Раствор Буэна - Википедия - Bouin solution

Раствор Буэна, или же Раствор Буэна, представляет собой соединение фиксатор используется в гистология.[1] Его изобрел французский биолог. Пол Буэн и состоит из пикриновая кислота, уксусная кислота и формальдегид в водном растворе. [2] Жидкость Буэна особенно полезна для фиксации желудочно-кишечный тракт биопсии, потому что этот фиксатор позволяет более четкое и лучшее ядерный окрашивание чем 10% формалин с нейтральным буфером. Это не лучший фиксатор, когда ткань ультраструктура должен быть сохранен для электронная микроскопия. Однако это хороший фиксатор, когда необходимо сохранить структуру ткани с мягкой и нежной текстурой. Уксусная кислота в этом фиксаторе лизирует красные кровяные тельца и растворяет небольшие отложения железа и кальция в тканях. Вариант, в котором уксусная кислота заменена на муравьиная кислота может использоваться как для фиксации тканей, так и для декальцинации.[3] Эффекты трех химических веществ в растворе Буэна уравновешивают друг друга. Формалин приводит к тому, что цитоплазма становится базофильной, но этот эффект уравновешивается действием пикриновой кислоты. Это приводит к превосходным ядерным и цитоплазматическим Окрашивание H&E. Упрочняющее действие формалина уравновешивает фиксацию мягких тканей пикриновой и уксусной кислотами. Эффект набухания тканей уксусной кислоты уравновешивается эффектом сокращения тканей пикриновой кислотой.[4]

Гидратированные срезы фиксированной формальдегидом ткани обычно предварительно обрабатывают раствором Буэна для получения правильных результатов в трихромные пятна для контрастирования цветов в коллагеновых и цитоплазматических (мышечных) волокнах. Методы трихрома были разработаны для тканей, фиксированных в кислых смесях, содержащих хлорид ртути, которые сейчас используются только в небольшом масштабе.) Только пикриновый кислотный компонент раствора Буэна необходим для коррекции окрашивания трихромом.[5]

При использовании раствора Буэна может возникнуть несколько потенциальных проблем. Из-за наличия формалина в растворе при просмотре срезов тканей под микроскопом может присутствовать формалиновый пигмент. Влажные ткани следует фиксировать в растворе Буэна менее 24 часов. Избыток пикриновой кислоты следует смыть с ткани несколькими спиртовыми и водными растворами, иначе качество окрашивания со временем может ухудшиться. Влажные ткани, зафиксированные в растворе Буэна, следует хранить в растворе спирта и воды, а не в растворе Буэна. Поскольку раствор Буэна содержит формальдегид, пикриновую кислоту и уксусную кислоту, необходимо принять соответствующие меры безопасности для этих веществ и соблюдать правила. В частности, отмечая, что пикриновая кислота может быть взрывоопасной, чувствительной к трению и ударам при высыхании и при контакте с некоторыми металлами, может образовывать нестабильные пикраты металлов.

Под названием «жидкость Буэна» этот фиксатор также широко используется для морских беспозвоночных.[6] Его готовят следующим образом: пикриновая кислота, насыщенный водный раствор - 75 мл; формалин, 40% водный раствор - 25 мл; кислота уксусная, ледяная - 5 мл.[7]

Вариации

Жандре решение

Раствор Жандре - это спиртовая версия раствора Буэна. При приготовлении этого раствора вместо водного раствора, насыщенного пикриновой кислотой, используется спиртовой раствор, насыщенный пикриновой кислотой. Это решение полезно, когда гликоген и другие углеводы должны сохраняться в ткани. Его получают путем смешивания насыщенного раствора пикриновой кислоты в 95% этаноле (80 мл) с формалином (37-40% формальдегида) (15 мл) и ледяной уксусной кислотой (5 мл).[8] Фиксатор Жендра содержит больше пикриновой кислоты, чем фиксатор Буэна, из-за большей растворимости (6,23% мас. / Об.) В этаноле, чем в воде (1,23% мас. / Об.).[9]

Решение Олланда

Раствор Олланда - это вариант раствора Буэна, который содержит ацетат меди. Ацетат меди стабилизирует мембраны красных кровяных телец и гранулы из эозинофилы и эндокринный клетки, так что происходит меньший лизис этих клеточных компонентов, чем в обычном растворе Буэна.[10] Фиксатор холландов получают путем добавления 6,25 г ацетата меди, 10 г пикриновой кислоты (влажный порошок), 25 мл формалина (37-40% формальдегида) и 2,5 мл ледяной (100%) уксусной кислоты в 250 мл воды.[11]

Рекомендации

  1. ^ Carson, Freida L .; Хладик, Криста (2009). Гистотехнология: текст для самообучения (3-е изд.). Гонконг: Американское общество клинической патологии Нажмите. п. 19. ISBN  978-0-89189-581-7.
  2. ^ Каллинг, C.F.A. 1974. Справочник по гистопатологическим и гистохимическим методам (включая музейные методы), 3-е изд. Лондон: Баттервортс, стр. 49.
  3. ^ Бэнкрофт, Джон Д .; Гэмбл, Мэрилин, ред. (2008). Теория и практика методов гистологии (6 изд.). Китай: Черчилль Ливингстон Эльзевьер. п. 72. ISBN  978-0-443-10279-0.
  4. ^ Бейкер, Дж. Р. 1958. Принципы биологической микротехники. Лондон, Метуэн, стр. 149–150.
  5. ^ Кирнан, Дж. 2015 Гистологические и гистохимические методы. Теория и практика. Банбери, Великобритания: Scion, стр.195.
  6. ^ Линкольн, Роджер Дж .; Шилс, Джон Гордон, ред. (1979). Беспозвоночные животные - сбор и сохранение (1-е изд.). Великобритания: Британский музей (естественная история). п. 128. ISBN  0 521 296773.
  7. ^ Каллинг, C.F.A. 1974. Справочник по гистопатологическим и гистохимическим методам (включая музейные методы), 3-е изд. Лондон: Баттервортс, стр. 49.
  8. ^ Каллинг, C.F.A. 1974. Справочник по гистопатологическим и гистохимическим методам (включая музейные методы), 3-е изд. Лондон: Баттервортс, стр. 49.
  9. ^ Дин, Дж. 1973. Справочник Ланге по химии, 11-е изд. Нью-Йорк: Макгроу-Хилл, стр.7-383.
  10. ^ Carson, Freida L .; Хладик, Криста (2009). Гистотехнология: текст для самообучения (3-е изд.). Гонконг: Американское общество клинической патологии Нажмите. п. 19. ISBN  978-0-89189-581-7.
  11. ^ Грей, П. 1954. Формуляр и руководство микротомиста. Перепечатано в 1975 году. Хантингтон, штат Нью-Йорк: Крейгер, стр.220.