Сцинтилляционный анализ близости - Википедия - Scintillation proximity assay
Сцинтилляционный анализ близости (СПА) представляет собой разработку анализа и биохимический скрининг, позволяющий быстро и точно измерить широкий спектр биологических процессов в однородной системе. Типы бусинок, которые участвуют в SPA, имеют микроскопические размеры, а внутри самих бусинок есть сверкающий который излучает свет при стимуляции. Стимуляция происходит, когда молекулы с радиоактивной меткой взаимодействуют и связываются с поверхностью шарика. Это взаимодействие заставит шарик излучать свет, который можно обнаружить с помощью фотометр.
Обзор
Техника СПА зависит от преобразование энергии из радиоактивный распад, который излучает свет фотоны которые могут быть обнаружены с помощью некоторых устройств, таких как фотоэлектронные умножители сцинтилляционных счетчиков или ПЗС-формирователи изображения. Это очень популярный метод в практике, требующей обнаружения и количественной оценки радиоактивности.[1]
Процесс преобразования радиоактивности в свет требует жидкой среды сцинтилляционной комбинации, состоящей из растворимых органический сцинтилляторы и органические растворители. В процессе радиоактивного распада бета-частица Будет выпущен. Пока эта частица перемещается в среде, энергия, которой она обладает, рассеивается при столкновении с окружающей средой. молекулы в растворителе, возбуждая их при этом. Возбужденные молекулы передают энергию, которой они теперь обладают, молекулам сцинтиллятора, где энергия будет излучаться в виде света.
Деталь
Более подробно, когда радиоактивно молекула прикреплена или находится в непосредственной близости от бусинки, излучение света стимулируется. Однако, если шарик не связывается с радиоактивно меченной молекулой, шарик не будет излучать свет. Это связано с тем, что бета-частицы (высокоскоростные электроны), высвобождаемые из несвязанной молекулы, теряются из-за столкновений с молекулами воды, если они находятся слишком далеко от шариков, содержащих сцинтиллятор, и поэтому шарик SPA, который затем не стимулируется для получения сигнала .
При распаде радиоактивных атомов высвобождаются субатомные частицы и / или гамма-лучи. Выбросы трития электроны как один из субатомные частицы. Энергия этих частиц влияет на расстояние, пройденное самими частицами через среду, такую как вода, потому что существует обратная корреляция между кинетической энергией частицы и силой взаимодействия с веществом. Метод SPA зависит от короткого пути бета-частиц, выделяемых тритием.
Например, распад Тритий атом выпускает бета-частицу. Настоятельно рекомендуется тритий, так как он очень хорошо подходит для СПА. Это связано с толщиной 1,5 мкм. длина пути через воду, которая очень короткая. Таким образом, когда ß-частица находится в пределах указанного диапазона 1,5 мкм со сцинтилляционной гранулой, энергии достаточно, чтобы заставить гранулу излучать свет. Если расстояние между ними больше 1,5 мкм, то ß-частица не может пройти необходимое расстояние, чтобы стимулировать шарик, так как у нее недостаточно энергии.
Гранулы в SPA образуются в результате включения сцинтиллятора в маленькие шарики, известные как флуомикросферы. Они специально разработаны для связывания с определенными молекулами. Когда шарик находится в непосредственной близости от радиоактивной молекулы, стимулируется свет.
Трубка фотоумножителя (ФЭУ) может использоваться для обнаружения испускаемых фотонов. Это устройство преобразует излучаемую энергию фотона в электроэнергия по фотокатод через ряд других электроды. Другое устройство известно как CCD Imager, который состоит из набора охлаждаемых цифровые фотоаппараты с чувствительными детекторами устройств с зарядовой связью и с некоторыми усовершенствованными телецентрические линзы для преобразования энергии захваченных фотонов в изображения высокого качества.
Также имеется ассортимент покрытий для валиков, которые позволяют применять этот метод в широком спектре приложений, таких как фермент анализы и радиоиммуно анализы.
Преимущества перед предыдущими методами
По сравнению с предыдущими методами на основе пластин с покрытием, SPA имеет ряд преимуществ, которые делают его более популярным:
- Гибкость анализа - концентрация компонентов в анализе может быть отрегулирована в соответствии с потребностями пользователя благодаря конструкции с большей площадью поверхности SPA-гранул, что обеспечивает пользователю гибкость при разработке анализа.
- Радиоактивная метка уменьшение - шарики SPA позволяют потенциально снизить количество требуемой радиоактивной метки из-за своей более высокой связывающей способности, что дает более высокий сигнал. Этот метод также позволяет пользователю оптимизировать чувствительность анализа, изменяя количество шариков SPA.
- Удобно - ключевой компонент анализа SPA, шарики, не зависит от конкретного типа планшета или поставщика, отсюда и его широкая доступность.
- Ассортимент бусинок - существует множество типов бусинок на выбор, чтобы удовлетворить потребности пользователя и области применения.
- Без этапа разделения - позволяет измерять привязку без этапа разделения, связанного с более ранними методами, что снижает количество ошибок и обеспечивает более высокую производительность.
Рекомендации
- ^ Однородная близость Тирозинкиназа Анализы: анализ близости сцинтилляции в сравнении с однородной флуоресценцией с временным разрешением. Аналитическая биохимия Том 269, выпуск 1, 10 апреля 1999 г., страницы 94-104.