Эффекторная нуклеаза, подобная активатору транскрипции - Transcription activator-like effector nuclease

Рисунок с заполнением пространства димерного слияния TALE-FokI (синий: TALE; зеленый: FokI), связанный с ДНК (PDB: 1ФОК, 3UGM), Дэвид Гудселл
Часть серия на
Генная инженерия
Генная инженерия logo.png
 
Генетически модифицированные организмы
История и регулирование
Процесс
Приложения
Споры

Эффекторные нуклеазы, подобные активатору транскрипции (ТАЛЕН) находятся рестрикционные ферменты которые можно сконструировать, чтобы разрезать определенные последовательности ДНК. Они сделаны путем сплавления TAL эффектор ДНК-связывающий домен к домену расщепления ДНК (a нуклеаза который разрезает нити ДНК). Эффекторы, подобные активаторам транскрипции (TALE), могут быть сконструированы для связывания практически с любой желаемой последовательностью ДНК, поэтому в сочетании с нуклеазой ДНК можно разрезать в определенных местах.[1] Рестрикционные ферменты можно вводить в клетки для использования в редактирование генов или для геном редактирование на месте, техника, известная как редактирование генома с помощью инженерных нуклеаз. Наряду с нуклеазы цинковых пальцев и CRISPR / Cas9, TALEN - выдающийся инструмент в области редактирование генома.

TALE ДНК-связывающий домен

TAL эффекторы белки, которые секретируются Ксантомонады бактерии через их система секреции типа III когда они заражать растения.[2] ДНК-связывающий домен содержит повторяющиеся высококонсервативные 33–34 аминокислота последовательность с расходящимися 12-ю и 13-ю аминокислотами. Эти две позиции, называемые повторяющейся переменной Diresidue (RVD), сильно изменчивы и показывают сильную корреляцию с конкретными нуклеотид признание.[3][4] Эта прямая взаимосвязь между аминокислотной последовательностью и распознаванием ДНК позволила конструировать специфические ДНК-связывающие домены путем выбора комбинации повторяющихся сегментов, содержащих соответствующие RVD.[1] Примечательно, что небольшие изменения в RVD и включение «нетрадиционных» последовательностей RVD могут улучшить специфичность нацеливания.[5]

Домен расщепления ДНК

Неспецифический домен расщепления ДНК с конца FokI эндонуклеаза может быть использована для создания гибрида нуклеазы которые активны в тесте на дрожжи.[6][7] Эти реагенты также активны в клетках растений.[8][9] и в клетках животных.[9][10][11][12] Первоначальные исследования TALEN использовали домен расщепления FokI дикого типа, но в некоторых последующих исследованиях TALEN[11][13][14] также использовали варианты домена расщепления FokI с мутациями, предназначенными для улучшения специфичности расщепления[15][16] и активность расщепления.[17] Домен FokI функционирует как димер, требуя двух конструкций с уникальными ДНК-связывающими доменами для сайтов в целевом геноме с правильной ориентацией и промежутками. Как количество аминокислотных остатков между ДНК-связывающим доменом TALE и доменом расщепления FokI, так и количество оснований между двумя отдельными сайтами связывания TALEN, по-видимому, являются важными параметрами для достижения высоких уровней активности.[10][18]

Инжиниринг TALEN constructs

Простая взаимосвязь между аминокислотной последовательностью и ДНК-узнаванием связывающего домена TALE позволяет эффективно создавать белки. В этом случае, искусственный синтез генов проблематично из-за неправильного отжиг повторяющейся последовательности, обнаруженной в связывающем домене TALE.[19] Одним из решений этого является использование общедоступной программы (DNAWorks[20]) вычислять олигонуклеотиды подходит для сборки в два этапа ПЦР сборка олигонуклеотидов с последующей амплификацией целого гена. Также сообщалось о ряде модульных схем сборки для создания инженерных конструкций TALE.[9][19][21][22][23][24] Оба метода предлагают систематический подход к конструированию связывающих ДНК доменов, который концептуально похож на метод модульной сборки для создания цинковый палец Домены узнавания ДНК.

