Ацилдепсипептидные антибиотики - Википедия - Acyldepsipeptide antibiotics

Ацилдепсипептид или же циклический ацилдепсипептид (ADEP) - это класс потенциальных антибиотики сначала изолированы от бактерий и действуют путем дерегулирования ClpP протеаза. Природные ADEP изначально были обнаружены как продукты аэробного ферментация в Streptomyces hawaiiensis, A54556A и B,[1] и в культуральном отваре Streptomyces виды, энопептин А и В.[2] ADEP представляют большой интерес для разработки лекарств из-за их антибиотических свойств и, таким образом, модифицируются, чтобы добиться большего. противомикробный Мероприятия.[3][4]

Потенциальная роль ADEP в борьбе с устойчивостью к антибиотикам постулируется из-за их нового механизма действия, который, как известно, не используется другими антибиотиками, - активации казеинолитической протеазы (ClpP ), который является важным бактериальным протеаза.[5][6] Большинство антибиотиков действуют посредством ингибирующих процессов, вызывая гибель клеток, в то время как ADEP фактически работают через активацию протеазы, вызывая неконтролируемую деградацию белка, ингибирование деление клеток, и последующая гибель клеток.[3][4][7] Они во многом влияют Грамположительные бактерии[4] и может быть очень полезен для таргетинга устойчивый к антибиотикам микробы, такие как устойчивые к метициллину Золотистый стафилококк (MRSA ), устойчивый к пенициллину Пневмококк (ДССБ ), Микобактерии туберкулеза, и другие.[3][4] Несмотря на потенциальное использование ADEP, возможная устойчивость была изучена у некоторых видов.[8]

Химические структуры природных ADEP

  • Энопептин А

  • Энопептин B

  • A54556A

  • A54556B

Механизм

1. ClpP не может разрушать белковые цепи длиной более 5 пептидов, потому что они больше, чем его протеолитический канал. 2. ClpP требует, чтобы АТФаза разворачивала большие белки, позволяя им проходить через канал ClpP. 3. Когда ADEP связываются с ClpP, комплекс АТФаза / ClpP диссоциирует. 4. Протеолитический канал ClpP становится достаточно большим, чтобы расщеплять белки без помощи какой-либо АТФазы.

Антибиотики ADEP можно использовать для борьбы с устойчивыми бактериальными инфекциями. Они связываются с ClpP и позволяют протеазе расщеплять белки без помощи АТФазы.[6][9][10] Комплексы ADEP4 / ClpP нацелены в первую очередь на вновь образованные белки и FtsZ, который делает возможным деление клеток. Активная форма ClpP представляет собой тетрадекамер, состоящий из двух гептамеров, с которыми связываются 14 ADEP.[6]

14 ADEP связываются с ClpP, что приводит к изменениям в его структуре. Протеолитический канал ClpP переходит из закрытого в открытое и нерегулируемое состояние. 1. Вид сверху 2. Вид сбоку

ADEP связываются в полостях, образованных двумя мономерами ClpP.[6][11] Их сайт связывания состоит из гидрофобных остатков и соответствует сайтам связывания АТФаз ClpP. После связывания происходит ряд сдвигов вторичных структур от внешней области к центру ClpP. Это переводит гибкую N-концевую β-петлю в неупорядоченное состояние. Β-петли обычно образуют ворота над протеолитическим каналом и предотвращают случайное прохождение белков. Они имеют решающее значение для взаимодействия ClpP с его субстратом и АТФазами. Когда ADEP связывается, β-петли смещаются наружу, и это сопровождается сдвигами двух α-спиралей (α1 и α2), четырех β-цепей (β1, β2, β3 и β5) и других петель, которые приводят к открытию поры ClpP. Таким образом, ADEP4 отменяет регулирование функции ClpP и переводит ее из закрытого состояния в открытое. На этом этапе его специфическая протеолитическая активность становится менее контролируемым процессом с разрушением белков, которые находятся в клетке-мишени.

