Лысенин - Lysenin
Лысенин это порообразующий токсин (PFT) присутствует в целомический жидкость дождевой червь Eisenia fetida. Порообразующие токсины представляют собой группу белки которые действуют как факторы вирулентности нескольких патогенный бактерии. Белки лисенина в основном участвуют в защите от эукариотических и прокариотических патогенов.[1] Следуя общему механизму действия PFT, лизенин выделяется как растворимый мономер, который специфически связывается с мембранный рецептор, сфингомиелин в случае лизенина. После присоединения к мембране начинается олигомеризация, в результате чего поверх мембраны образуется нонамер, известный как препор. После конформационного изменения, которое может быть вызвано уменьшением pH олигомер внедряется в мембрану в так называемом состоянии пор.
Мономер
Лысенин белок произведено в целомоцит -лейкоциты дождевого червя Eisenia fetida.[2] Этот белок был впервые выделен из целомической жидкости в 1996 г. и назван лизенином (от лизиса и Эйсения).[3] Лисенин представляет собой относительно небольшую водорастворимую молекулу с молекулярной массой 33 кДа. С помощью Рентгеновская кристаллография, Лысенин был отнесен к Аэролизин Семейство белков по структуре и функциям.[4] Структурно каждый мономер лизенина состоит из рецепторсвязывающего домена (серая глобулярная часть справа на рисунке 1) и модуля порообразования (PFM); домены, общие для всего семейства аэролизинов.[4] Связывающий домен рецептора лизенина имеет три сфингомиелин обязательные мотивы. Модуль формирования поры содержит области, которые претерпевают большие конформационные изменения, чтобы стать β-стволом в поре.[5]
Мембранные рецепторы
Естественный мембрана мишенью лизенина является плазматическая мембрана животного липид называется сфингомиелин расположен в основном в его наружной створке, включая не менее трех его фосфатидилхолины (ПК) группы.[6] Сфингомиелин обычно ассоциируется с холестерин в липидные рафты.[7] Холестерин, усиливающий олигомеризация, обеспечивает стабильную платформу с высокой латеральной подвижностью, где встречи мономера с мономером более вероятны.[6] Было показано, что PFT способны реконструировать мембранную структуру,[8] иногда даже смешивание липидных фаз.[9]
Область β-цилиндра лисениновой поры, которая, как ожидается, будет погружена в гидрофобную область мембраны, представляет собой «пояс моющего средства», область высотой 3,2 нм, занятая детергентом в Криогенная электронная микроскопия (Крио-ЭМ) исследования пор.[10] С другой стороны, бислои сфингомиелина / холестерина имеют высоту около 4,5 нм.[11] Эта разница в высоте между лентой с моющим средством и бислоем сфингомиелина / холестерина подразумевает изгиб мембраны в области, окружающей пору, что называется отрицательным несоответствием.[12] Этот изгиб приводит к чистому притяжению между порами, которое вызывает их агрегацию.
Связывание, олигомеризация и вставка
Связывание с мембраной является необходимым условием для инициации олигомеризации PFT. Мономеры лисенина специфически связываются со сфингомиелином через рецептор-связывающий домен.[13] Конечный олигомер лизенина состоит из девяти мономеров без количественных отклонений.[14] Когда мономеры лизенина связываются с областями мембраны, обогащенными сфингомиелином, они обеспечивают стабильную платформу с высокой латеральной подвижностью, что способствует олигомеризации.[15] Как и в случае с большинством PFT, олигомеризация лизенина происходит в двухступенчатом процессе, как было недавно показано.