Рабочий процесс редактирования генома вашего любимого гена (YFG) с помощью TALEN. Целевая последовательность идентифицируется, соответствующая последовательность TALEN конструируется и вставляется в плазмиду. Плазмида вставляется в клетку-мишень, где она транслируется с образованием функционального TALEN, который входит в ядро, связывает и расщепляет последовательность-мишень. В зависимости от приложения это может быть использовано для внесения ошибки (для нокаутации целевого гена) или для введения новой последовательности ДНК в целевой ген.

Трансфекция

После сборки конструкций TALEN они вставляются в плазмиды; тогда целевые клетки трансфицированный с плазмидами, а генные продукты выразил и войдите в ядро, чтобы получить доступ к геному. В качестве альтернативы конструкции TALEN могут быть доставлены в клетки в виде мРНК, что исключает возможность геномной интеграции белка, экспрессирующего TALEN. Использование мРНК-вектора также может резко повысить уровень гомологически направленной репарации (HDR) и успешность интрогрессии во время редактирования гена.

Редактирование генома

Механизмы

TALEN можно использовать для редактирования геномов, вызывая двухцепочечные разрывы (DSB), на которые клетки реагируют с помощью механизмов восстановления.

Негомологичное соединение концов (NHEJ) непосредственно лигирует ДНК с любой стороны двухцепочечного разрыва, где существует очень небольшое перекрытие последовательностей для отжига или его нет. Этот механизм восстановления вызывает ошибки в геноме через инделы (вставка или удаление) или хромосомная перестройка; любые такие ошибки могут сделать продукты генов, закодированные в этом месте, нефункциональными.[10] Поскольку эта активность может варьироваться в зависимости от вида, типа клеток, используемого гена-мишени и нуклеазы, ее следует контролировать при разработке новых систем. Может быть проведен простой анализ гетеродуплексного расщепления, который обнаруживает любые различия между двумя аллелями, амплифицированными с помощью ПЦР. Продукты расщепления можно визуализировать на простых агарозных гелях или пластинчатых гелевых системах.

Альтернативно, ДНК можно ввести в геном через NHEJ в присутствии экзогенных двухцепочечных фрагментов ДНК.[10]

Гомологически направленный ремонт также может вводить чужеродную ДНК в DSB, поскольку трансфицированные двухцепочечные последовательности используются в качестве матриц для ферментов репарации.[10]

Приложения

TALEN использовался для эффективной модификации геномов растений,[25] создание экономически важных продовольственных культур с благоприятными питательными качествами.[26] Их также использовали для разработки инструментов для производства биотопливо.[27] Кроме того, его использовали для создания стабильно модифицированных человеческих эмбриональная стволовая клетка и индуцированная плюрипотентная стволовая клетка (IPSCs) клоны и линии эритроидных клеток человека,[11][28] произвести нокаут C. elegans,[12] нокаутирующие крысы,[13] нокаутные мыши[29] и нокаут данио.[14][30] Более того, этот метод можно использовать для создания организмов, вызывающих нокаут. Wu et al. Получили крупный рогатый скот с нокаутом Sp110, используя никазы Талена для индукции повышенной устойчивости туберкулеза.[31] Этот подход также использовался для создания крыс с нокаутом путем микроинъекции мРНК TALEN в одноклеточные эмбрионы.[32]

TALEN также использовался экспериментально для исправления генетических ошибок, лежащих в основе болезни.[33] Например, он был использован in vitro для исправления генетических дефектов, вызывающих такие расстройства, как серповидноклеточная анемия,[28][34] пигментная ксеродермия,[35] и буллезный эпидермолиз.[36] Недавно было показано, что TALEN можно использовать в качестве инструмента, позволяющего использовать иммунную систему для борьбы с раком; Нацеливание, опосредованное TALEN, может генерировать Т-клетки, устойчивые к химиотерапевтическим препаратам и проявляющие противоопухолевую активность.[37][38]

