Транскрипционная амплификация - Transcription-mediated amplification

Транскрипционная амплификация (TMA) - изотермический (не меняет температуру нуклеиновой кислоты), однотрубный нуклеиновая кислота система амплификации с использованием двух ферментов, РНК-полимераза и обратная транскриптаза. «Амплификация» означает создание намного большего количества копий цепи нуклеиновой кислоты, чем было вначале, для того, чтобы легко обнаружить или протестировать ее. Быстрая амплификация целевой РНК / ДНК позволяет лаборатории одновременно обнаруживать несколько патогенных организмов в одной пробирке. Технология ТМА позволяет клинической лаборатории выполнять тест на нуклеиновую кислоту (NAT) для скрининга крови с меньшим количеством этапов, меньшим временем обработки и более быстрыми результатами. молекулярная биология, криминалистика, и лекарство для быстрой идентификации и диагностики патогенных организмов, в отличие от аналогичных методов, таких как полимеразной цепной реакции и лигазная цепная реакция, этот метод включает транскрипцию РНК (через РНК-полимераза ) и синтез ДНК (через обратная транскриптаза ) для производства РНК ампликон (источник или продукт амплификации) из целевой нуклеиновой кислоты. Этот метод можно использовать для нацеливания как на РНК, так и на ДНК.

Опосредованная транскрипцией амплификация имеет несколько преимуществ по сравнению с другими методами амплификации, включая:

  • TMA - это изотермический; вместо термоциклера используется водяная баня или нагревательный блок.
  • ТМА производит ампликон РНК, а не ампликон ДНК. Поскольку РНК более лабильна в лабораторных условиях, это снижает вероятность переноса загрязнения.
  • TMA производит 100–1000 копий за цикл (PCR и LCR экспоненциально удваиваются за каждый цикл). Это приводит к увеличению количества копий ДНК (или РНК) в 10 миллиардов раз в течение примерно 15–30 минут.

Из: http://www.gen-probe.com