Пятно Фельгена - Feulgen stain

Черно-белая микрофотография Фельген окрашен, неповрежденный клещ слюнные железы заражен вирус оленьего клеща. Гипотрофированный слюна ацинус заполнены аморфными массами материала, окрашенного в розовый цвет (= положительный по Фельгену) (стрелки). Шкала шкалы = 10 мкм.

Пятно Фельгена это окрашивание техника, открытая Роберт Фёльген и используется в гистология идентифицировать хромосомный материал или ДНК в клеточных образцах. Он тёмный. Это зависит от кислоты гидролиз ДНК, поэтому фиксирующие агенты с использованием сильные кислоты следует избегать.

Образец подвергается воздействию тепла (60 ° C) соляная кислота, затем к Реактив Шиффа. В прошлом сульфит затем последовало полоскание, но теперь это считается ненужным. По желанию образец может быть контрастный с участием Светло-зеленый SF желтоватый. Наконец, он обезвоживается этиловый спирт, очищено с ксилол, и установлен в смолистый Средняя.

ДНК должна быть окрашена в красный цвет. Фон, если он окрашен, зеленый.

Реакция Фельгена - это полуколичественный метод. Если в ячейке остаются только альдегиды, полученные из гидролиз ДНК, то метод является количественным для ДНК. Можно использовать инструмент, известный как микроденситометр или микроспектрофотометр, чтобы фактически измерить интенсивность розовой реакции Фельгена для данного органелла. С помощью этой процедуры было ранее определено, что интерфазные клетки состоят из двух популяций: диплоид ДНК и те, у кого тетраплоид ДНК (два полных генома). Ядра выглядели одинаково, но одно содержало вдвое больше ДНК. Это привело к разделению межфазного периода клеточный цикл в фазы G1, S и G2 на основе синтеза этой дополнительной ДНК.^[1]

использованная литература