Олигонуклеотиды против miRNA - Википедия - Anti-miRNA oligonucleotides

Это изображение является иллюстрацией анти-miRNA, связанного с miRNA посредством гибридизации. Это один из двух способов, которыми AMO могут взаимодействовать с miRNA в организме. Путем гибридизации последовательности miRNA функция последовательности miRNA нейтрализуется, предотвращая ее избирательное связывание с целевой генетической информацией. Хотя эта диаграмма иллюстрирует только генетическое спаривание оснований между последовательностями miRNA и анти-miRNA, существуют специфические химические модификации, которые размещаются на 3 'и 5' концах анти-miRNA.

Олигонуклеотиды против miRNA (также известные как AMO) имеют множество применений в клеточной механике. Эти синтетически сконструированные молекулы используются для нейтрализации микроРНК (miRNA ) функционируют в клетках для получения желаемых ответов. miRNA представляют собой комплементарные последовательности (≈22 п.н.) мРНК, которые участвуют в расщеплении РНК или подавлении перевод.[1] Контролируя miRNA, которые регулируют мРНК в клетках, AMO можно использовать в качестве дополнительной регуляции, а также для терапевтического лечения определенных клеточных нарушений. Это регулирование может происходить через стерический блокирующий механизм а также гибридизация к миРНК.[2] Эти взаимодействия внутри организма между miRNA и AMO могут быть полезны при лечении расстройств, при которых происходит чрезмерная / недостаточная экспрессия или аберрации miRNA приводят к проблемам с кодированием. Некоторые из связанных с miRNA нарушений, которые встречаются у людей, включают рак, мышечные заболевания, аутоиммунные нарушения и вирусы. Чтобы определить функциональность определенных AMO, необходимо измерить экспрессию связывания AMO / miRNA (концентрацию транскрипта) относительно экспрессии выделенной miRNA. Прямое обнаружение различных уровней генетической экспрессии позволяет показать взаимосвязь между AMO и miRNA. Это можно обнаружить через люцифераза Мероприятия (биолюминесценция в ответ на целевую ферментативную активность). Понимание последовательностей miRNA, вовлеченных в эти заболевания, может позволить нам использовать олигонуклеотиды против miRNA для нарушения путей, которые приводят к недостаточной / избыточной экспрессии белков клеток, которые могут вызывать симптомы этих заболеваний.

Синтез

Во время конструирования олигонуклеотидов против miRNA необходимы модификации для оптимизации аффинности связывания, повышения устойчивости к нуклеазам и in vivo доставка должна быть рассмотрена.[3] Было несколько поколений дизайнов с попытками разработать AMO с высокой аффинностью связывания, а также высокой специфичностью. В первом поколении использовались нуклеотиды 2’-O-метил РНК с фосфоротиоатными межнуклеотидными связями, расположенными на обоих концах для предотвращения экзонуклеазная атака. Недавнее исследование обнаружило соединение N, N-диэтил-4- (4-нитронафталин-1-илазо) фениламин (ZEN), которое улучшает аффинность связывания и блокирует деградацию экзонуклеаз.[4] Этот метод был объединен с конструкцией первого поколения для создания нового поколения ZEN-AMO с повышенной эффективностью.

Можно изменять различные компоненты AMO, чтобы повлиять на аффинность связывания и эффективность AMO. 2’-сахар AMO можно модифицировать для замещения фтором и различными метильными группами, почти все с повышением аффинности связывания. Однако некоторые из этих модифицированных 2’-сахаров AMO оказывали негативное влияние на рост клеток. Модификация 5'-3 ' фосфодиэфирный остов также было показано, что связь с фосфоротиоратным (P-S) каркасом основной цепи влияет на аффинность мишени. Было показано, что использование мутации P-S снижает Тм олигонуклеотида, что приводит к более низкому целевому сродству. Последнее требование к AMO - это специфичность несоответствия и ограничения по длине. Из-за того, что miRNA в одних и тех же семьях имеют общие «исходные» (общие) последовательности и отличаются только парой дополнительных нуклеотиды; одна AMO потенциально может нацеливаться на несколько последовательностей miRNA. Однако исследования показали, что это сложно из-за потери активности из-за несоответствия одиночных нуклеотидов. Несоответствие больше трех свидетельствует о полной потере активности. Изменения длины AMO переносились намного лучше, при этом изменения одного нуклеотида и двух нуклеотидов приводили к небольшой потере активности и к полной потере активности трех или более. Усечение одного нуклеотида с 3’-конца привело к небольшому улучшению активности AMO.[5]