Процесс начинается с того, что мономеры адсорбируются мембраной за счет определенных взаимодействий, что приводит к увеличению концентрации мономеров. Этому увеличению способствует небольшая площадь, где накапливается мембранный рецептор, в связи с тем, что большинство мембранных рецепторов PFT связаны с липидными рафтами.[16] Другим побочным эффектом, помимо увеличения концентрации мономера, является взаимодействие мономер-мономер. Это взаимодействие увеличивает олигомеризацию лизенина. После достижения критической пороговой концентрации одновременно образуются несколько олигомеров, хотя иногда они неполные.[17] В отличие от PFT холестерин-зависимый цитолизин семья,[18] перехода от неполных олигомеров лизенина к полным олигомерам не наблюдалось.
Полная олигомеризация приводит к так называемому состоянию препоры - структуре на мембране. Определение структуры препора с помощью рентгеновского излучения или крио-ЭМ - сложный процесс, который до сих пор не дал никаких результатов. Единственная доступная информация о структуре препоры была предоставлена Атомно-силовая микроскопия (АСМ). Измеренная высота препоры составляла 90 Å; и шириной 118 Å с внутренней порой 50 Å.[17] Модель препора была построена по структуре мономера (PDB: 3ZXD) Со структурой пор (PDB: 5GAQ) Их рецептор-связывающими доменами (остатки от 160 до 297). Недавнее исследование аэролизина предполагает, что в соответствии с новыми доступными данными о введении аэролизина следует пересмотреть принятую в настоящее время модель для лисенинового препора.[19]
А конформационное изменение превращает PFM в трансмембранный β-ствол, что приводит к состоянию пор.[20] Триггерный механизм перехода из препоры в поры в лизенине зависит от трех остатков глутаминовой кислоты (E92, E94 и E97) и активируется снижением pH,[21] от физиологических условий до кислых условий, достигаемых после эндоцитоза, или увеличения внеклеточной концентрации кальция.[22] Эти три глутаминовые кислоты расположены в α-спирали, которая образует часть PFM, а глутаминовые кислоты находятся в членах семейства аэролизинов в его PFM. Такое конформационное изменение приводит к уменьшению высоты олигомера на 2,5 нм согласно измерениям АСМ.[17] Основными размерами, используя рентгеновскую структуру пор лисенина, являются высота 97 Å, ширина 115 Å и внутренняя пора 30 Å.[20] Однако полная олигомеризация в нонамер не является обязательным условием для внедрения, поскольку могут быть обнаружены неполные олигомеры в состоянии пор.[17] Переход от препоры к поре может быть заблокирован в условиях тесноты, механизм, который может быть общим для всех β-PFT. Первый намек на эффект скопления при переходе от препоры к поре был дан в эффектах скопления в электрофизиологических экспериментах.[23] Исследования высокоскоростной АСМ инкубации лизенина на мембранах сфингомиелин / холестерин показали, что в условиях тесноты переход от препоры к поре блокируется стерическими взаимодействиями.[24][25][26]
Последствия вставки
Окончательные последствия образования пор под лизенином хорошо не задокументированы; однако считается, что он вызывает апоптоз с помощью трех возможных гипотез:
- Нарушение асимметрии сфингомиелина между двумя створками липидного бислоя путем пробивания отверстий в мембране[27] и побуждая липидный флип-флоп (переориентация липида с одного листочка мембранного бислоя на другой).[28]
- Повышение концентрации кальция в цитоплазме.[29]
- Снижение концентрации калия в цитоплазме.[30]
Биологическая роль
