PMSF - PMSF

Фенилметансульфонилфторид (PMSF)
PMSF.svg
Молекула PMSF
Имена
Название ИЮПАК
фенилметансульфонил фторид
Идентификаторы
3D модель (JSmol )
ЧЭБИ
ЧЭМБЛ
ChemSpider
ECHA InfoCard100.005.774 Отредактируйте это в Викиданных
КЕГГ
MeSHФенилметилсульфонил + фторид
UNII
Характеристики
C7ЧАС7FО2S
Молярная масса174.19 г · моль−1
Если не указано иное, данные для материалов приведены в их стандартное состояние (при 25 ° C [77 ° F], 100 кПа).
проверитьY проверять (что проверитьY☒N ?)
Ссылки на инфобоксы

В биохимия, фенилметилсульфонил фторид (PMSF) это ингибитор сериновой протеазы (инактиватор серингидролазы), обычно используемый при приготовлении клеточные лизаты. PMSF не инактивирует все сериновые протеазы[нужна цитата ]. Эффективная концентрация PMSF составляет от 0,1 до 1 мМ. В водных растворах период полураспада короткий (110 минут при pH 7, 55 минут при pH 7,5 и 35 минут при pH 8, все при 25 ° C).[1] Исходные растворы обычно состоят из безводных этиловый спирт, изопропанол, или же кукурузное масло и разводят непосредственно перед использованием.

PMSF специфически связывается с активным сайтом серин остаток в сериновых гидролазах. Он не связывается ни с какими другими остатками серина в белке. Это результат гиперактивности этого серинового остатка, вызванной специфическими условиями окружающей среды в активном центре фермента (каталитическая триада ). Поскольку PMSF ковалентно связывается с ферментом, комплекс можно увидеть с помощью рентгеновской кристаллографии; поэтому его можно использовать в качестве химической метки для идентификации серина, необходимого для активного сайта фермента.

Фермент (активный) Ser-O-H + F-SO2CH2C6ЧАС5 → EnzymeSer-O-SO2CH2C6ЧАС5 + ВЧ
Сериновая протеаза + ФМСФ → Необратимый фермент-комплекс ФМС + HF

В средняя смертельная доза менее 500 мг / кг[нужна цитата ] (ацетилхолинэстераза инактиватор!). С ФМСФ следует обращаться только в вытяжном шкафу и в перчатках. ДМСО иногда рекомендуется в качестве растворителя для исходных растворов, но его не следует использовать, поскольку он делает неповрежденную кожу проницаемой для PMSF.

Рекомендации

  1. ^ Г. Т. Джеймс (1978). «Инактивация ингибитора протеаз фенилметилсульфонилфторида в буферах». Аналитическая биохимия. 86 (2): 574–9. Дои:10.1016/0003-2697(78)90784-4. PMID  26289.

внешняя ссылка