Тест на денатурацию щелочью - Alkali denaturation test

Тест на денатурацию щелочью
Цельдифференцировать неонатальную кровь от материнской

В испытание на денатурацию щелочью, также известный как А или же Удачный тест, это медицинский тест, используемый для дифференциации плода или неонатальный кровь из материнской крови, обнаруженной в стуле или рвоте новорожденного, или из материнской вагинальной крови.[1][2]

История

Тест был разработан Леонард Апт (1922–2013),[3] американский детский офтальмолог. Первоначально тест использовался для определения источника кровянистого стула у новорожденных. Он был модифицирован, чтобы отличать эмбриональный гемоглобин от материнского в образцах крови из любого источника.[4]

Использует

Тест Apt чаще всего используется в случаях вагинального кровотечения на поздних сроках беременности (дородовое кровотечение ), чтобы определить кровотечение от матери или от плода.[нужна цитата ]

  • Положительный тест указывает на то, что кровь имеет фетальное происхождение и может быть вызвана предлежание сосудов.
  • Отрицательный результат теста свидетельствует о материнском происхождении крови.

На практике тест Apt нельзя проводить при подозрении на предлежание сосудов, поскольку время до коллапса плода с кровотечением из предлежания сосудов часто бывает очень коротким.

Тест Apt также может использоваться для определения наличия крови плода в кровотоке матери в случаях подозрения на кровоизлияние у плода и матери. Поскольку тест - это только качественное определение наличия гемоглобина плода в крови матери, количественное определение Тест Клейхауэра-Бетке чаще используется.

Наконец, тест Apt можно использовать после рождения (послеродовое кровотечение ) если у новорожденного кровавая рвота, кровавый стул или активное кровотечение из назогастрального зонда. Положительный результат теста будет означать, что кровь поступила из желудочно-кишечного или легочного кровотечения новорожденного. Отрицательный тест на Apt указывает на то, что кровь имеет материнское происхождение, предполагая, что новорожденный проглотил или аспирировал материнскую кровь во время родов или во время кормления грудью (например, из трещин груди).

Теория

Тест основан на различиях между материнскими и плодами. гемоглобин. Материнская кровь содержит взрослый гемоглобин, состоящий из двух альфа- и двух бета-субъединиц (он же гемоглобин А или HbA, то есть нормальный взрослый гемоглобин). Кровь плода содержит гемоглобин плода, состоящий из двух альфа- и двух гамма-субъединиц (он же гемоглобин F или HbF, т.е. нормальный гемоглобин плода). Эта разница в составе придает различным типам гемоглобина разные химические свойства (в дополнение к более высокому сродству HbF к растворенному в крови кислороду по сравнению с HbA, что позволяет ребенку извлекать кислород из крови матери). Гемоглобин плода устойчив к щелочной (основной) денатурации, тогда как гемоглобин взрослого человека подвержен такой денатурации. Следовательно, подвергая образец крови воздействию гидроксида натрия (NaOH ) денатурирует взрослого человека, но не гемоглобин плода. Гемоглобин плода под микроскопом будет иметь розоватый цвет, а гемоглобин взрослого - желто-коричневатый.

Метод

Кровь смешивают с небольшим количеством стерильной воды, чтобы вызвать гемолиз из Эритроциты, давая бесплатно гемоглобин. Затем образец центрифугируется в течение нескольких минут. Затем надосадочную жидкость, содержащую розовый гемоглобин, смешивают с 1 мл 1% раствора. NaOH на каждые 5 мл супернатанта. Цвет жидкости оценивается через 2 минуты. Гемоглобин плода останется розовым, а гемоглобин взрослого станет желто-коричневым, поскольку гемоглобин взрослого менее стабилен и преобразуется в гематин который имеет гидроксидный лиганд.[5]

Смотрите также

Рекомендации

  1. ^ Мустафа М.Х., Тейлор М., Флетчер Л. (август 2005 г.). «Моя двухнедельная дочь рвет кровью». Acad Emerg Med. 12 (8): 775–7. Дои:10.1197 / j.aem.2005.03.524. PMID  16079432.
  2. ^ APT L, DOWNEY WS (июль 1955 г.). «Melena neonatorum: синдром проглоченной крови; простой тест на дифференциацию гемоглобина взрослого и плода в кровянистом стуле». J. Pediatr. 47 (1): 6–12. Дои:10.1016 / S0022-3476 (55) 80118-7. PMID  14392548.
  3. ^ Элейн Шмидт, Некролог: 90-летний Леонард Апт, врач-ученый, подаривший зрение миллионам детей., Новости UCLA, 7 февраля 2013 г.
  4. ^ Венес, Циклопедический медицинский словарь Д. Табера - 20-е изд. Компания F. A. Davis, Филадельфия, Пенсильвания. 2005 г.
  5. ^ Педиатрия, Желудочно-кишечное кровотечение
дальнейшее чтение