Биологическая роль лизенина остается неизвестной. Было высказано предположение, что лизенин может играть роль защитный механизм против злоумышленников, таких как бактерии, грибы или маленький беспозвоночные.[31] Однако активность лизенина зависит от связывания со сфингомиелином, которого нет в мембранах бактерий, грибов или большинства беспозвоночных. Скорее сфингомиелин в основном присутствует в плазматической мембране хордовые.[32] Другая гипотеза состоит в том, что дождевой червь, способный выделять целомическую жидкость при стрессе,[33][34] порождает избегающее поведение позвоночное животное хищники (например, птицы, ежики или родинки ).[35] Если это так, удаленный лизенин может быть более эффективным, если целомическая жидкость достигает глаза, где концентрация сфингомиелина в десять раз выше, чем в других органах тела.[36] Дополнительная гипотеза состоит в том, что резкий запах целомической жидкости, дающий дождевому червю особый эпитет зловонный - является адаптация против хищников. Однако остается неизвестным, способствует ли лизенин предотвращению Эйсения хищниками.[37]
Приложения
Электропроводящие свойства Лысенина изучаются годами.[38] Как и большинство порообразующих токсинов, лизенин образует неспецифический канал, проницаемый для ионов, небольших молекул и небольших пептидов.[39] Также было более трех десятилетий исследований по поиску подходящих пор для преобразования в системы секвенирования нанопор которые могут иметь свои проводящие свойства, регулируемые точечной мутацией.[40] Из-за его аффинности связывания со сфингомиелином лизенин (или просто рецептор-связывающий домен) использовался в качестве маркера флуоресценции для обнаружения сфингомиелинового домена в мембранах.[41]
Рекомендации
Эта статья была отправлена в WikiJournal of Science для внешнего академическая экспертная оценка в 2019 году (отчеты рецензента ). Обновленный контент был повторно интегрирован на страницу Википедии под CC-BY-SA-3.0 лицензия (2019 ). Проверенная версия записи: Игнасио Лопес де Блас; и другие. (17 августа 2019 г.), «Лысенин» (PDF), WikiJournal of Science, 2 (1): 6, Дои:10.15347 / WJS / 2019.006, ISSN 2470-6345, Викиданные Q76846397
- ^ Брун, Хайке; Винкельманн, Юлия; Андерсен, Кристиан; Андре, Йорг; Лейппе, Маттиас (2006). «Рассмотрение механизмов цитолитической и антибактериальной активности лизенина, защитного белка кольчатых червей Eisenia fetida». Развитие и сравнительная иммунология. 30 (7): 597–606. Дои:10.1016 / j.dci.2005.09.002. PMID 16386304.
- ^ Yilmaz, N .; Yamaji-Hasegawa, A .; Hullin-Matsuda, F .; Кобаяши, Т. (2018). «Молекулярные механизмы действия сфингомиелин-специфического порообразующего токсина лизенина». Семинары по клеточной биологии и биологии развития. 73: 188–198. Дои:10.1016 / j.semcdb.2017.07.036. PMID 28751253.
- ^ Sekizawa, Y .; Hagiwara, K .; Накадзима, Т .; Кобаяши, Х. (1996). "Новый белок, лизенин, который вызывает сокращение изолированной аорты крысы: его очистка от целомической жидкости дождевого червя", Eisenia foetida". Биомедицинские исследования. 17 (3): 197–203. Дои:10.2220 / биомедрес.17.197.
- ^ а б De Colibus, L .; Sonnen, A. F.-P .; Моррис, К. Дж .; Siebert, C.A .; Abrusci, P .; Plitzko, J .; Ходник, В .; Leippe, M .; Volpi, E .; Anderluh, G .; Гилберт, Р. Дж. К. (2012). «Структуры Лисенина раскрывают общее эволюционное происхождение порообразующих белков и его способ распознавания сфингомиелина». Структура. 20 (9): 1498–1507. Дои:10.1016 / j.str.2012.06.011. ЧВК 3526787. PMID 22819216.
- ^ Бокори-Браун, М .; Martin, T. G .; Naylor, C.E .; Basak, A.K .; Titball, R.W .; Савва, К. Г. (2016). «Крио-ЭМ структура поры лизенина объясняет встраивание в мембрану белков семейства аэролизинов». Nature Communications. 7 (1): 11293. Bibcode:2016НатКо ... 711293B. Дои:10.1038 / ncomms11293. ЧВК 4823867. PMID 27048994.
- ^ а б Ishitsuka, R .; Кобаяши, Т. (2007). «Холестерин и соотношение липид / белок контролируют олигомеризацию сфингомиелин-специфического токсина, лисенина». Биохимия. 46 (6): 1495–1502. Дои:10.1021 / bi061290k. PMID 17243772. S2CID 22016219.
