Первичные и вторичные антитела - Primary and secondary antibodies

Эта статья о прямом или косвенном связывании. Группировку по времени дебюта см. Обычные и нерегулярные антитела.

Первичные и вторичные антитела две группы антитела которые классифицируются в зависимости от того, связаны ли они с антигены или белки напрямую или нацелены на другое (первичное) антитело, которое, в свою очередь, связано с антиген или белок.

Начальный

Первичные антитела могут быть очень полезны для обнаружения биомаркеров таких заболеваний, как рак, диабет, болезнь Паркинсона и Альцгеймера, и они используются для изучения абсорбции, распределения, метаболизма и экскреции (ADME) и множественной лекарственной устойчивости (MDR). ) терапевтических средств.

Первичное антитело связывается с антигеном (красным). Помеченное вторичное антитело (выделено зеленым) затем связывается с первичным антителом. Затем метка используется для косвенного обнаружения антигена.

Вторичный

Вторичные антитела обеспечивают обнаружение и амплификацию сигнала наряду с расширением применимости антитела за счет конъюгации с белками.[1]. Вторичные антитела особенно эффективны при иммунная маркировка. Вторичные антитела связываются с первичными антителами, которые напрямую связываются с антигеном (ами)-мишенью. При иммуномаркировании первичные антитела Fab домен связывается с антигеном и обнажает его Fc домен к вторичному антителу. Затем Fab-домен вторичного антитела связывается с Fc-доменом первичного антитела. Поскольку домен Fc является постоянным в пределах одного и того же класса животных, требуется только один тип вторичных антител для связывания со многими типами первичных антител. Это снижает стоимость за счет маркировки только одного типа вторичных антител вместо маркировки различных типов первичных антител. Вторичные антитела помогают повысить чувствительность и усиление сигнала за счет связывания множества вторичных антител с первичным антителом[2].

Приложения

Вторичные антитела можно конъюгировать с такими ферментами, как пероксидаза хрена (HRP) или же щелочная фосфатаза (AP); или же флуоресцентные красители Такие как флуоресцеина изотиоцианат (FITC), родамин производные, Красители Alexa Fluor; или другие молекулы для использования в различных приложениях. Вторичные антитела используются во многих биохимических анализах. [3] включая:

Рекомендации

  1. ^ https://ptglab.com/news/blog/secondary-antibody-selection/ Руководство по выбору вторичных антител
  2. ^ «Вторичные антитела как зонды». www.thermofisher.com. Получено 2017-05-31.
  3. ^ «Обзор вторичных антител на основе официальных публикаций». вторичный-antibody.com. Архивировано из оригинал на 2008-04-17. Получено 2008-04-16.