Теоретически, геномная специфичность сконструированных слияний TALEN позволяет исправлять ошибки в отдельных генетических локусах посредством гомологически направленной репарации с правильной экзогенной матрицы.[33] Однако на самом деле на месте Применение TALEN в настоящее время ограничено из-за отсутствия эффективного механизма доставки, неизвестных иммуногенных факторов и неопределенности в отношении специфичности связывания TALEN.[33]

Еще одно новое применение TALEN - это его способность сочетаться с другими инструментами геномной инженерии, такими как мегануклеазы. ДНК-связывающая область эффектора TAL может быть объединена с доменом расщепления мегануклеазы для создания гибридной архитектуры, сочетающей легкость инженерии и высокоспецифичную активность связывания ДНК эффектора TAL с низкой частотой сайтов и специфичностью мегануклеазы.[39]

По сравнению с другими методами редактирования генома TALEN находится посередине по сложности и стоимости. В отличие от ZFNs, TALEN распознает одиночные нуклеотиды. Гораздо проще спроектировать взаимодействия между ДНК-связывающими доменами TALEN и их целевыми нуклеотидами, чем создать взаимодействия с ZNF и их триплетами целевых нуклеотидов.[40] С другой стороны, CRISPR полагается на образование рибонуклеотидного комплекса вместо распознавания белок / ДНК. gRNA могут быть нацелены практически на любую последовательность в геноме, и их можно получить дешево, что делает CRISPR более эффективным и менее дорогим, чем TALEN и ZFN. TALEN в конечном итоге в 200 раз дороже, чем CRISPR, и на выполнение требуется на несколько месяцев больше.

Точность эффекторной нуклеазы TAL

Нецелевое действие активной нуклеазы может приводить к нежелательным двухцепочечным разрывам и, как следствие, к хромосомным перестройкам и / или гибели клеток. Были проведены исследования для сравнения относительной токсичности, связанной с нуклеазами, доступных технологий. На основании этих исследований [18] и максимальное теоретическое расстояние между связыванием ДНК и нуклеазной активностью, конструкции TALEN, как полагают, обладают наибольшей точностью среди доступных в настоящее время технологий.[41]