- ^ Саймонс, К .; Герл, М. Дж. (2010). «Оживление мембранных плотов: новые инструменты и идеи». Обзоры природы Молекулярная клеточная биология. 11 (10): 688–699. Дои:10.1038 / nrm2977. PMID 20861879. S2CID 1866391.
- ^ Рос, У .; Гарсиа-Саес, А. Дж. (2015). «Больше, чем поры: взаимодействие порообразующих белков и липидных мембран». Журнал мембранной биологии. 248 (3): 545–561. Дои:10.1007 / s00232-015-9820-y. PMID 26087906. S2CID 16305100.
- ^ Yilmaz, N .; Кобаяши, Т. (2015). «Визуализация реорганизации липидной мембраны, вызванной порообразующим токсином с использованием высокоскоростной атомно-силовой микроскопии». САУ Нано. 9 (8): 7960–7967. Дои:10.1021 / acsnano.5b01041. PMID 26222645.
- ^ Бокори-Браун, М .; Martin, T. G .; Naylor, C.E .; Basak, A.K .; Titball, R.W .; Савва, К. Г. (2016). «Крио-ЭМ структура поры лизенина объясняет встраивание в мембрану белков семейства аэролизинов». Nature Communications. 7 (1): 11293. Bibcode:2016НатКо ... 711293B. Дои:10.1038 / ncomms11293. ЧВК 4823867. PMID 27048994.
- ^ Куинн, П. Дж. (2013). «Строение бислоев сфингомиелина и комплексов с холестеринобразующими мембранными рафтами». Langmuir. 29 (30): 9447–9456. Дои:10.1021 / la4018129. PMID 23863113.
- ^ Guigas, G .; Вайс, М. (2016). «Влияние белкового краудинга на мембранные системы». Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Биомембраны. 1858 (10): 2441–2450. Дои:10.1016 / j.bbamem.2015.12.021. PMID 26724385.
- ^ De Colibus, L .; Sonnen, A. F.-P .; Моррис, К. Дж .; Siebert, C.A .; Abrusci, P .; Plitzko, J .; Ходник, В .; Leippe, M .; Volpi, E .; Anderluh, G .; Гилберт, Р. Дж. К. (2012). «Структуры Лисенина раскрывают общее эволюционное происхождение порообразующих белков и его способ распознавания сфингомиелина». Структура. 20 (9): 1498–1507. Дои:10.1016 / j.str.2012.06.011. ЧВК 3526787. PMID 22819216.
- ^ Munguira, I .; Casuso, I .; Takahashi, H .; Rico, F .; Мияги, А .; Chami, M .; Шойринг, С. (2016). «Диффузия белков стекловидной мембраны в переполненной мембране» (PDF). САУ Нано. 10 (2): 2584–2590. Дои:10.1021 / acsnano.5b07595. PMID 26859708.
- ^ Ishitsuka, R .; Кобаяши, Т. (2007). «Холестерин и соотношение липид / белок контролируют олигомеризацию сфингомиелин-специфического токсина, лисенина». Биохимия. 46 (6): 1495–1502. Дои:10.1021 / bi061290k. PMID 17243772. S2CID 22016219.
- ^ Lafont, F .; Ван Дер Гут, Ф. Г. (2005). «Бактериальная инвазия через липидные рафты». Клеточная микробиология. 7 (5): 613–620. Дои:10.1111 / j.1462-5822.2005.00515.x. PMID 15839890. S2CID 26547616.
- ^ а б c d Yilmaz, N .; Yamada, T .; Greimel, P .; Uchihashi, T .; Андо, Т .; Кобаяши, Т. (2013). «Визуализация в реальном времени сборки специфического для сфингомиелина токсина на плоских липидных мембранах». Биофизический журнал. 105 (6): 1397–1405. Bibcode:2013BpJ ... 105.1397Y. Дои:10.1016 / j.bpj.2013.07.052. ЧВК 3785888. PMID 24047991.
