Кислотостойкость - Acid-fastness
Кислотостойкость является физическим свойством некоторых бактериальный и эукариотический клетки, а также некоторые субклеточные структуры, в частности их устойчивость к обесцвечиванию кислотами в лабораторных условиях. окрашивание процедуры.[1][2] Окрашенные как часть образца, эти организмы могут противостоять процедурам обесцвечивания на основе кислоты и / или этанола, которые обычно используются во многих протоколах окрашивания, отсюда и название кислотоустойчивый.[2]
Механизмы кислотостойкости различаются в зависимости от вида, хотя наиболее известный пример относится к роду Микобактерии, который включает виды, вызывающие туберкулез и проказу. Кислотостойкость Микобактерии связано с высоким миколиновая кислота содержание их клеточные стенки, который отвечает за картину окрашивания: плохое всасывание с последующим высоким удерживанием. Некоторые бактерии также могут быть частично кислотоустойчивыми, например Нокардия.
Кислотоустойчивые организмы сложно охарактеризовать с помощью стандартных микробиологических методов, хотя их можно окрашивать с помощью концентрированных красителей, особенно когда процесс окрашивания сочетается с нагреванием. Некоторые, например Микобактерии, может быть окрашен Окраска по Граму, но они плохо воспринимают кристаллический фиолетовый и поэтому кажутся светло-фиолетовыми, что потенциально может привести к неправильной грамположительной идентификации.[3]
Наиболее распространенный метод окрашивания, используемый для идентификации кислотоустойчивых бактерий, - это Пятно Циля-Нильсена, в котором кислотоустойчивые виды окрашены в ярко-красный цвет и отчетливо выделяются на синем фоне. Другой метод - это Киньюн метод, в котором бактерии окрашены в ярко-красный цвет и четко выделяются на зеленом фоне. Кислотоустойчивый Микобактерии также можно визуализировать флуоресцентная микроскопия с использованием специфических флуоресцентных красителей (краситель аурамин-родаминовый, Например).[4] Яйца паразитической легочной двуустки Paragonimus westermani фактически уничтожаются пятном, что может затруднить диагностику у пациентов с симптомами, подобными туберкулезу[нужна цитата ].
Некоторые методы кислотостойкого окрашивания
- Пятно Циля – Нильсена (классический и модифицированный виды отбеливателей)[5]
- Kinyoun пятно
- Для людей с дальтонизмом (или на заднем плане, где выявить красные бактерии сложно), Виктория Блю можно заменить на карбол фуксин и пикриновая кислота можно использовать как контрпятно вместо метиленовый синий, и остальная часть техники киньюна может быть использована.[6]
- Различные методы окрашивания бактериальных спор с использованием Kenyon, например.
- Метод Меллера
- Метод Дорнера[7] (обесцвечивающее средство на спиртовой основе) без Шеффер-Фултон[8] модификация (обесцвечивание водой)[9]
- Моющий метод с использованием Tergitol 7, неионогенный полигликолевый эфир ПАВ типа НП-7 [10]
- Различные методы окрашивания бактериальных спор с использованием Kenyon, например.
- Пятно на месте[11]
- Пятно Эллиса и Заброварного[15][16] (без фенола / карболовой кислоты)
- Окрашивание аурамина-родамином
- Окраска аурамин-фенолом
Известные кислотоустойчивые структуры
Очень немногие структуры кислотостойкие; это делает окрашивание на кислотостойкость особенно полезным в диагностике. Ниже приведены известные примеры кислотостойких или модифицированных кислотостойких структур:
- Все микобактерии - М. туберкулез, M. leprae, М. смегматис и нетипичный Микобактерии
- Актиномицеты (особенно некоторые аэробные) с миколовой кислотой в клеточной стенке (примечание Streptomyces нет); не путать с Актиномицеты, который является некислотным родом актиномицет
- Нокардия (слабо кислотоустойчивый; сопротивляется обесцвечиванию при более низких концентрациях кислоты)
- Родококк
- Гордония (актиномицет)
- Цукамурелла
- Dietzia
- Глава сперма
- Бактериальные споры, см. Эндоспора
- Легионелла микдадеи
- Определенные клеточные включения, например
- Тельца включения цитоплазмы наблюдаются в
- Нейроны в 5 слое коры головного мозга нейрональный цероид липофусциноз (Болезнь Баттена ).
- Ядерные тела включения замечены в
- Отравление свинцом
- Отравление висмутом.
- Тельца включения цитоплазмы наблюдаются в
- Ооцисты некоторых кокцидиан паразиты в фекалиях, такие как:
- Несколько других паразитов:
- Саркоцистис
- Taenia saginata яйца хорошо окрашиваются, но Taenia solium яйца нет (можно использовать для различения)
- Эхинококковые кисты, особенно их "крючки«окрашивают ZN нерегулярно, но излучают ярко-красную флуоресценцию в зеленом свете и могут помочь в обнаружении на умеренно тяжелом фоне или с редкими крючками.[20]
- Формы грибковых дрожжей непостоянно окрашиваются кислотоустойчивым красителем, который считается красителем узкого спектра для грибов.[21] В исследовании кислотоустойчивости грибов,[22] 60% blastomyces и 47% гистоплазмы показали положительное цитоплазматическое окрашивание дрожжеподобных клеток, Cryptococcus или Candida не окрашивались, а эндоспоры Coccidioides наблюдались очень редко.