Пептидаза ClpP высоко консервативна во всех организмах и жестко регулируется.[4] Без активации ClpP в нормальных условиях может разрушать короткие пептиды, которые свободно диффундируют во внутреннюю камеру деградации.[12] Белки семейства Clp представляют собой АТФ-зависимые протеазы, которые играют решающую роль в функции клетки, разрушая неправильно свернутые белки.[9] ClpP сам по себе является мономером, но при связывании с ним олигомеризуется в тетрадекамеры. АТФазы.[13] Ему нужна АТФаза, чтобы идентифицировать, разворачивать и переносить большие белки-мишени в свой протеолитический канал.[6][9][11] Фактически, ClpP сам по себе может только ухудшить пептиды длиной до шести аминокислот.[13]Связывание ADEP индуцирует ClpP протеолитический активация, которая приводит к деградации белков в клетке, особенно зарождающийся белки и Ftsz белок, который является важным белком в делении клеток.[6][9] Это потенциально приводит к гибели клеток и является причиной того, что ADEP является многообещающим методом для разработки лекарств.

Для свернутых белков, развернутых белков и длинных пептидов ClpP должен быть активирован белком из семейства АТФаз, связанным с различными клеточными активностями (Белки AAA ), например ClpA, ClpX или ClpC.[12] Эти белки-шапероны несут ответственность за гидролизующий АТФ в АДФ, используя энергию, а затем принимая свернутые белки и разворачивая их.[14] Затем Clp-ATPases перемещают развернутые белки в камеру деградации внутри ClpP, обеспечивая процессную деградацию субстрат.[12][15] Этот процесс жестко регулируется гидролизом АТФ, чтобы предотвратить неконтролируемую деградацию белков или пептидов, которая может быть вредной для клетки.[4]

Напротив, ADEP активирует ClpP без необходимости гидролиза АТФ, вызывая разрушение развернутых белков и пептидов внутри клетки с неконтролируемой скоростью.[12] Считается, что ADEP слегка связываются совместно на поверхности каждого кольца ClpP в его гидрофобный карманы и есть аллостерический эффекты при активации ClpP.[12] Это связывание инициирует ClpP для прохождения конформационное изменение так что его N-концевой область открывает свою осевую пору, чтобы обеспечить частичную деградацию продуктов по сравнению с прогрессирующей деградацией с ClpA.[12] Активация ClpP ADEP не допускает деградации свернутого белка, но даже при расщеплении развернутого белка и пептида ADEP все еще вызывает гибель бактериальных клеток.[12]

Исследования показали, что активированный ADEP ClpP нацелен на деление клеток, а не на метаболический процессы.[7] ADEP, по-видимому, инициирует ClpP, чтобы предпочтительно разлагать FtsZ, важный бактериальный белок, участвующий в перегородка образование, необходимое для деления бактериальных клеток.[7] В результате грамположительные бактерии, обработанные ADEP, образуют длинные нити перед смертью клетки.[4][7]

Преимущества

Когда бактерии подвергаются воздействию антибиотиков, они могут стать устойчивыми или толерантными к антибиотику. ADEP имеют большой потенциал для клинического применения из-за их высокой антибактериальной активности в отношении грамположительных патогенов, таких как Staphylococcus aureus, и других патогенов, которые обнаруживаются в биопленках и хронических инфекциях. Их эффективность увеличивается в сочетании с различными антибиотиками, такими как ципрофлоксацин, линезолид, ванкомицин или рифампицин.[9] Дополнительные исследования должны быть больше сосредоточены на токсичности ADEP и их применении в клинической практике.

Приложения

После того, как в журнале Nature было опубликовано нарушение регуляции бактериального протеолитического аппарата новым классом антибиотиков, многие ученые начали изучать этот антибиотик. Большинство экспериментов сосредоточено на том, как работает комплекс ADEP / ClpP, и на функциональной разнице между ADEP и его синтетическим сородичи.