Смотрите также

Рекомендации

  1. ^ а б Boch J (февраль 2011 г.). «СКАЗКИ о нацеливании на геном». Природа Биотехнологии. 29 (2): 135–6. Дои:10.1038 / nbt.1767. PMID  21301438.
  2. ^ Boch J, Bonas U (сентябрь 2010 г.). "Эффекторы Xanthomonas AvrBs3 типа III: открытие и функции". Ежегодный обзор фитопатологии. 48: 419–36. Дои:10.1146 / annurev-phyto-080508-081936. PMID  19400638.
  3. ^ Boch J, Scholze H, Schornack S, Landgraf A, Hahn S, Kay S, Lahaye T, Nickstadt A, Bonas U (декабрь 2009 г.). «Нарушение кода специфичности связывания ДНК эффекторов TAL-типа III». Наука. 326 (5959): 1509–12. Bibcode:2009Sci ... 326.1509B. Дои:10.1126 / science.1178811. PMID  19933107.
  4. ^ Москоу MJ, Богданов AJ (декабрь 2009 г.). «Простой шифр управляет распознаванием ДНК эффекторами TAL». Наука. 326 (5959): 1501. Bibcode:2009Научный ... 326.1501M. Дои:10.1126 / science.1178817. PMID  19933106.
  5. ^ Juillerat A, Pessereau C, Dubois G, Guyot V, Maréchal A, Valton J, Daboussi F, Poirot L, Duclert A, Duchateau P (январь 2015 г.). «Оптимизированная настройка специфичности TALEN с использованием нестандартных RVD». Научные отчеты. 5: 8150. Bibcode:2015НатСР ... 5E8150J. Дои:10.1038 / srep08150. ЧВК  4311247. PMID  25632877.
  6. ^ Кристиан М., Чермак Т., Дойл Э.Л., Шмидт С., Чжан Ф., Хуммель А., Богданов А.Дж., Войтас Д.Ф. (октябрь 2010 г.). «Нацеливание на двухцепочечные разрывы ДНК с помощью эффекторных нуклеаз TAL». Генетика. 186 (2): 757–61. Дои:10.1534 / genetics.110.120717. ЧВК  2942870. PMID  20660643.
  7. ^ Ли Т., Хуанг С., Цзян В.З., Райт Д., Сполдинг М.Х., Weeks DP, Ян Б. (январь 2011 г.). «Нуклеазы TAL (TALN): гибридные белки, состоящие из эффекторов TAL и домена расщепления ДНК FokI». Исследования нуклеиновых кислот. 39 (1): 359–72. Дои:10.1093 / nar / gkq704. ЧВК  3017587. PMID  20699274.
  8. ^ Махфуз М.М., Ли Л., Шамимуззаман М., Вибово А., Фанг X, Чжу Дж. К. (февраль 2011 г.). «Созданная de novo гибридная нуклеаза, подобная активатору транскрипции (TALE), с новой специфичностью связывания ДНК создает двухцепочечные разрывы». Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки. 108 (6): 2623–8. Bibcode:2011ПНАС..108.2623М. Дои:10.1073 / pnas.1019533108. ЧВК  3038751. PMID  21262818.
  9. ^ а б c Чермак Т., Дойл Е.Л., Кристиан М., Ван Л., Чжан Ю., Шмидт С., Баллер Дж. А., Сомия Н. В., Богданов А. Дж., Войтас Д. Ф. (июль 2011 г.). «Эффективный дизайн и сборка пользовательских TALEN и других эффекторных конструкций на основе TAL для нацеливания на ДНК». Исследования нуклеиновых кислот. 39 (12): e82. Дои:10.1093 / nar / gkr218. ЧВК  3130291. PMID  21493687.
  10. ^ а б c d е Miller JC, Tan S, Qiao G, Barlow KA, Wang J, Xia DF, Meng X, Paschon DE, Leung E, Hinkley SJ, Dulay GP, Hua KL, Ankoudinova I, Cost GJ, Urnov FD, Zhang HS, Holmes MC , Чжан Л., Грегори П. Д., Ребар Э. Дж. (Февраль 2011 г.). «СКАЗКА об архитектуре нуклеазы для эффективного редактирования генома». Природа Биотехнологии. 29 (2): 143–8. Дои:10.1038 / nbt.1755. PMID  21179091.
