрипотентные стволовые клетки. Методы молекулярной биологии. 997. С. 3–11. Дои:10.1007/978-1-62703-348-0_1. ISBN  978-1-62703-347-3. PMID  23546743.
  8. ^ Танака, Норико; Такеучи, Такуми; Нери, Куини В .; Подоконники, Эрик Скотт; Палермо, Джанпьеро Д. (01.01.2006). «Лазерная диссекция бластоцисты и последующее культивирование эмбриональных стволовых клеток в бессывороточной / бесклеточной культуральной системе: приложения и предварительные результаты на мышиной модели». Журнал трансляционной медицины. 4: 20. Дои:10.1186/1479-5876-4-20. ISSN  1479-5876. ЧВК  1479373. PMID  16681851.
  9. ^ Янь Дин, И Ган, Цзин Бо Фэн, Шао Хуа Ци, Руй Мин Ли, Донг Шэн Ли. «Эффективная изоляция внутренней клеточной массы от бластоцист с помощью усовершенствованной микрохирургической техники». Cell Research (2008) 18: s39. DOI: 10.1038 / cr.2008.129; опубликовано в Интернете 4 августа 2008 г.