использованная литература
- ^ Мэдисон Б. (2001). «Применение красителей в клинической микробиологии». Биотехнология Histochem. 76 (3): 119–25. Дои:10.1080/714028138. PMID 11475314.
- ^ а б Райан К.Дж.; Рэй CG, ред. (2004). Шеррис Медицинская микробиология (4-е изд.). Макгроу Хилл. ISBN 0-8385-8529-9.
- ^ Рейнольдс, Джеки; Мойес, Рита Б .; Брейквелл, Дональд П. (ноябрь 2009 г.). «Дифференциальное окрашивание бактерий: кислотоустойчивое окрашивание». Текущие протоколы в микробиологии. Приложение 3: Приложение 3H. Дои:10.1002 / 9780471729259.mca03hs15. ISSN 1934-8533. PMID 19885935. S2CID 45685776.
- ^ Эйб C (2003). «[Стандартизация лабораторных тестов на туберкулез и их квалификационная проверка]». Кеккаку. 78 (8): 541–51. PMID 14509226.
- ^ «Кислотный быстрый / Аурамин-родамин». www.pathologyoutlines.com.
- ^ Теория и практика гистологических методов, Джон Д. Бэнкрофт, 6-е изд., Стр. 314.
- ^ Дорнер, В. 1926. Простая процедура для окрашивания спор. Le Lait 6: 8-12.
- ^ Шеффер А.Б., Фултон М. (1933). «Упрощенный метод окрашивания эндоспор». Наука. 77 (1990): 194. Bibcode:1933Sci .... 77..194S. Дои:10.1126 / science.77.1990.194. PMID 17741261.
- ^ Протокол окрашивания эндоспор с веб-сайта Американского общества микробиологии В архиве 2012-06-01 на Wayback Machine
- ^ http://daignet.de/site-content/die-daig/fachorgan/2007-1/ejomr-2007_8-pdfs/S.356_Hayama.pdf
- ^ "Stainsfile - Fite". Stainsfile.info. Архивировано из оригинал на 2011-11-18. Получено 2012-06-28.
- ^ «Протокол окрашивания по Фите-Фарако для лепрозных бацилл». www.ihcworld.com.
- ^ "Stainsfile - Fite Faraco". Stainsfile.info. Архивировано из оригинал на 2011-11-18. Получено 2012-06-28.
- ^ "Stainsfile - Уэйд Файт". Stainsfile.info. Архивировано из оригинал на 2011-11-18. Получено 2012-06-28.
- ^ Ellis, R.C .; Заброварный, Л. А. (1993). «Более безопасный метод окрашивания кислотоустойчивых бацилл». Журнал клинической патологии. 46 (6): 559–560. Дои:10.1136 / jcp.46.6.559. ЧВК 501296. PMID 7687254.
- ^ «Архивная копия». Архивировано из оригинал на 2006-01-04. Получено 2006-03-11.CS1 maint: заархивированная копия как заголовок (ссылка на сайт)
- ^ Гарсия Л.С., Брукнер Д.А., Брюэр Т.С., Шимицу Р.Ю. (июль 1983 г.). «Методы выделения и идентификации ооцист Cryptosporidium из образцов кала». J. Clin. Микробиол. 18 (1): 185–90. Дои:10.1128 / JCM.18.1.185-190.1983. ЧВК 270765. PMID 6193138.
- ^ Нг Э., Маркелл Э.К., Флеминг Р.Л., Фрид М. (сентябрь 1984 г.). «Демонстрация Isospora belli кислотостойким окрашиванием у пациента с синдромом приобретенного иммунодефицита». J. Clin. Микробиол. 20 (3): 384–6. Дои:10.1128 / JCM.20.3.384-386.1984. ЧВК 271334. PMID 6208216.
- ^ Ортега Ю. Р., Стерлинг С. Р., Гилман Р. Х., Кама В. А., Диас Ф. (май 1993 г.). «Вид Cyclospora - новый простейший патоген человека». N. Engl. J. Med. 328 (18): 1308–12. Дои:10.1056 / NEJM199305063281804. PMID 8469253.
- ^ Клавель А., Вареа М., Дойс О, Лопес Л., Килес Дж., Кастильо Ф. Дж., Рубио С., Гомес-Лус Р. (1999). «Визуализация эхинококковых элементов: сравнение нескольких методик». J Clin Microbiol. 37 (5): 1561–3. Дои:10.1128 / JCM.37.5.1561-1563.1999. ЧВК 84828. PMID 10203521.
- ^ «Дако Продактс - Аджилент» (PDF). www.dako.com. Получено 3 декабря 2018.
- ^ Заработная плата ds, Wear dJ. кислотоустойчивость грибов при бластомикозах и гистоплазмозах. Arch Pathol Lab Med 1982; 106: 440-41.
Примеры онлайн-протокола
- Ziehl-Neelsen протокол (PDF формат).
- Альтернативный Метод Эллиса и Заброварного для окрашивания AFB.