  11. ^ а б c Хоккемейер Д., Ван Х., Киани С., Лай С.С., Гао К., Кэссиди Дж. П., Кост Дж. Дж., Чжан Л., Сантьяго И., Миллер Дж. , Jaenisch R (июль 2011 г.). «Генная инженерия плюрипотентных клеток человека с использованием нуклеаз TALE». Природа Биотехнологии. 29 (8): 731–4. Дои:10.1038 / nbt.1927. ЧВК  3152587. PMID  21738127.
  12. ^ а б Wood AJ, Lo TW, Zeitler B, Pickle CS, Ralston EJ, Lee AH, Amora R, Miller JC, Leung E, Meng X, Zhang L, Rebar EJ, Грегори П.Д., Урнов FD, Мейер Б.Дж. (июль 2011 г.). «Целевое редактирование генома для разных видов с использованием ZFN и TALEN». Наука. 333 (6040): 307. Bibcode:2011Sci ... 333..307W. Дои:10.1126 / science.1207773. ЧВК  3489282. PMID  21700836.
  13. ^ а б Тессон Л., Усал С., Менорет С., Люн Э., Найлс Б.Дж., Реми С., Сантьяго И., Винсент А.И., Мэн Х, Чжан Л., Грегори П.Д., Анегон И., Стоимость ГДж (август 2011 г.). «Нокаутные крысы, полученные в результате микроинъекции эмбрионов TALEN». Природа Биотехнологии. 29 (8): 695–6. Дои:10.1038 / nbt.1940. PMID  21822240.
  14. ^ а б Хуан П., Сяо А., Чжоу М., Чжу З., Лин С., Чжан Б. (август 2011 г.). «Наследственное нацеливание гена у рыбок данио с использованием индивидуальных TALEN». Природа Биотехнологии. 29 (8): 699–700. Дои:10.1038 / nbt.1939. PMID  21822242.
  15. ^ Дойон Ю., Во Т.Д., Мендель М.С., Гринберг С.Г., Ван Дж., Ся Д.Ф., Миллер Дж. К., Урнов Ф. Д., Грегори П. Д., Холмс М.С. (январь 2011 г.). «Повышение активности нуклеазы цинкового пальца с улучшенной облигатной гетеродимерной архитектурой». Методы природы. 8 (1): 74–9. Дои:10.1038 / nmeth.1539. PMID  21131970.
  16. ^ Щепек М., Брондани В., Бюхель Дж., Серрано Л., Сегал Д. Д., Катомен Т. (июль 2007 г.). «Изменение структуры интерфейса димеризации снижает токсичность нуклеаз типа« цинковые пальцы »» (PDF). Природа Биотехнологии. 25 (7): 786–93. Дои:10.1038 / nbt1317. PMID  17603476.
  17. ^ Гуо Дж., Гадж Т., Барбас К.Ф. (июль 2010 г.). «Направленная эволюция расширенного и высокоэффективного домена расщепления FokI нуклеазами« цинковые пальцы »». Журнал молекулярной биологии. 400 (1): 96–107. Дои:10.1016 / j.jmb.2010.04.060. ЧВК  2885538. PMID  20447404.
  18. ^ а б Муссолино С., Морбитцер Р., Лютге Ф., Даннеманн Н., Лахайе Т., Катомен Т. (ноябрь 2011 г.). «Новый каркас нуклеазы TALE обеспечивает высокую активность редактирования генома в сочетании с низкой токсичностью». Исследования нуклеиновых кислот. 39 (21): 9283–93. Дои:10.1093 / nar / gkr597. ЧВК  3241638. PMID  21813459.
  19. ^ а б Чжан Ф., Конг Л., Лодато С., Косури С., Чёрч Г.М., Арлотта П. (февраль 2011 г.). «Эффективное конструирование последовательности-специфичных эффекторов TAL для модуляции транскрипции млекопитающих». Природа Биотехнологии. 29 (2): 149–53. Дои:10.1038 / nbt.1775. ЧВК  3084533. PMID  21248753.
  20. ^ Гувер Д. (2012). «Использование DNAWorks в разработке олигонуклеотидов для синтеза генов на основе ПЦР». Синтез генов. Методы молекулярной биологии. 852. С. 215–23. Дои:10.1007/978-1-61779-564-0_16. ISBN  978-1-61779-563-3. PMID  22328436.
  21. ^ Морбитцер Р., Эльзэссер Дж., Хауснер Дж., Лахайе Т. (июль 2011 г.). «Сборка пользовательских ДНК-связывающих доменов TALE-типа путем модульного клонирования». Исследования нуклеиновых кислот. 39 (13): 5790–9. Дои:10.1093 / nar / gkr151. ЧВК  3141260. PMID  21421566.
