Молярный коэффициент затухания - Molar attenuation coefficient
В молярный коэффициент затухания это мера того, насколько сильно химические вещества ослабляет свет при заданном длина волны. Это внутренняя собственность вида. В Единица СИ молярного коэффициента затухания - квадратный метр на крот (м2/ моль), но на практике количества обычно выражаются через M−1⋅см−1 или L⋅mol−1⋅см−1 (последние две единицы равны 0,1 м2/ моль). В более ранней литературе см2/ моль иногда используется; 1 млн−1⋅см−1 равно 1000 см2/ моль. Молярный коэффициент затухания также известен как молярный коэффициент экстинкции и молярная поглощающая способность, но использование этих альтернативных терминов не одобрялось IUPAC.[1][2]
Закон Бера – Ламберта
В поглощение материала, который имеет только один ослабляющий компонент, также зависит от длины пути и концентрации частиц в соответствии с Закон Бера – Ламберта
куда
- ε это молярный коэффициент затухания из этого материала;
- c это молярная концентрация этих видов;
- ℓ это длина пути.
В разных дисциплинах есть разные соглашения относительно того, поглощение является декадным (на основе 10) или по Напьеру (на основе e), т.е. определяется по отношению к передаче через десятичный логарифм (бревно10) или натуральный логарифм (пер). Молярный коэффициент затухания обычно декадный.[3] Когда существует двусмысленность, лучше указать, какой из них применим.
Когда есть N виды ослабления в растворе, общая абсорбция - это сумма абсорбций для каждого отдельного вида я:
Состав смеси N аттенуирующие вещества могут быть обнаружены путем измерения оптической плотности при N длины волн (также должны быть известны значения молярного коэффициента ослабления для каждого вида на этих длинах волн). Выбранные длины волн обычно являются длинами волн максимального поглощения (максимумов поглощения) для отдельных видов. Ни одна из длин волн не должна быть изобестическая точка для пары видов. Набор следующих одновременные уравнения можно решить, чтобы найти концентрации каждого ослабляющего вещества:
Молярный коэффициент затухания (в см2) напрямую связано с сечение затухания через Константа Авогадро NА:[4]
Коэффициент ослабления массы
В массовый коэффициент затухания равен молярному коэффициенту ослабления, деленному на молярная масса.
Белки
В биохимия, молярный коэффициент затухания белок в 280 нм зависит почти исключительно от количества ароматических остатков, особенно триптофан, и его можно предсказать из последовательности аминокислоты.[5] Аналогично, коэффициент экстинкции нуклеиновые кислоты при 260 нм можно предсказать с учетом нуклеотидной последовательности.
Если известен молярный коэффициент ослабления, его можно использовать для определения концентрации белка в растворе.
Рекомендации
- ^ ИЮПАК, Сборник химической терминологии, 2-е изд. («Золотая книга») (1997). Исправленная онлайн-версия: (2006–) "Вымирание ". Дои:10.1351 / goldbook.E02293
- ^ ИЮПАК, Сборник химической терминологии, 2-е изд. («Золотая книга») (1997). Исправленная онлайн-версия: (2006–) "Впитывающая способность ". Дои:10.1351 / goldbook.A00044
- ^ «Архивная копия» (PDF). Архивировано из оригинал (PDF) на 2008-09-20. Получено 2009-09-02.CS1 maint: заархивированная копия как заголовок (связь)«Архивная копия» (PDF). Архивировано из оригинал (PDF) на 2007-06-09. Получено 2009-09-02.CS1 maint: заархивированная копия как заголовок (связь)«Архивная копия» (PDF). Архивировано из оригинал (PDF) на 2007-06-09. Получено 2009-09-02.CS1 maint: заархивированная копия как заголовок (связь)
- ^ Лакович, Дж. Р. (2006). Принципы флуоресцентной спектроскопии (3-е изд.). Нью-Йорк: Спрингер. п. 59. ISBN 9780387312781.
- ^ Gill, S.C .; фон Хиппель, П. Х. (1989). «Расчет коэффициентов экстинкции белков по данным аминокислотной последовательности». Аналитическая биохимия. 182 (2): 319–326. Дои:10.1016/0003-2697(89)90602-7. PMID 2610349.
внешняя ссылка
- Nikon MicroscopyU: Введение в флуоресцентные белки включает таблицу молярного коэффициента затухания флуоресцентные белки.