Получение антигена - Antigen retrieval
Эта статья поднимает множество проблем. Пожалуйста помоги Улучши это или обсудите эти вопросы на страница обсуждения. (Узнайте, как и когда удалить эти сообщения-шаблоны) (Узнайте, как и когда удалить этот шаблон сообщения)
|
Ткани, сохраненные формальдегид, высокореактивное соединение, содержат множество химических модификаций, которые могут снизить обнаруживаемость белков в биомедицинских процедурах, таких как иммуногистохимия. Получение антигена это подход к уменьшению или устранению этих химических модификаций. Два основных метода антиген извлечение опосредовано теплом эпитоп поиск (HIER) и протеолитический индуцированный поиск эпитопа (PIER).
Извлечение эпитопа, индуцированное протеазой (PIER)
В PIER ферменты, включая протеиназу K, трипсин и пепсин, использовались для восстановления связывания антитела с его эпитопом. Предполагаемый механизм действия - расщепление пептидов, маскирующих эпитоп, восстанавливая антигенность.
К недостаткам PIER относятся низкая вероятность восстановления иммунореактивности, а также возможное разрушение морфологии ткани и интересующего антигена.
Извлечение эпитопа, индуцированного нагреванием (HIER)
Считается, что HIER изменяет некоторые поперечные связи и позволяет восстановить вторичную или третичную структуру эпитопа.[1] Протокол требует оптимизации для каждой исследуемой ткани, метода фиксации и антигена.
В целом, HIER имеет гораздо более высокий уровень успеха, чем PIER. HIER можно выполнять с помощью микроволновых печей, скороварок, пароварок для овощей, автоклавов или водяных бань. HIER зависит от времени, температуры, буфера и pH.
Извлечение эпитопа при комнатной температуре (RTER)
RTER включает изменение поперечных связей с использованием кислот, таких как соляная кислота (pH 1) или муравьиная кислота (pH 2).
Рекомендации
- ^ «Методы поиска антигена». Системы НИОКР. Получено 20 марта 2019.
Этот медицинский статья - это заглушка. Вы можете помочь Википедии расширяя это. |