  22. ^ Ли Т., Хуанг С., Чжао Х, Райт Д.А., Карпентер С., Сполдинг М.Х., Weeks DP, Ян Б. (август 2011 г.). «Модульные дизайнерские эффекторные нуклеазы TAL для целевого нокаута и замены генов у эукариот». Исследования нуклеиновых кислот. 39 (14): 6315–25. Дои:10.1093 / nar / gkr188. ЧВК  3152341. PMID  21459844.
  23. ^ Geissler R, Scholze H, Hahn S, Streubel J, Bonas U, Behrens SE, Boch J (2011). Шиу С. (ред.). «Активаторы транскрипции генов человека с программируемой ДНК-специфичностью». PLOS ONE. 6 (5): e19509. Bibcode:2011PLoSO ... 619509G. Дои:10.1371 / journal.pone.0019509. ЧВК  3098229. PMID  21625585.
  24. ^ Вебер Э, Грюцнер Р., Вернер С., Энглер С., Мариллонне С. (2011). Бендахман М (ред.). «Сборка дизайнерских TAL-эффекторов методом клонирования Golden Gate». PLOS ONE. 6 (5): e19722. Bibcode:2011PLoSO ... 619722W. Дои:10.1371 / journal.pone.0019722. ЧВК  3098256. PMID  21625552.
  25. ^ Чжан Ю., Чжан Ф., Ли Х, Баллер Дж. А., Ци Й., Старкер К. Г., Богданов А. Дж., Войтас Д. Ф. (январь 2013 г.). «Эффекторные нуклеазы, подобные активаторам транскрипции, обеспечивают эффективную инженерию генома растений». Физиология растений. 161 (1): 20–7. Дои:10.1104 / стр.112.205179. ЧВК  3532252. PMID  23124327.
  26. ^ Хаун В., Коффман А., Класен Б.М., Деморест З.Л., Лоуи А., Рэй Е, Реттерат А., Стоддард Т., Джуллерат А., Седрон Ф., Матис Л., Войтас Д. Ф., Чжан Ф. (сентябрь 2014 г.). «Повышение качества соевого масла за счет целенаправленного мутагенеза семейства гена десатуразы жирных кислот 2». Журнал биотехнологии растений. 12 (7): 934–40. Дои:10.1111 / pbi.12201. PMID  24851712.
  27. ^ Дабусси Ф., Ледюк С., Марешал А., Дюбуа Дж., Гайо В., Перес-Мишо С., Амато А., Фальсиатор А., Жюльерат А., Бердели М., Войтас Д. Ф., Каварек Л., Дюшато П. (май 2014 г.). «Геномная инженерия расширяет возможности диатомовой водоросли Phaeodactylum tricornutum для биотехнологии». Nature Communications. 5: 3831. Bibcode:2014 НатКо ... 5.3831D. Дои:10.1038 / ncomms4831. PMID  24871200.
  28. ^ а б Винерт Б., Фаннелл А. П., Нортон Л. Дж., Пирсон Р. К., Уилкинсон-Уайт Л. Е., Лестер К., Вадолас Дж., Портеус М. Х., Мэтьюз Дж. М., Куинлан К. Г., Кроссли М. (2015). «Редактирование генома с целью введения полезной природной мутации, связанной с повышенным содержанием глобина плода». Nature Communications. 6: 7085. Bibcode:2015 НатКо ... 6,7085 Вт. Дои:10.1038 / ncomms8085. PMID  25971621.
  29. ^ Дэвис Б., Дэвис Дж., Прис К., Пулияди Р., Шумска Д., Бхаттачарья С. (2013). «Сайт-специфическая мутация локуса Zic2 путем микроинъекции мРНК TALEN в ооциты CD1, C3H и C57BL / 6J мыши». PLOS ONE. 8 (3): e60216. Bibcode:2013PLoSO ... 860216D. Дои:10.1371 / journal.pone.0060216. ЧВК  3610929. PMID  23555929.
  30. ^ Сандер Дж. Д., Кейд Л., Хайтер С., Рейон Д., Петерсон Р. Т., Джунг Дж. К., Йе Дж. Р. (август 2011 г.). «Направленное разрушение генов в соматических клетках рыбок данио с использованием сконструированных TALEN». Природа Биотехнологии. 29 (8): 697–8. Дои:10.1038 / nbt.1934. ЧВК  3154023. PMID  21822241.
