Окрашивание трихромом - Trichrome staining

«Трихром» перенаправляется сюда. Для трехцветного зрения см. трихроматия. Об альбоме 2002 года и одноименной группе см. Трихромы. Для трехцветных систем см. Цвет CMY, Цвет RGB, и Цветовая модель RYB.
Не путать с Трихома.

Окрашивание трихромом это гистологический окрашивание метод, который использует два или более кислотные красители в сочетании с поликислота. Окрашивание дифференцирует ткани, окрашивая их в контрастные цвета. Это увеличивает контраст микроскопических деталей в клетках и ткани, что облегчает их просмотр через микроскоп.

Слово трихром означает «три цвета». Первый протокол окрашивания, который был описан как «трихром», был Пятно трихрома Мэллори, которые дифференциально окрашивают эритроциты к красному цвету, мышечная ткань к красному цвету, и коллаген к синему цвету. Некоторые другие протоколы окрашивания трихромом являются Пятно трихрома Массона, Трихром Лилли, а Пятно трихрома Гемёри.

Цель

Без окрашивания трихромом отличить один признак от другого может быть чрезвычайно сложно. Гладкая мышечная ткань, например, трудно отличить от коллагена. Пятно трихрома может окрасить мышечную ткань в красный цвет, а волокна коллагена - в зеленый или синий. Биопсия печени между клетками печени могут быть тонкие коллагеновые волокна, и количество коллагена можно оценить на основании метода окрашивания. Методы трихрома в настоящее время используются для дифференциации мышц от коллагена, альфа-клеток гипофиза от бета-клеток, фибрина от коллагена и митохондрии в свежезамороженных мышцах, среди прочего. Это помогает в выявлении увеличения коллагеновой ткани (т. Е. Фиброзных изменений), например, в цирроз печени и различение опухолей, возникающих из мышечных клеток и фибробластов.[1]

Процедура

В методах окрашивания трихромом используются два или более кислотные красители. Обычно кислотные красители окрашивают одни и те же основные белки, но, применяя их последовательно, можно изменить картину окрашивания. Поликислоты (например, фосфорномолибденовая кислота или же вольфрамофосфорная кислота ) используется для выборочного удаления красителя. Считается, что поликислоты ведут себя как красители с высоким содержанием молекулярный вес: они вытесняют легко удаляемый краситель из коллагена.

Обычно красный краситель в разбавленном уксусная кислота сначала наносится, чтобы перекрашивать все компоненты. Затем применяется поликислота, чтобы удалить красный краситель с коллагена и некоторых других компонентов путем вытеснения. Наносится второй кислотный краситель (синий или зеленый) в разбавленной уксусной кислоте, который, в свою очередь, замещает поликислоту, в результате чего коллаген окрашивается в цвет, контрастирующий с исходным используемым красителем. Если эритроциты должны быть окрашены, перед окрашиванием красным красителем наносится желтый или оранжевый краситель с небольшой молекулярной массой. Обычно его наносят из насыщенного раствора в 80% этаноле и часто в сочетании с пикриновой кислотой (сам по себе краситель) и поликислотой. В методах используются незначительные различия в реакции тканей на красители, плотности, доступности и т. Д.

Трихромные пятна, при которых красители и поликислота наносятся последовательно, называются многоступенчатые трихромы. В «одностадийных» методах все красители - с поликислотой или без нее - объединяются в одном растворе. Одним из старейших одноэтапных подходов к окрашиванию трихромом является метод Ван Гизона, который окрашивает мышцы и цитоплазма желтый и красный коллаген. Другой - это Пятно трихрома Гемёри, который очень похож на трихром Массона. В методах «yellowsolve» сначала наносится красный краситель в разбавленной уксусной кислоте, затем срез очень тщательно обезвоживается, чтобы гарантировать отсутствие влаги. Затем красный краситель заменяется желтым в растворителе, таком как целлозольв (2-этоксиэтанол). Название желтый смесь терминов желтый и целлозольв. Флоксин-тартразин Лендрума для клеточных включений является одним из примеров окрашивания желтым сольвом.

Красители

Среди красителей, используемых для окрашивания трихромом, есть:

красный
Кислый фуксин, ксилидин понсо, хромотроп 2R, Бибрих алый, Понсо 6R, флоксин
Синий и зеленый
Светло-зеленый SF желтоватый, Быстрый зеленый FCF, метиловый синий, вода синий
Желтый
Пикриновая кислота, оранжевый G, Мартиус желтый, тартразин, фрезерный желтый

внешняя ссылка

Смотрите также

Примечания

  1. ^ Ламар Джонс, М. "Руководство по образованию специальных пятен". Глава 10: Освоение пятен трихрома. Дако. Получено 20 мая 2011.

Рекомендации

  • Бейкер Дж. Р. (1958) Принципы биологической микротехники. Лондон: Метуэн.
  • Горобин Р.В. (1982) Гистохимия. Штутгарт: Густав Фишер.
  • Хоробин Р.В. (1988) Понимание гистохимии. Чичестер: Эллис Хорвуд.
  • Кирнан Дж. А. (2008) Гистологические и гистохимические методы, 3-е изд. Блоксхэм: Наследник.
  • Пренто П. (2009) Окрашивание макромолекул: возможные механизмы и примеры. Биотехнология. Histochem. 84: 139-158.
  • Пухтлер Х., Ислер Х. (1958) Влияние фосфорномолибденовой кислоты на окрашиваемость соединительных тканей различными красителями. J. Histochem. Cytochem. 6: 265-270.
  • Reid PE, Iagallo M, Nehr S, Jankunis M, Morrow P (1993) Механизм методов соединительной ткани. 1. Влияние концентрации красителя и времени окрашивания на процедуры с анионным красителем. Histochem. J. 25: 821-829.