Доставка и обнаружение

На этом рисунке изображен способ использования наночастицы золота и грузовую ДНК для введения AMO в клетки путем in vitro трансфекция. На основе рисунка 1.[6]

Для доставки AMO требуется in vitro трансфекция в клетки-мишени. В настоящее время существуют трудности с обычными методами трансфекции, которые приводят к низкой эффективности доставки. Чтобы повысить эффективность доставки AMO, в статье 2011 года предлагается использовать функционализированные наночастицы золота. Наночастицы золота повышают эффективность доставки за счет конъюгирования с ДНК груза, которая отжигается с AMO с использованием комплементарности. ДНК груза прикреплена к поверхности наночастицы.[6] Поскольку многие варианты ДНК и РНК нестабильны в in vivo В условиях, носители, такие как наночастицы, необходимы для защиты от разрушения нуклеазами. Эти наночастицы полезны для облегчения поглощения клеткой и передачи генетической информации ядру.[7] Другой метод доставки in vivo, подтвержденный результатами на мышах, - это внутривенное введение AMO. Было показано, что инъекция АМО в хвостовую вену мышам является эффективной. Чтобы эта система была полезной, AMO были сопряжены с холестерин для увеличения поглощения клеткой через мембрану и были химически модифицированы 2'-OMe фосфорамидитами для предотвращения деградации AMO.[8]

Чтобы обнаружить присутствие и функциональность AMO, исследователи могут наблюдать относительную активность целевого фермента или белка miRNA. Этот метод был использован в исследовании одиночных AMO, нацеленных на множественные miRNA, при котором отслеживалась относительная активность люциферазы в клетках HEK293. Для определения относительных уровней активности люциферазы был включен контроль без присутствующей miRNA. Присутствие функциональных AMO с ингибирующей miRNA должно приводить к увеличению активности люциферазы из-за инактивации miRNA, подавляющей активность фермента.[9]

Заболевания / терапия

Было обнаружено, что многие заболевания человека имеют некоторые изменения в экспрессии или аберрации с участием miRNA. Было обнаружено, что miRNA участвует во многих ключевых путях регуляции, которые предположительно связаны с раком, вирусными генами и метаболическими путями,[10] а также мышечные расстройства (в частности, сердечно-сосудистые).[11] Путем нацеливания на клетки, пораженные неправильной экспрессией miRNA, нормальный баланс экспрессии может быть восстановлен с помощью AMO. За счет сведения к минимуму избыточной экспрессии и увеличения недостаточной экспрессии с помощью AMO некоторые из этих генетических нарушений можно потенциально обойти или, по крайней мере, свести к минимуму их симптомы. Это осуществляется путем гибридизации AMO с последовательностями miRNA, которые участвуют в экспрессии конкретных генов. Проблема заключается в том, чтобы AMO могли успешно выполнять свою функцию в концентрациях, достаточных для успеха, и в то же время достаточно низких, чтобы избежать токсичности вектора и самих AMO.

Рак

Все раки мутации в геномах, вызывающие аномальный рост клеток. Определение факторов, которые способствуют или регулируют этот чрезмерный рост, потенциально могут привести к профилактическому терапевтическому лечению рака. Например, хронический лимфоцитарный лейкемии иллюстрирует область miRNA (mir-15 и mir-16), которые отсутствуют в геноме при экспрессии этого рака. В то время как при других формах рака, таких как Лимфома Беркитта, экспрессия последовательностей миРНК амплифицируется.[10] Это приводит к предположению, что многие miRNA имеют регуляторные последовательности, участвующие в развитии рака. Если бы они лучше регулировались, возможно, с помощью AMO, возможно, можно было бы регулировать возникновение и прогрессирование рака.

После изучения 540 образцов опухолей различных типов рака было обнаружено, что 15 miRNA были активированы, а 12 - подавлены.[12] Из исследования был сделан вывод, что эти последовательности miRNA влияют на рост клеток и апоптоз в камере. AMO играют роль этого регуляторного фактора для miRNA, участвующих в развитии рака. При связывании с одним затронутым сайтом miRNA эффект оказывается минимальным. Однако путем создания последовательностей олигонуклеотидов против miRNA для связывания со всеми этими неявными miRNA, в раковых клетках увеличивалась гибель клеток.[11] Одно исследование с участием антагомиров, различных вариантов олигонуклеотидов против miRNA, было сосредоточено на уменьшении индуцированных опухолей у мышей. После 2 недель лечения рост опухоли был подавлен, а регресс был отмечен в 30% случаев.[13] Это показывает, что AMO можно использовать для успешного подавления рака с помощью miRNA. Это ингибирование вызвано прямым замалчиванием взаимодействием miRNA, которые, в свою очередь, связываются с последовательностями мРНК, которые создают белки в раковых клетках, а также усилением контроля клеточных процессов рака.