- ^ Mulvihill, E .; van Pee, K .; Mari, S.A .; Мюллер, Д. Дж .; Йылдыз, Ö. (2015). «Непосредственное наблюдение липид-зависимого механизма самосборки и порообразования цитолитического токсина Listeriolysin O». Нано буквы. 15 (10): 6965–6973. Bibcode:2015НаноЛ..15.6965М. Дои:10.1021 / acs.nanolett.5b02963. PMID 26302195.
- ^ Iacovache, Иоан; Де Карло, Саша; Чирауки, Нурия; Даль Пераро, Маттео; ван дер Гут, Ф. Гизу; Зубер, Бенуа (2016). «Крио-ЭМ структура вариантов аэролизина раскрывает новую белковую складку и процесс порообразования». Nature Communications. 7: 12062. Bibcode:2016НатКо ... 712062I. Дои:10.1038 / ncomms12062. ЧВК 4947156. PMID 27405240.
- ^ а б Бокори-Браун, М .; Martin, T. G .; Naylor, C.E .; Basak, A.K .; Titball, R.W .; Савва, К. Г. (2016). «Крио-ЭМ структура поры лизенина объясняет встраивание в мембрану белков семейства аэролизинов». Nature Communications. 7 (1): 11293. Bibcode:2016НатКо ... 711293B. Дои:10.1038 / ncomms11293. ЧВК 4823867. PMID 27048994.
- ^ Munguira, I. L. B .; Takahashi, H .; Casuso, I .; Шойринг, С. (2017). «Введение в мембрану лизенинового токсина зависит от pH, но не зависит от соседних лизенинов». Биофизический журнал. 113 (9): 2029–2036. Bibcode:2017BpJ ... 113.2029M. Дои:10.1016 / j.bpj.2017.08.056. ЧВК 5685674. PMID 29117526.
- ^ Munguira, I.L.B. (2019). "Механизм введения токсина лизенина зависит от кальция". bioRxiv. Дои:10.1101/771725.
- ^ Krueger, E .; Bryant, S .; Shrestha, N .; Clark, T .; Hanna, C .; Pink, D .; Фологея, Д. (2015). «Эффекты внутримембранного застоя на стробирование, индуцированное напряжением канала лизенина». Европейский биофизический журнал. 45 (2): 187–194. Дои:10.1007 / s00249-015-1104-z. ЧВК 4803513. PMID 26695013.
- ^ Мунгира, И. Л. Б. (2017). Влияние скученности в жизненном цикле лизенина методом высокоскоростной атомно-силовой микроскопии (Кандидат наук). Университет Экс-Марсель.
- ^ Мунгира, Н. Л. (2020). «Активность порообразующего токсина лизенина регулируется скученностью». Нанотехнологии. Дои:10.1088/1361-6528.
- ^ Мунгира, И. (2020). «Стерическая блокировка токсина лизенина скученностью». bioRxiv. Дои:10.1101/2020.05.02.073940.
- ^ Грин, Д. Р. (2000). «Апоптоз и гидролиз сфингомиелина». Журнал клеточной биологии. 150 (1): F5 – F8. Дои:10.1083 / jcb.150.1.F5. ЧВК 2185551. PMID 10893276.
- ^ Рос, У .; Гарсиа-Саес, А. Дж. (2015). «Больше, чем поры: взаимодействие порообразующих белков и липидных мембран». Журнал мембранной биологии. 248 (3): 545–561. Дои:10.1007 / s00232-015-9820-у. PMID 26087906. S2CID 16305100.
- ^ Оррениус, S .; Животовский, Б .; Никотера, П. (2003). «Регулирование гибели клеток: связь кальций – апоптоз». Обзоры природы Молекулярная клеточная биология. 4 (7): 552–565. Дои:10.1038 / nrm1150. PMID 12838338. S2CID 19079491.
