Метод Голгиса - Википедия - Golgis method

Рисунок Камилло Гольджи гиппокамп окрашенные методом нитрата серебра
Рисунок Клетка Пуркинье в мозжечок кора сделано Сантьяго Рамоном-и-Кахалем, наглядно демонстрируя возможности метода окрашивания Гольджи для выявления мелких деталей
Неокортикальный пирамидный нейрон окрашены методом Гольджи. Обратите внимание на апикальный дендрит, проходящий вертикально над сомой, и на многочисленные базальные дендриты, расходящиеся латерально от основания тела клетки.

Метод Гольджи это окрашивание серебром техника, которая используется для визуализации нервная ткань под световой микроскопией. Метод был открыт Камилло Гольджи, Итальянский врач и ученый, опубликовавший первую фотографию, выполненную этой техникой, в 1873 году.[1] Первоначально он назывался черная реакция (La Reazione Nera) по Гольджи, но он стал более известен как пятно Гольджи или позже, метод Гольджи.

Окрашивание по Гольджи использовали испанский нейроанатом Сантьяго Рамон-и-Кахаль (1852–1934), чтобы открыть ряд новых фактов об организации нервной системы, которые вдохновили рождение учение о нейронах. В конечном итоге Рамон-и-Кахаль усовершенствовал технику, применив метод, который он назвал «двойной пропиткой». Техника окрашивания Рамона-и-Кахала, которая используется до сих пор, называется «Пятно Кахала».[нужна цитата ]

Механизм

Клетки нервной ткани плотно упакованы, и мало информации об их структурах и взаимосвязях можно получить, если все клетки окрашены. Кроме того, тонкие нитевидные отростки нервных клеток, включая аксон и дендриты нейронов, слишком тонкие и прозрачные, чтобы их можно было увидеть с помощью обычных методов окрашивания. Метод Гольджи окрашивает ограниченное количество клеток случайным образом полностью. Механизм, с помощью которого это происходит, по большей части неизвестен.[2] Дендриты, а также сома клеток четко окрашены в коричневый и черный цвета, и их можно проследить по всей длине, что позволило нейроанатомам отслеживать связи между нейронами и делать видимыми сложную сетевую структуру многих частей мозг и спинной мозг.

Окрашивание по Гольджи достигается путем пропитки фиксированной альдегидом нервной ткани веществом дихромат калия и нитрат серебра. Окрашенные таким образом клетки заполнены микрокристаллизация из хромат серебра.

Техника

Согласно SynapseWeb,[3] это рецепт техники окрашивания Гольджи:

  1. Погрузите блок (примерно 10x5 мм) из формальдегид -фиксировано (или параформальдегид - глутаральдегид перфузия) мозговой ткани в 2% водный раствор дихромат калия на 2 дня
  2. Вскоре просушите блок фильтровальная бумага.
  3. Погрузите блок в 2% водный раствор нитрата серебра еще на 2 дня.
  4. Отрезать секции прибл. 20–100мкм толстый.
  5. Быстро обезвоживают этиловый спирт, очистить и смонтировать (например, в Depex или Enthalan).

С тех пор этот метод был усовершенствован, чтобы заменить осадок серебра на золото путем погружения образца в хлорид золота тогда Щавелевая кислота с последующим удалением серебра тиосульфат натрия. Это сохраняет большую степень тонкой структуры с ультраструктурными деталями, отмеченными мелкими частицами золота. [4]

Цитировать

Рамон-и-Кахаль сказал о методе Гольджи:

Я выразил удивление, которое испытал, увидев собственными глазами чудесные разоблачающие силы реакции хром-серебро и отсутствие какого-либо ажиотажа в научном мире, вызванного ее открытием.
Recuerdos de mi vida, Vol. 2, Historia de mi labour científica. Мадрид: Моя, 1917, стр. 76.

Рекомендации

  1. ^ Палец, Стэнли (1994). Истоки нейробиологии: история исследований функций мозга. Издательство Оксфордского университета. п. 45. ISBN  9780195146943. OCLC  27151391. В 1873 году Гольджи опубликовал первое краткое, но «адекватное» изображение La Reazione Nera (черная реакция), которая показала всю нервную клетку, включая ее тело, аксон и ветвящиеся дендриты.
  2. ^ Николлс, Дж. Г. (2001). От нейрона к мозгу. Sinauer Associates. стр.5. ISBN  0878934391.
  3. ^ Спейсек, Дж., Фиала, Дж. (2002-06-28). «Визуализация дендритных шипов». SynapseWeb. Архивировано из оригинал на 2010-06-26. Получено 2010-06-17.CS1 maint: несколько имен: список авторов (связь)
  4. ^ «Хоум - Спрингер».[мертвая ссылка ]

внешняя ссылка