Мышечное развитие

В развитии тканей у эмбрионов miRNA может играть роль в усилении или подавлении специфического мышечного развития. miRNA-1 играет роль в дифференцировке мышц между клетками-предшественниками сердечных и скелетных мышц.[14] В процессе развития, если уровни клеток-предшественников не регулируются должным образом, это может привести к мышечному гипоплазия. Создавая AMO для этих известных miRNA, участвующих в генерации мышц, можно отслеживать специфические механизмы miRNA на протяжении всего процесса генерации мышц, по существу используя созданные AMO для выключения miRNA. Это останавливает производство миогенин (фактор транскрипции, участвующий в миогенез ). Затем измеряя изменения миогенина по сравнению со стандартным, не ингибируемым миогенезом, можно определить функцию miRNA как повышающую или понижающую регуляцию синтеза миогенина.[15] Путем дальнейшего понимания того, как определенные последовательности miRNA контролируют развитие мышц, можно использовать AMO для обеспечения нормального уровня продукции миогенина в организмах, которые, как было обнаружено, содержат генетические ошибки, связанные с миогенезом.

AMO также можно использовать для предотвращения апоптоза или гипоплазии органов сердца в присутствии высоких концентраций перекиси водорода. Перекись водорода может вызывать апоптоз через окислительный стресс. Это потому, что окислительный стресс, вызванный ЧАС
2О
2 индуцирует повышенную активность miRNA-1. Эта повышенная активность miRNA-1 подавляет активность Bcl-2, вызывая апоптоз. Однако, создавая и вводя AMO для miRNA-1 в среде окислительного стресса, ответ на ЧАС
2О
2 уменьшается, создавая сопротивление окислительному стрессу в сердце. Из-за этого количество апоптоза кардиомиоцитов, вызванного перекисью водорода, снижается при сердечных заболеваниях.[16] Благодаря снижению гибели кардиомиоцитов в условиях окислительного стресса олигонуклеотидом против miRNA-1, регуляция miRNA может позволить нам более глубоко понять развитие сердца, а также выживание сердечной мышцы в условиях низкого содержания кислорода.

Аутоиммунный ответ и расстройства

Эта диаграмма иллюстрирует различные места в процессе специфичности лимфоцитов, которые регулируют miRNA. Каждый из этих сайтов может быть чрезмерно или недоэкспрессирован, что может привести к гипер / гипочувствительности иммунной системы. На основе рисунка 2[17]

Аутоиммунные расстройства - это когда организм имеет иммунный ответ, вызывающий воспалительную реакцию в организме. Поскольку аутоиммунные расстройства связаны с аномалиями в иммунная система клетки (то есть B-клетки, T-клетки). Можно сделать вывод, что miRNA сильно экспрессируются в тех областях тела, которые связаны с созреванием этих Т- и В-лимфоциты, например, в селезенке и лимфатических узлах.[17] Нарушения миРНК или функции миРНК в посттранскрипционном процессе могут привести к повышенной чувствительности лимфоцитов. Благодаря повышенной чувствительности эти лимфоциты теперь могут нацеливаться на антигены что он не мог ранее связываться, что может позволить этим лимфоцитам атаковать себя, если эти антигены естественным образом встречаются в клетках организма.[18]

Одним из примеров этого является Ревматоидный артрит, при котором тело ломает собственные суставы. Нарушение вызвано сверхэкспрессией специфических кластеров miRNA. Эти скопления вызывают увеличение синовиальных фибробластов. Из-за этого повышенного количества фибробластов некоторые протеазы ' повышаются концентрации, что вызывает разрушение хрящей в суставах.[17] Путем воздействия на кластеры miRNA, ответственные за экспрессию заболевания, воспаление, вызванное этим расстройством, может быть уменьшено при добавлении AMO в пораженные участки.

Системная красная волчанка вызывает долговременное повреждение органов тела. Размножается за счет экологических и генетических факторов. Путем нацеливания на микроРНК (miR-184, miR-196a, miR-198 и miR-21)[19] которые при СКВ подавляются с помощью AMO в пораженных органах, нормальная экспрессия этих генов может быть восстановлена.