В 2011 году П. Сасс и его сотрудники провели исследование, посвященное взаимодействию и функциям ADEP и ClpP. Они побудили ADEP в Bacillus subtilis, Золотистый стафилококк и Пневмококк определить, как ADEP приводит к гибели бактерий.[16] Результаты показали, что ADEP нарушает деление бактериальных клеток. Чтобы определить причину, по которой ADEP ингибирует деление клеток, исследователи наблюдали за: перегородка образование и сегрегация нуклеоидов в ADEP Б. subtilis и ADEP S. aureus. В S. aureus и Б. subtilis образцы дали эквивалентные результаты. Эта часть показала важность ClpP дикого типа и ингибирование образования перегородки путем прямого вмешательства ADEP в компоненты деления клеток. Исследования локализации GFP-меченных белков деления клеток продемонстрировали, что ADEP вызывает делокализацию Ftsz и ингибирование сборки Z-кольца у обоих видов. Влияние ADEP на мутант ∆clpX указывает на то, что ADEP влияет на деление клеток и что он также ингибирует сборку Z-кольца. Наконец, исследователи повторяют эксперимент с мутантом ∆ClpP, чтобы подтвердить, что присутствие ADEP снижает количество FtsZ за счет деградации ClpP.

В 2013 году ученые Северо-Восточного университета провели эксперимент, посвященный тому, как работает ADEP 4 / ClpP.[9] Результаты экспериментов показали эффективность ADEP4 в сочетании с другими антибиотиками. Исследователи контролировали количество триповых пептидов и выяснили, что ADEP4 / ClpP вызывает деградацию пептидов в системе биопленок. Используя бульон Мюллера-Хинтона, они продемонстрировали, что ADEP 4 более эффективен, чем другие антибиотики, такие как рифампицин или же ванкомицин. Тем не менее, они наблюдали те же тенденции, когда ADEP4 в сочетании с рифампицином более эффективен и фактически устраняет все стационарные фазы. Результаты in vitro показали эффективность ADEP 4 у мышей, инфицированных 4 различными штаммами S. aureus, лабораторным штаммом SA113 и клиническими изолятами USA300, UAMS-1 и штаммом 37.

Химия

ADEP - это природные антибиотики. Некоторые бактерии производят их как защитный механизм при взаимодействии антагонистов с бактериями.[17] Например, Streptomyces виды производят их как вторичные метаболиты.[18]

ADEP 1 и его синтетические аналоги

Существует 6 форм ацилдепсипептидов, которые различаются по их химической структуре и функциям.[13] ADEP обычно различаются одной или двумя функциональными группами, которые придают некоторым из них большую гибкость и стабильность.[10] Их химические структуры заимствованы из ADEP 1 и немного отличаются друг от друга.[6][13] Например, единственное различие между ADEP 2 и ADEP 3 заключается в конформации боковой цепи дифторфенилаланина. ADEP 2 имеет конфигурацию S, а ADEP 3 - конфигурацию R.[10]

Молекулярная модификация

Чтобы разработать полезный антибиотик, ADEP продолжают модифицироваться для повышения антимикробной активности и стабильности. Ограничивая компоненты ADEP для уменьшения гибкости молекулы, связывание усиливается и антимикробная активность значительно увеличивается.[3] Специфический аминокислоты существенные для пептидолактонового ядра ADEP были изменены и ограничены, что привело к стабилизации ADEP в биоактивной конформации.[3] Фактически, конформационные ограничения ADEP привели к тому, что его способность активировать ClpP увеличилась в семь раз, а его антимикробная активность - в 1200 раз.[3] Исследования по изменению молекул ADEP продолжаются в попытке создать новый антибиотик для общественного использования.