  31. ^ Ву Х, Ван И, Чжан И, Ян М, Ур Дж, Лю Дж, Чжан И (март 2015 г.). "Опосредованный никазой TALE нокин SP110 наделяет крупный рогатый скот повышенной устойчивостью к туберкулезу". Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки. 112 (13): E1530-9. Bibcode:2015PNAS..112E1530W. Дои:10.1073 / pnas.1421587112. ЧВК  4386332. PMID  25733846.
  32. ^ Понсе де Леон В., Мерилья А.М., Тессон Л., Анегон И., Хаммлер Е. (2014). «Получение TALEN-опосредованных крыс с нокаутом GRdim путем гомологичной рекомбинации». PLOS ONE. 9 (2): e88146. Bibcode:2014PLoSO ... 988146P. Дои:10.1371 / journal.pone.0088146. ЧВК  3921256. PMID  24523878.
  33. ^ а б c Карлсон Д.Ф., Фаренкруг СК, Хакетт ПБ (январь 2012 г.). «Нацеливание на ДНК пальцами и таленами». Молекулярная терапия. Нуклеиновые кислоты. 1 (3): e3. Дои:10.1038 / мтна.2011.5. ЧВК  3381595. PMID  23344620.
  34. ^ Рамалингам С., Анналуру Н., Кандавелу К., Чандрасегаран С. (2014). «TALEN-опосредованное создание и генетическая коррекция индуцированных заболеванием плюрипотентных стволовых клеток человека». Современная генная терапия. 14 (6): 461–72. Дои:10.2174/1566523214666140918101725. PMID  25245091.
  35. ^ Dupuy A, Valton J, Leduc S, Armier J, Galetto R, Gouble A, Lebuhotel C, Stary A, Pâques F, Duchateau P, Sarasin A, Daboussi F (2013). «Целевая генная терапия клеток пигментной ксеродермы с использованием мегануклеазы и TALEN ™». PLOS ONE. 8 (11): e78678. Bibcode:2013PLoSO ... 878678D. Дои:10.1371 / journal.pone.0078678. ЧВК  3827243. PMID  24236034.
  36. ^ Осборн М.Дж., Старкер К.Г., МакЭлрой А.Н., Уэббер Б.Р., Риддл М.Дж., Ся Л., ДеФео А.П., Габриэль Р., Шмидт М., фон Калле С., Карлсон Д.Ф., Мадер М.Л., Джунг Дж.К., Вагнер Дж. Э., Войтас Д.Ф., Блазар Б.Р., Толар J (июнь 2013 г.). «Генная коррекция буллезного эпидермолиза на основе TALEN». Молекулярная терапия. 21 (6): 1151–9. Дои:10,1038 / мт.2013,56. ЧВК  3677309. PMID  23546300.
  37. ^ Валтон Дж., Гайо В., Марешаль А., Филхол Дж. М., Джульерат А., Дюклер А., Дюшато П., Пуаро Л. (сентябрь 2015 г.). «Разработанная CAR T-клетка с множественной лекарственной устойчивостью для аллогенной комбинированной иммунотерапии». Молекулярная терапия. 23 (9): 1507–18. Дои:10.1038 / мт.2015.104. ЧВК  4817890. PMID  26061646.
  38. ^ Пуаро Л., Филип Б., Шиффер-Манниуи С., Ле Клерр Д., Шион-Сотинель I, Дерниам С., Потрел П., Бас С., Лемер Л., Галетто Р., Лебуотель С, Эйкем Дж., Чунг Г. В., Дюклер А., Губль А., Арноулд С., Пеггс К., Пуле М., Шаренберг А.М., Смит Дж. (Сентябрь 2015 г.). "Платформа для производства мультиплексных геномных Т-клеток для" готовой "адоптивной Т-клеточной иммунотерапии". Исследования рака. 75 (18): 3853–64. Дои:10.1158 / 0008-5472.CAN-14-3321. PMID  26183927.
  39. ^ Буассель С., Джарджур Дж., Астрахань А., Адей А., Губл А., Дюшато П., Шендур Дж., Стоддард Б. Л., Черто М. Т., Бейкер Д., Шаренберг А. М. (февраль 2014 г.). "MegaTALs: архитектура нуклеаз с редким расщеплением для терапевтической геномной инженерии". Исследования нуклеиновых кислот. 42 (4): 2591–601. Дои:10.1093 / nar / gkt1224. ЧВК  3936731. PMID  24285304.
  40. ^ «Плюсы и минусы ZFNS, TALENS, CRISPR / CAS». Лаборатория Джексона. Март 2014 г.
  41. ^ Больоли, Эльси; Ричард, Магали. "Boston Consulting Group - Отчет о точности редактирования генов" (PDF).

внешняя ссылка