Вирусные исследования

Считается, что клеточные миРНК подавляют экспрессию вирусных генов. В исследовании ВИЧ-1, ингибиторы против miRNA были использованы для деактивации двух miRNA, которые ингибируют экспрессию вирусных генов, has-miR-29a и 29b. Было показано, что экспрессия вирусных генов увеличивалась после введения анти-miRNAs, нацеленных на has-miR-29a и 29b. Это продемонстрировало, что ингибиторы miRNA способны напрямую нацеливать и отменять ингибирующий эффект has-miR-29a и 29b в вирусе ВИЧ-1.[20] Благодаря созданию AMO некоторые геномные последовательности ВИЧ можно было изучить более глубоко. Дальнейшее понимание того, как работает геном определенных вирусов, может позволить ученым разработать превентивные меры против этих вирусов.

Механизм регуляции анти-miRNA в случае Вирус Эпштейна-Барра (EBV) немного отличается от других вирусных случаев, таких как ВИЧ-1. EBV - это вирус герпеса, связанный с различными видами рака, который обладает способностью экспрессировать miRNA, в отличие от многих других вирусов, поражающих людей. В отличие от других исследований, которые используют анти-miRNA в качестве инструмента нокдауна для демонстрации эффектов miRNA, исследователи EBV использовали их для ингибирования miRNA, продуцируемых вирусом. MiR-BART5, miRNA EBV, регулирует белок: п53 Up-регулируемый Mодулятор Апоптоз (ПУМА). Когда вирусный mir-BART5 истощался с использованием его анти-miRNA, анти-miR-BART5, запускался апоптоз клеток, что приводило к контролю заболевания, убивая клетки, которые идентифицированы как инфицированные.[21]

Другой специфический случай взаимодействия хозяина с вирусом, опосредованного микроРНК, происходит с вирусом гепатита С (HCV). ВГС, который вызывает острую инфекцию печени, часто не выявляемую и прогрессирующую в хроническую, использует человеческую miRNA miR-122 для рекрутирования белков Argonaute2 на незащищенный 5'-конец своего РНК-генома, тем самым маскируя его от клеточного противовирусного ответа и стабилизируя Это. Это взаимодействие привело к развитию AMO, которые нацелены на miR-122, чтобы удалить вирус из клеток печени.[22] Наиболее продвинутым из этих соединений является Миравирсен, а заблокированная нуклеиновая кислота -ДНК миксер, [23] в настоящее время проходят клинические испытания.[24]Интересным аспектом миравирсена является его способность ингибировать не только зрелую miR-122, но также вторгаться в структуры стволовых петель в молекулах-предшественниках микроРНК, нарушая биогенез miR-122 в биохимических анализах и культуре клеток.[25]

