CFU-E - Википедия - CFU-E

КОЕ-Е означает Колониеобразующая единица-эритроид.[1] Это возникает из CFU-GEMM (через BFU-E,[2] что расшифровывается как «эритроидные взрывообразующие единицы»[3]) и порождает проэритробласты.

колонии мыши CFU-E, окрашенные на 3-й день диаминобензидином для определения гемоглобина

Мышиный анализ CFU-E

КОЕ-Э - это стадия развития эритроида между стадией БФЕ-Э и стадией проэритробласта. Анализ колоний CFU-E предназначен для определения количества колониеобразующих единиц эритроидной линии в кроветворной ткани (костном мозге, селезенке или печени плода), что может отражать потребность организма в доставке кислорода тканям. или гематопоэтическое расстройство.

Ранние предшественники эритроидов обнаруживаются довольно редко по сравнению с более поздними стадиями дифференцировки эритроидов, такими как стадии проэритробластов и базофильных эритробластов, которые могут быть обнаружены с помощью проточной цитометрии непосредственно ex-vivo (Соколовский, М; Нам, Н; Флеминг, доктор медицины; Haase, VH; Бругнара, К; Лодиш, HF (декабрь 2001 г.). «Неэффективный эритропоэз у мышей Stat5a (- / -) 5b (- / -) из-за снижения выживаемости ранних эритробластов». Кровь. 98: 3261–73. Дои:10.1182 / blood.v98.12.3261. PMID  11719363.). Кроме того, в отличие от проэритробластов и более поздних стадий развития эритроидов, не существует действительно надежных и уникальных положительных маркеров проточной цитометрии, хотя можно использовать отрицательные маркеры исключения для истощения клеточной популяции других предшественников и дифференцированных клеток путем сортировки клеток. , таким образом значительно обогащая его для активности КОЕ-Е (проспективный анализ выделения и глобального анализа экспрессии генов колониеобразующей единицы эритроцитов, Terszowski G. et al. Blood 2005). Клетки CFU-E экспрессируют рецептор Epo, c-Kit (рецептор фактора стволовых клеток), рецептор трансферрина (CD71 +) и являются Ter119 (антиген, связанный с гликофорином-A) -отрицательными. По указанным выше причинам анализ CFU-E, сколь бы неэффективным и разнообразным он ни был, все еще используется сегодня.

Клетки на стадии CFU-E экспрессируют некоторый рецептор эритропоэтина (EpoR) и, таким образом, могут быть индуцированы к окончательной дифференцировке in vitro в течение 2-3 дней в присутствии только эритропоэтина (Epo) (вместе с основным содержимым питательной среды: FBS , BSA в IMDM). Метилцеллюлоза представляет собой полутвердую добавку к среде, которая позволяет исследователю окрашивать (диаминобензидиновым реагентом для определения гемоглобина), а затем подсчитывать отдельные колонии, каждая из которых возникает из одного предшественника в чашке, который находится на стадии КОЕ-Е. Ко 2 дню с момента посева каждая колония КОЕ-Е будет содержать от 8 (минимум) до 64 гемоглобинизированных клеток, большинство из которых находятся на конечной стадии дифференцировки эритроидов. Можно увидеть небольшой спектр уровня гемоглобинизации и, возможно, размера клеток, что указывает на то, что некоторые клетки в колонии достигли конечной стадии быстрее, чем другие.

Количество клеток в колонии важно, потому что стадия проэритробластов также является Epo-чувствительной (экспрессирует рецептор Epo), но пролиферативная способность этих клеток не так высока, что дает колонию с менее чем 8 клетками. Аналогичным образом, более ранняя стадия дифференцировки эритроидов также может давать колонии в среде, содержащей только Epo, но эти колонии, вероятно, будут меньше и / или не гемоглобинизированы, поскольку стадии перед стадией CFU-E (MEP и BFU-E) требуют других факторов. (IL-3 и т. Д.) И больше времени для роста, что также задерживает терминальную дифференцировку и гемоглобинизацию.

Рекомендации

  1. ^ Миллер, Синди Л .; Дикстра, Брэд; Карнизы, Конни Дж. (2008). "Характеристика гемопоэтических стволовых клеток и клеток-предшественников мыши". Текущие протоколы в иммунологии. 80 (1): 22B.2.1–22B.2.31. Дои:10.1002 / 0471142735.im22b02s80. ISSN  1934-368X. PMID  18432636.
  2. ^ Ву Х, Лю Х, Яениш Р., Лодиш Х. Ф. (октябрь 1995 г.). «Генерация предшественников эритроидных BFU-E и CFU-E не требует эритропоэтина или рецептора эритропоэтина». Клетка. 83 (1): 59–67. Дои:10.1016/0092-8674(95)90234-1. PMID  7553874.
  3. ^ Марли С.Б., Льюис Дж. Л., Голдман Дж. М., Гордон М.Ю. (июнь 1996 г.). «Аномальная кинетика образования колоний эритроидными взрывообразующими единицами (BFU-E) при хроническом миелоидном лейкозе». Br. J. Haematol. 93 (4): 878–83. Дои:10.1046 / j.1365-2141.1996.d01-1738.x. PMID  8703820.

внешняя ссылка