- ^ Ю. С. П. (2003). «Регуляция и критическая роль гомеостаза калия в апоптозе». Прогресс в нейробиологии. 70 (4): 363–386. Дои:10.1016 / s0301-0082 (03) 00090-х. PMID 12963093. S2CID 13893235.
- ^ Балларин, Л .; Каммарата, М. (2016). Уроки иммунитета: от одноклеточных организмов до млекопитающих. Академическая пресса. ISBN 9780128032527.
- ^ Кобаяши, H .; Sekizawa, Y .; Aizu, M .; Умеда, М. (2000). "Смертельные и нелетальные реакции сперматозоидов самых разных позвоночных и беспозвоночных на лизенин, белок из целомической жидкости дождевого червя. Eisenia foetida". Журнал экспериментальной зоологии. 286 (5): 538–549. Дои:10.1002 / (sici) 1097-010x (20000401) 286: 5 <538 :: aid-jez12> 3.0.co; 2-нед.. PMID 10684578.
- ^ Sukumwang, N .; Умедзава, К. (2013). "Порообразующий токсин Лисенин, полученный из дождевых червей, и скрининг его ингибиторов". Токсины. 5 (8): 1392–1401. Дои:10.3390 / токсины 5081392. ЧВК 3760042. PMID 23965430.
- ^ Кобаяши, H .; Ohta, N .; Умеда, М. (2004). "Биология лизенина, белка целомической жидкости дождевого червя". Eisenia foetida". Международный обзор цитологии. 236: 45–99. Дои:10.1016 / S0074-7696 (04) 36002-X. ISBN 9780123646408. PMID 15261736.
- ^ Swiderska, B .; Кедрацка-Крок, С .; Panz, T .; Morgan, A.J .; Фалниовский, А .; Grzmil, P .; Плытыч, Б. (2017). «Белки семейства Лысенина в целомоцитах дождевых червей - Сравнительный подход». Развитие и сравнительная иммунология. 67: 404–412. Дои:10.1016 / j.dci.2016.08.011. PMID 27567602. S2CID 19895826.
- ^ Берман, Э. Р. (1991). Биохимия глаза. Springer. Дои:10.1007/978-1-4757-9441-0. ISBN 978-1-4757-9441-0. S2CID 41192657.
- ^ Edwards, C.A .; Болен, П. Дж. (1996). Биология и экология дождевых червей. Springer Science & Business Media. ISBN 978-0-412-56160-3.
- ^ Bryant, S .; Clark, T .; Thomas, C .; Посуда, К .; Богард, А .; Calzacorta, C .; Prather, D .; Фологея, Д. (2018). «Понимание механизма регулирования напряжения порообразующего токсина Лисенина». Токсины. 10 (8): 334. Дои:10.3390 / токсины10080334. ЧВК 6115918. PMID 30126104.
- ^ Shrestha, N .; Bryant, S.L .; Thomas, C .; Richtsmeier, D .; Pu, X .; Tinker, J .; Фологея, Д. (2017). «Стохастическое зондирование ангиотензина II с лизениновыми каналами». Научные отчеты. 7 (1): 2448. Bibcode:2017НатСР ... 7.2448S. Дои:10.1038 / s41598-017-02438-0. ЧВК 5446423. PMID 28550293.
- ^ Deamer, D .; Akeson, M .; Брантон, Д. (2016). «Три десятилетия секвенирования нанопор». Природа Биотехнологии. 34 (5): 518–524. Дои:10.1038 / nbt.3423. ЧВК 6733523. PMID 27153285.
- ^ Ishitsuka, R .; Кобаяши, Т. (2004). «Лысенин: новый инструмент для исследования липидной организации мембран». Anatomical Science International. 79 (4): 184–190. Дои:10.1111 / j.1447-073x.2004.00086.x. PMID 15633456. S2CID 1558393.