Полный анализ крови - Complete blood count

Полный анализ крови
См. Подпись
Образец клинического анализа крови перед распечаткой, отображающей результаты клинического анализа крови и дифференциальные результаты.
СинонимыПолный подсчет клеток крови,[1] полный анализ крови (FBC),[2] полный подсчет клеток крови,[3] полное исследование крови (FBE),[2] гемограмма[4]
MeSHD001772
MedlinePlus003642
LOINCКоды для CBC, например, 57021-8
HCPCS-L2G0306

А полный анализ крови (CBC), также известный как полный анализ крови (FBC), представляет собой набор медицинская лаборатория тесты, которые обеспечивают информация о клетках в человеке кровь. CBC указывает количество белые кровяные клетки, красные кровяные тельца и тромбоциты, концентрация гемоглобин, а гематокрит (объемный процент красных кровяных телец). В показатели эритроцитов, которые указывают средний размер и содержание гемоглобина в эритроцитах, также сообщается, и дифференциал лейкоцитов, который подсчитывает различные типы белых кровяных телец, может быть включен.

Общий анализ крови часто проводится как часть медицинского обследования и может использоваться для наблюдения за здоровьем или диагностики заболеваний. Результаты интерпретируются путем сравнения их с эталонные диапазоны, которые различаются в зависимости от пола и возраста. Условия как анемия и тромбоцитопения определяются по аномальным результатам общего анализа крови. Индексы эритроцитов могут предоставить информацию о причине анемии человека, например: недостаток железа и дефицит витамина B12, а результаты дифференциального анализа лейкоцитов могут помочь диагностировать популярный, бактериальный и паразитарные инфекции и заболевания крови подобно лейкемия. Не все результаты, выходящие за пределы допустимого диапазона, требуют медицинского вмешательства.

Общий анализ крови выполняется с использованием основного лабораторного оборудования или автоматический гематологический анализатор, который считает клетки и собирает информацию об их размере и структуре. Измеряется концентрация гемоглобина, и индексы красных кровяных телец рассчитываются на основе измерений красных кровяных телец и гемоглобина. Ручные тесты можно использовать для независимого подтверждения отклонений от нормы. Примерно 10–25% образцов требуют руководства мазок крови рассмотрение,[5] в котором кровь окрашенный и просматривается под микроскоп для проверки соответствия результатов анализатора внешнему виду клеток и поиска отклонений. Гематокрит можно определить вручную по центрифугирование образец и измерение доли эритроцитов, а в лабораториях, не имеющих доступа к автоматизированным приборам, клетки крови подсчитывают под микроскопом с использованием гемоцитометр.

В 1852 г. Карл Виерордт опубликовали первую процедуру анализа крови, которая включала нанесение известного объема крови на предметное стекло микроскопа и подсчет каждой клетки. Изобретение гемоцитометра в 1874 г. Луи-Шарль Малассес упростили микроскопический анализ клеток крови, а в конце 19 века Пол Эрлих и Дмитрий Леонидович Романовский разработали методы окрашивания белых и красных кровяных телец, которые до сих пор используются для исследования мазков крови. Автоматические методы измерения гемоглобина были разработаны в 1920-х годах, и Максвелл Винтроб представил метод гематокрита Винтроба в 1929 году, который, в свою очередь, позволил ему определять индексы эритроцитов. Вехой в автоматизации подсчета клеток крови стал Принцип соултера, который был запатентован Уоллес Х. Коултер в 1953 году. Принцип Коултера использует электрический импеданс измерения для подсчета клеток крови и измерения их размеров - технология, которая до сих пор используется во многих автоматических анализаторах. Дальнейшие исследования 1970-х годов включали использование оптический измерения для подсчета и идентификации клеток, что позволило автоматизировать дифференциал лейкоцитов.

Цель

См. Подпись.
В клетки и тромбоциты в крови человека. В красные кровяные тельца, которые переносят кислород, преобладают и обуславливают цвет крови. В белые кровяные клетки являются частью иммунная система. Тромбоциты необходимы для образовывать сгустки, которые предотвращают чрезмерное кровотечение.

Кровь состоит из жидкой части, называемой плазма, и клеточная часть, содержащая красные кровяные тельца, белые кровяные клетки и тромбоциты.[примечание 1][7] Полный анализ крови оценивает эти три клеточных компонента крови. Некоторые медицинские условия, такие как анемия или же тромбоцитопения, характеризуются заметным увеличением или уменьшением количества клеток крови.[8] Изменения во многих системы органов может повлиять на кровь, поэтому результаты клинического анализа крови полезны для исследования широкого спектра состояний. Из-за объема предоставляемой информации полный анализ крови является одним из наиболее часто выполняемых. медицинская лаборатория тесты.[9][10][11]

