MTSL - Википедия - MTSL
Имена | |
---|---|
Название ИЮПАК S- (1-оксил-2,2,5,5-тетраметил-2,5-дигидро-1H-пиррол-3-ил) метилметансульфонотиоат | |
Другие имена MTSL | |
Идентификаторы | |
3D модель (JSmol ) | |
ChemSpider | |
PubChem CID | |
| |
| |
Характеристики | |
C10ЧАС18NО3S2 | |
Молярная масса | 264.38 г · моль−1 |
Если не указано иное, данные для материалов приведены в их стандартное состояние (при 25 ° C [77 ° F], 100 кПа). | |
проверять (что ?) | |
Ссылки на инфобоксы | |
MTSL (S- (1-оксил-2,2,5,5-тетраметил-2,5-дигидро-1H-пиррол-3-ил) метилметансульфонотиоат) представляет собой сероорганическое соединение который используется как нитроксид метка вращения.[1] MTSL - это бифункциональный, состоящий из нитроксида и сложного эфира тиосульфоновой кислоты функциональные группы. Этикетка из нитроксила стерически защищена, поэтому она относительно инертна.
Маркировка
MTSL присоединяется к белкам путем реакции с тиоловыми группами. В реакции используется стандартная реакционная способность эфиров тиосульфата. Сульфиновая кислота (CH3ТАК2H) - уходящая группа:
- RSO2S-нитроксид + белок-SH → белок-SS-нитроксид + RSO2ЧАС
В гетеродисульфид связь с цистеин остаток устойчив, что позволяет центрировать спин-мечение.[2][3] Часть MTSL добавит 184,3 дальтон к массе белок или же пептид к которому он прикреплен. Цистеин можно ввести с помощью сайт-направленный мутагенез, и, следовательно, большинство положений в белке можно пометить.
Спектроскопия
В Ядерный магнитный резонанс введение парамагнитной группы увеличивает скорость релаксации близлежащих ядра.[1] Его присутствие можно обнаружить по уширению пиков и потере интенсивности пиков, соответствующих соседним ядрам. Следовательно, близость может быть сделана для всех затронутых ядер. Основным преимуществом этого метода по сравнению с традиционными методами получения ограничений расстояния в белковом ЯМР является увеличенная длина, поскольку усиление парамагнитной релаксации может определять расстояния до 25 Å (2.5 нм ) в отличие от примерно 6 Å (0,6 нм) при использовании ядерный эффект Оверхаузера. Спиновое мечение с помощью MTSL часто используется при исследовании остаточной структуры в внутренне неструктурированные белки.
Рекомендации
- ^ а б Кристиан Альтенбах, Кён-Джун О, Рене Дж. Трабанино, Кальман Хидег, Уэйн Л. Хаббелл "Оценка расстояний между остатками в спин-меченных белках при физиологических температурах: экспериментальные стратегии и практические ограничения" Биохимия, 2001, том 40, стр. 15471 –15482. Дои:10.1021 / bi011544w
- ^ Кеньон, Г.Л. и Брюс, Т.В. (1977). Новые сульфгидрильные реагенты. Методы в энзимологии 47, 407-430. Дои:10.1016/0076-6879(77)47042-3
- ^ Берлинер, Л.Дж., Грюнвальд, Дж., Ханковски, Х.О., Хидег, К. (1982). Новая обратимая тиол-специфическая спиновая метка: мечение и ингибирование активного сайта папаина. Аналитическая биохимия 119, 450-455. Дои:10.1016/0003-2697(82)90612-1