Рекомендации

  1. ^ Кокс, Дэвид Л. Нельсон, Майкл М. (2008). Принципы биохимии Ленингера (5-е изд.). Нью-Йорк: W.H. Фримен. п.1045. ISBN  978-0-7167-7108-1.
  2. ^ Леннокс, К. А.; Бельке, Массачусетс (14 июля 2011 г.). «Химическая модификация и дизайн олигонуклеотидов против miRNA». Генная терапия. 18 (12): 1111–1120. Дои:10.1038 / gt.2011.100. PMID  21753793.
  3. ^ Стенванг, Ян; Петри, Андреас; Линдоу, Мортен; Обад, Сусанна; Кауппинен, Сакари (2012). «Ингибирование функции микроРНК олигонуклеотидами antimiR». Тишина. 3 (1): 1. Дои:10.1186 / 1758-907X-3-1. ЧВК  3306207. PMID  22230293.
  4. ^ Леннокс, Ким А.; Овчарзи, Ричард; Томас, Дерек М; Уолдер, Джозеф А; Бельке, Марк А (2013). «Повышение эффективности олигонуклеотидов против miRNA с использованием нового ненуклеотидного модификатора». Молекулярная терапия: нуклеиновые кислоты. 2 (8): e117. Дои:10.1038 / mtna.2013.46. ЧВК  3759741. PMID  23982190.
  5. ^ Davis, S .; Лолло, Б; Freier, S; Исав, К. (28 апреля 2006 г.). «Улучшенное нацеливание miRNA с антисмысловыми олигонуклеотидами». Исследования нуклеиновых кислот. 34 (8): 2294–2304. Дои:10.1093 / нар / gkl183. ЧВК  1459537. PMID  16690972.
  6. ^ а б Ким, Джэ-Хонг; Ём, Джи-Хён; Ко, Чон Чжэ; Хан, Мин Су; Ли, Кан Сок; На, Сун-Янг; Пэ, Джихён (сентябрь 2011 г.). «Эффективная доставка олигонуклеотидов ДНК против miRNA с помощью функционализированных наночастиц золота». Журнал биотехнологии. 155 (3): 287–292. Дои:10.1016 / j.jbiotec.2011.07.014. PMID  21807040.
  7. ^ Ной, Майкл; Фишер, Дагмар; Кисель, Томас (август 2005 г.). «Последние достижения в разработке рациональных векторов переноса генов на основе полиэтиленимина и его производных». Журнал генной медицины. 7 (8): 992–1009. Дои:10.1002 / jgm.773. PMID  15920783.
  8. ^ Крюцфельдт, Ян; Раевский, Николаус; Брайч, Рави; Rajeev, Kallanthottathil G .; Тушл, Томас; Манохаран, Муфия; Стоффель, Маркус (30 октября 2005 г.). «Замалчивание микроРНК in vivo с помощью антагомиров»'". Природа. 438 (7068): 685–689. Bibcode:2005Натура 438..685К. Дои:10.1038 / природа04303. PMID  16258535.
  9. ^ Lu, Y .; Xiao, J .; Lin, H .; Bai, Y .; Луо, X .; Wang, Z .; Ян Б. (9 января 2009 г.). «Один антисмысловой олигодезоксирибонуклеотид (AMO) против микроРНК, нацеленный на несколько микроРНК, предлагает улучшенный подход к интерференции микроРНК». Исследования нуклеиновых кислот. 37 (3): e24. Дои:10.1093 / nar / gkn1053. ЧВК  2647303. PMID  19136465.
  10. ^ а б Вейлер, Дж; Hunziker, J; Холл, J (29 сентября 2005 г.). «Анти-miRNA олигонуклеотиды (AMO): боеприпасы для нацеливания miRNAs, участвующих в заболевании человека?». Генная терапия. 13 (6): 496–502. Дои:10.1038 / sj.gt.3302654. PMID  16195701.
  11. ^ а б Ван, Чжиго (28 августа 2010 г.). Концепция технологии множественных целевых антисмысловых олигонуклеотидов против miRNA. Методы молекулярной биологии. 676. С. 51–57. Дои:10.1007/978-1-60761-863-8_4. ISBN  978-1-60761-862-1. PMID  20931389.
  12. ^ Volinia, S .; Калин, Г. А .; Liu, C.-G .; Ambs, S .; Cimmino, A .; Petrocca, F .; Visone, R .; Иорио, М .; Roldo, C .; Ferracin, M .; Prueitt, R.L .; Yanaihara, N .; Lanza, G .; Scarpa, A .; Vecchione, A .; Negrini, M .; Harris, C.C .; Кроче, К. М. (3 февраля 2006 г.). «Сигнатура экспрессии микроРНК солидных опухолей человека определяет мишени для раковых генов». Труды Национальной академии наук. 103 (7): 2257–2261. Дои:10.1073 / pnas.0510565103. ЧВК  1413718. PMID  16461460.
  13. ^ Негрини, Массимо; Николозо, Милена С; Калин, Джордж А (2009). «МикроРНК и рак - новые парадигмы в молекулярной онкологии». Текущее мнение в области клеточной биологии. 21 (3): 470–479. Дои:10.1016 / j.ceb.2009.03.002. PMID  19411171.
