Метод флуоресценции Фалька-Хилларпа - Falck-Hillarp method of fluorescence
В Метод флуоресценции Фалька-Хилларпа (в Метод F-H) - это метод, позволяющий продемонстрировать и изучить с уникальной точностью и восприимчивостью определенные моноамины, среди этих трех катехоламины дофамин, норадреналин, и адреналин, а также серотонин и родственные вещества.[1][2]
Метод основан на важном и решающем открытии того, что эти соединения способны реагировать с формальдегид - при почти полном отсутствии воды - образовывать флуорофоры, то есть молекулы, которые при облучении невидимым для глаза светом будут излучать видимый свет. Это происходит в «сухом» состоянии, без извлечения моноаминов из клеток в течение всей процедуры. Этот процесс начинается с отделения образца ткани и заканчивается получением тонкого среза ткани, который можно исследовать под флуоресцентным микроскопом.
Метод F-H впервые позволил исследователю наблюдать, как эти моноамины загораются в микроскоп, и точно определять, в каких клетках они присутствуют, и тем самым понимать их функции.[3] Метод был разработан Бенгт Фальк и Нильс-Оке Хилларп в 1960-е годы на кафедре гистологии, Лундский университет. Благодаря интенсивным нейробиологическим исследованиям стало возможным продемонстрировать присутствие моноаминов в нервных клетках, принадлежащих к центральный и периферическая нервная система и впервые осознают, что эти вещества действуют как сигнальные вещества, то есть передатчики.
Первоначальная публикация, написанная уже в 1961 году,[4] описал всестороннее исследование нервов, снабжающих большое количество органов тела. Эта работа подтвердила концепцию Ульф фон Эйлер, лауреат Нобелевской премии, норадреналин является сигнальным веществом в периферических вегетативных нервах. В том же году за этой первой публикацией последовало объяснение химической основы метода F – H.
Очень тонкие мембраны, такие как радужная оболочка или брыжейка крысы, не нужно разрезать для микроскопических исследований, их можно просто разложить на стекле, высушить, а затем подвергнуть воздействию газообразного формальдегида для последующего исследования с помощью флуоресцентного микроскопа.
Публикация по химическому фону позже была названа «200 наиболее цитируемых статей всех времен».[нужна цитата ]
В 2012 году медицинский факультет Лундского университета организовал симпозиум «От нервов к таблеткам», посвященный 50-летию первой публикации метода F-H.
использованная литература
- ^ Фальк, Б. (1962). «Наблюдения за возможностями клеточной локализации моноаминов флуоресцентным методом». Acta Physiol. Сканд. 56 (приложение 197): 1–25.
- ^ Falck, B .; Hillarp, N.A .; Thieme, G .; Торп, А. (1982). «Флуоресценция катехоламинов и родственных соединений, конденсированных с формальдегидом». Бюллетень исследований мозга. 9 (1–6): xi – xv. Дои:10.1016/0361-9230(82)90113-7. PMID 7172023. S2CID 4706681.
- ^ «Метод Фалька-Хилларпа - революция в изучении моноаминовых систем в ЦНС». Центр неврологии Валленберга, Лундский университет. 2019-01-09.
- ^ FALCK B; ТОРП А (1962). «Новые доказательства локализации норадреналина в адренергических нервных окончаниях». Medicina Experimentalis. 6 (3): 169–72. Дои:10.1159/000135153. PMID 13891409.