Рекомендации

  1. ^ К. Х. Мишель, Р. Э. Кастнер (Eli Lilly and Company), US 4492650, 1985 [Chem. Abstr. 1985, 102, 130459].
  2. ^ Осада, Хироюки; Яно, Тацуя; Кошино, Хироюки; Исоно, Киёси (1991). «Энопептин А, новый депсипептидный антибиотик с антибактериофаговой активностью». Журнал антибиотиков. 44 (12): 1463–1466. Дои:10.7164 / антибиотики.44.1463. PMID  1778798.
  3. ^ а б c d е ж Карни, Дэниел В .; Schmitz, Karl R .; Truong, Jonathan V .; Зауэр, Роберт Т .; Селло, Джейсон К. (2014). «Ограничение конформационной динамики циклических ацилдепсипептидных антибиотиков улучшает их антибактериальную активность». JACS. 136 (5): 1922–1929. Дои:10.1021 / ja410385c. ЧВК  4004210. PMID  24422534.
  4. ^ а б c d е ж грамм Хинзен, Бертольд; Лабищинский, Харальд; Бретц-Эстерхельт, Хайке; Эндерманн, Райнер; Бенет-Бухгольц, Хорди; Хеллвиг, Вероника; Хэбих, Дитер; Шумахер, Андреас; Лампе, Томас; Паульсен, Хольгер; Раддац, Зигфрид (2006). «Оптимизация медицинской химии ацилдепсипептидов антибиотиков класса энопептинов». ChemMedChem. 1 (7): 689–693. Дои:10.1002 / cmdc.200600055. PMID  16902918. S2CID  36525372.
  5. ^ Brötz-Oesterhelt, Heike; Beyer, D .; Kroll, H.P .; Enderman, R .; Ladel, C .; Schroeder, W .; Hinzen, B .; Raddatz, S .; Paulsen, H .; Henniger, K .; Bandow, J.E .; Sahl, H.G .; Лабищинский, Х. (2 октября 2005 г.). «Нарушение регуляции бактериального протеолитического аппарата новым классом антибиотиков». Природа Медицина. 11 (10): 1082–1087. Дои:10,1038 / нм1306. PMID  16200071. S2CID  661201.
  6. ^ а б c d е ж грамм Lee, BG; Парк, EY; Lee, KE; Jeon, H; Sung, KH; Paulsen, H; Rübsamen-Schaeff, H; Песня, HK (2010). «Структуры ClpP в комплексе с ацилдепсипептидными антибиотиками раскрывают механизм его активации». Структурная и молекулярная биология природы. 17 (4): 471–8. Дои:10.1038 / nsmb.1787. PMID  20305655. S2CID  20029980.
  7. ^ а б c d Сасс, Питер; Josten, Michaele; Фамулла, Кирстен; Шиффер, Гвидо; Сахи, Ханс-Георг; Хамоэн, Леендерт; Brotz-Oesterhelt, Heike (2011). «Антибиотические ацилдепсипептиды активируют пептидазу ClpP для разрушения белка деления клеток FtsZ». PNAS. 108 (42): 17474–17479. Bibcode:2011PNAS..10817474S. Дои:10.1073 / pnas.1110385108. ЧВК  3198362. PMID  21969594.
  8. ^ Гоминет, М .; Seghezzi, N .; Мазодье, П. (2011). «Устойчивость к ацилдепсипептиду (ADEP) у Streptomyces». Микробиология. 157 (8): 2226–2234. Дои:10.1099 / микрофон.0.048454-0. PMID  21636652.
  9. ^ а б c d е ж Конлон, Б.П .; Накаясу, E. S .; Fleck, L.E .; LaFleur, M.D .; Изабелла, В. М .; Coleman, K .; Леонард, С. Н .; Smith, R.D .; Adkins, J. N .; Льюис, К. (21 ноября 2013 г.). «Активированный ClpP убивает персистеры и устраняет хроническую инфекцию биопленок». Природа. 503 (7476): 365–370. Bibcode:2013Натура.503..365C. Дои:10.1038 / природа12790. ЧВК  4031760. PMID  24226776.