  14. ^ Чжао, Юн; Самал, Ева; Шривастава, Дипак (14 июля 2005 г.). «Сывороточный фактор ответа регулирует специфичную для мышц микроРНК, которая нацелена на Hand2 во время кардиогенеза». Природа. 436 (7048): 214–220. Bibcode:2005Натура.436..214Z. Дои:10.1038 / природа03817. PMID  15951802.
  15. ^ Чен, Цзянь-Фу; Мандель, Элизабет М; Томсон, Дж. Майкл; У Цюлянь; Каллис, Томас Э; Хаммонд, Скотт М; Конлон, Фрэнк Л; Ван, Да-Чжи (25 декабря 2005 г.). «Роль микроРНК-1 и микроРНК-133 в пролиферации и дифференцировке скелетных мышц». Природа Генетика. 38 (2): 228–233. Дои:10,1038 / ng1725. ЧВК  2538576. PMID  16380711.
  16. ^ Тан, Иехуа; Чжэн, Цзяоян; Вс, Ян; У, Цзунгуй; Лю, Чжимин; Хуан, Гаочжун (2009). «МикроРНК-1 регулирует апоптоз кардиомиоцитов, воздействуя на Bcl-2». Международный кардиологический журнал. 50 (3): 377–387. Дои:10.1536 / ihj.50.377. PMID  19506341.
  17. ^ а б c Тили, Эсмерина; Мишель, Жан-Жак; Костинян, Стефан; Кроче, Карло М (26 августа 2008 г.). «МикроРНК, иммунная система и ревматические заболевания». Природа Клиническая Практика Ревматология. 4 (10): 534–541. Дои:10.1038 / ncprheum0885. PMID  18728632.
  18. ^ "Иммунная реакция". Медлайн Плюс. Национальная медицинская библиотека. Получено 1 ноября 2014.
  19. ^ Каучар, Тамаш; Рац, Жужанна; Хамар, Петер (30 ноября 2010 г.). «Посттранскрипционная регуляция экспрессии генов сетью микро РНК (миРНК) при почечной недостаточности ☆». Расширенные обзоры доставки лекарств. 62 (14): 1390–1401. Дои:10.1016 / j.addr.2010.10.003. PMID  20940025.
  20. ^ Ахлувалия, Жасмин К; Хан, Сохраб; Сони, Картик; Рават, Пратима; Гупта, Анкит; Харихаран, Манодж; Скария, Винод; Лалвани, Мукеш; Пиллаи, Бина; Митра, Дебашис; Брахмачари, Самир К. (2008). «Человеческая клеточная микроРНК hsa-miR-29a препятствует экспрессии вирусного белка nef и репликации ВИЧ-1». Ретровирология. 5 (1): 117. Дои:10.1186/1742-4690-5-117. ЧВК  2635386. PMID  19102781.
  21. ^ Choy, E. Y.-W .; Siu, K.-L .; Kok, K.-H .; Lung, R. W.-M .; Tsang, C.M .; К, К.-Ф .; Kwong, D. L.-W .; Tsao, S.W .; Джин, Д.-Й. (6 октября 2008 г.). «МикроРНК, кодируемая вирусом Эпштейна-Барра, нацелена на PUMA, чтобы способствовать выживанию клеток-хозяев» (PDF). Журнал экспериментальной медицины. 205 (11): 2551–2560. Дои:10.1084 / jem.20072581. ЧВК  2571930. PMID  18838543.
  22. ^ Сарнов, П; Саган, С.М. (2016). «Раскрытие таинственных взаимодействий между РНК вируса гепатита С и специфической для печени микроРНК-122». Ежегодный обзор вирусологии. 3 (1): 309–332. Дои:10.1146 / annurev-virology-110615-042409. PMID  27578438.
  23. ^ Элмен Дж., Линдоу М., Шютц С., Лоуренс М., Петри А., Обад С., Линдхольм М., Хедтьярн М., Хансен Х. Ф., Бергер Ю., Гулланс С., Кирни П., Сарнов П., Страаруп Е. М., Кауппинен С. (2008). «LNA-опосредованное молчание микроРНК у нечеловеческих приматов». Природа. 452 (7189): 896–9. Bibcode:2008Натура.452..896E. Дои:10.1038 / природа06783. PMID  18368051.
  24. ^ Janssen, Harry L.A .; Reesink, Hendrik W .; Лавиц, Эрик Дж .; Зеузем, Стефан; Родригес-Торрес, Марибель; Патель, Кейур; Van Der Meer, Adriaan J .; Патик, Эми К .; Чен, Алиса; Чжоу, Йи; Перссон, Роберт; Кинг, Барни Д .; Кауппинен, Сакари; Левин, Артур А .; Ходжес, Майкл Р. (2013). «Лечение инфекции ВГС с помощью микроРНК». Медицинский журнал Новой Англии. 368 (18): 1685–94. Дои:10.1056 / NEJMoa1209026. PMID  23534542.
  25. ^ Геберт, Лука Ф. Р .; Ребхан, Марио А. Э .; Crivelli, Silvia E.M .; Дензлер, Реми; Стоффель, Маркус; Холл, Джонатан (7 января 2014 г.). «Миравирсен (SPC3649) может ингибировать биогенез miR-122». Исследования нуклеиновых кислот. 42 (1): 609–621. Дои:10.1093 / nar / gkt852. ЧВК  3874169. PMID  24068553.