  10. ^ а б c Hinzen, B .; Raddatz, S .; Paulsen, H .; Lampe, T .; Шумахер, А .; Häbich, D .; Hellwig, V .; Bennet-Buchholz, J .; Endermann, R .; Labischinski, H .; Brötz-Oesterhelt, H. (10 июля 2006 г.). «Оптимизация медицинской химии ацилдепсипептидов антибиотиков класса энопептина». ChemMedChem. 1 (7): 689–693. Дои:10.1002 / cmdc.200600055. PMID  16902918. S2CID  36525372.
  11. ^ а б Li, D.H .; Чунг Ю.С.; Gloyd M; Джозеф Э; Гирландо Р; Wright GD; Cheng YQ; Маурици MR; Guarné A; Ортега Дж. (24 сентября 2010 г.). «Ацилдепсипептидные антибиотики индуцируют образование структурированного осевого канала в ClpP: модель ClpX / ClpA-связанного состояния ClpP». Химия и биология. 17 (9): 959–969. Дои:10.1016 / j.chembiol.2010.07.008. ЧВК  2955292. PMID  20851345.
  12. ^ а б c d е ж грамм Ли; Хим Шун, Доминик; Гуарне, Альба; Маурици, Майкл Р .; Чэн И-Цян; Райт, Джерард Д.; Гирландо, Родольфо; Джозеф, Эбенезер; Глойд, Мелани; Сон Чунг, Ю; Ортега, Хоакин (2010). «Ацилдепсипептидные антибиотики индуцируют образование структурированного осевого канала в ClpP: модель ClpX / ClpA-связанного состояния ClpP». Химия и биология. 17 (9): 959–969. Дои:10.1016 / j.chembiol.2010.07.008. ЧВК  2955292. PMID  20851345.
  13. ^ а б c d Кирштейн, Дж .; Hoffmann A; Lilie H; Schmidt R; Rübsamen-Waigmann H; Brötz-Oesterhelt H; Mogk A; Тургай К (26.03.2009). «Антибиотик ADEP перепрограммирует ClpP, переключая его с регулируемой протеазы на неконтролируемую». EMBO Молекулярная медицина. 1 (1): 37–49. Дои:10.1002 / emmm.200900002. ЧВК  3378108. PMID  20049702. Проверено 6 апреля 2016 г.
  14. ^ Хоскинс, Дж. Р. (1998). «Роль шаперона ClpA в протеолизе ClpAP». Труды Национальной академии наук. 95 (21): 12135–12140. Bibcode:1998PNAS ... 9512135H. Дои:10.1073 / pnas.95.21.12135. ЧВК  22797. PMID  9770452.
  15. ^ Ishikawa, T .; Beuron, F .; Кессель, М .; Wickner, S .; Maurizi, M .; Стивен, А. (2001). «Путь транслокации белковых субстратов в протеазе ClpAP». Труды Национальной академии наук. 98 (8): 4328–4333. Bibcode:2001PNAS ... 98.4328I. Дои:10.1073 / pnas.081543698. ЧВК  31834. PMID  11287666.
  16. ^ Сасс, Питер; Josten, Michaele; Фамулла, Кирстен; Шиффер, Гвидо; Сахл, Ханс-Георг; Ха, Леендерт; Бёрц-Эстерхельт, Хайке (2011). «Антибиотические ацилдепсипептиды активируют пептидазу ClpP для разрушения белка деления клеток FtsZ». Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки. 108 (42): 17474–17479. Bibcode:2011PNAS..10817474S. Дои:10.1073 / pnas.1110385108. ЧВК  3198362. PMID  21969594.
  17. ^ Стейси, Кевин. «Умная химия и новый класс антибиотиков». Брауновский университет. Получено 2014-03-15.
  18. ^ Xu, S .; Guo, P .; Gao, Y .; Shi, Q .; Он, Д .; Gao, Y .; Чжан, Х. (2013). «Ацилдепсипептиды подавляют рост клеток рака почек посредством остановки клеточного цикла в фазе G1». Сообщения о биохимических и биофизических исследованиях. 438 (3): 468–472. Дои:10.1016 / j.bbrc.2013.07.119. PMID  23928161.

дальнейшее чтение

  • Молекулярное описание ADEP1