CBC часто используется для экран по заболеваниям в рамках медицинского обследования.[12] Это также требуется, когда поставщик медицинских услуг подозревает, что у человека есть заболевание, которое поражает клетки крови, например инфекционное заболевание, а нарушение свертываемости крови, или несколько раки. Людям, у которых были диагностированы нарушения, которые могут вызывать аномальные результаты анализа крови, или которые получают лечение, которое может повлиять на количество клеток крови, может проводиться регулярный общий анализ крови для мониторинга их здоровья.[4][12] и тест часто проводится каждый день людям, которые госпитализированы.[13] Результаты могут указывать на необходимость кровь или же переливание тромбоцитов.[14]

Полный анализ крови имеет специфическое применение во многих медицинские специальности. Часто это выполняется до того, как человек подвергнется хирургия для выявления анемии, обеспечения достаточного уровня тромбоцитов и скрининга на инфекции,[15][16] а также после операции, так что потеря крови можно контролировать.[12][17] В неотложная медицинская помощь, CBC используется для исследования многочисленных симптомов, таких как: высокая температура, боль в животе, и одышка,[18][19][20] и для оценки кровотечения и травма.[21][22] У людей, перенесших химиотерапия или же радиационная терапия от рака, потому что эти методы лечения подавляют выработку клеток крови в костном мозге и может производить очень низкий уровень лейкоцитов, тромбоцитов и гемоглобин.[23] Регулярные анализы крови необходимы людям, принимающим психиатрические препараты, Такие как клозапин и карбамазепин, что в редких случаях может вызвать опасное для жизни падение количества лейкоцитов (агранулоцитоз ).[24][25] Поскольку анемия во время беременности может привести к ухудшению результатов для матери и ее ребенка, общий анализ крови является рутинной частью дородовой уход;[26] И в новорожденные, может потребоваться общий анализ крови для исследования желтуха или подсчитать количество незрелых клеток в дифференциал лейкоцитов, что может быть индикатором сепсис.[27][28]

Общий анализ крови - важный инструмент гематология, который является изучением причины, прогноза, лечения и профилактики заболеваний, связанных с кровью.[29] Результаты клинического анализа крови и мазка мазка отражают функционирование кроветворная система - органы и ткани участвует в производстве и развитии клеток крови, особенно Костный мозг.[9][30] Например, низкое количество всех трех типов клеток (панцитопения ) может указывать на то, что на производство клеток крови влияет заболевание костного мозга, а исследование костного мозга может продолжить расследование причины.[31] Аномальные клетки на мазок крови может указать острый лейкоз или же лимфома,[30] в то время как аномально высокое количество нейтрофилов или лимфоцитов в сочетании с симптомами человека и результатами мазка крови может вызвать подозрение на миелопролиферативное заболевание или же лимфопролиферативное заболевание. Исследование результатов клинического анализа крови и мазка крови может помочь определить причины анемии, например: дефицит питательных веществ, заболевания костного мозга, приобретенные гемолитические анемии и унаследованные условия, такие как серповидноклеточная анемия и талассемия.[32][33]

В эталонные диапазоны для общего анализа крови представляют собой диапазон результатов, обнаруженных у 95% практически здоровых людей.[заметка 2][35] По определению, 5% результатов всегда будут выходить за пределы этого диапазона, поэтому некоторые аномальные результаты могут отражать естественные отклонения, а не указывать на медицинскую проблему.[36] Это особенно вероятно, если такие результаты лишь немного выходят за пределы допустимого диапазона, если они согласуются с предыдущими результатами пациента или если в CBC нет других связанных отклонений.[37] Когда тест проводится на относительно здоровой популяции, количество клинически незначимых отклонений может превышать количество результатов, отражающих болезнь.[38] По этой причине профессиональные организации в США, Соединенном Королевстве и Канаде рекомендуют не проводить предоперационное тестирование CBC для операций с низким риском у лиц без соответствующих заболеваний.[15][39][40] Повторный забор крови для гематологического исследования у госпитализированных пациентов может способствовать: внутрибольничная анемия и может привести к ненужным переливаниям.[38]

Процедура

CBC в исполнении палец метод, используя Эбботт Автоматический анализатор Cell-Dyn 1700

Образец собирается путем забора крови в пробирку, содержащую антикоагулянт - обычно EDTA - остановить его естественное свертывание.[41] Кровь обычно берут из вена, но когда это сложно, его можно забрать из капилляры по палец, или укол у младенцев.[42][43] Тестирование обычно выполняется на автоматическом анализаторе, но для исследования аномальных результатов можно использовать ручные методы, такие как исследование мазка крови или ручной тест на гематокрит.[44] Подсчет клеток и измерение гемоглобина выполняются вручную в лабораториях, не имеющих доступа к автоматизированным приборам.[45]

Автоматизированный

На борту анализатора образец перемешивается для равномерного распределения клеток, затем разбавляется и распределяется по крайней мере на два канала, один из которых используется для подсчета эритроцитов и тромбоцитов, а другой - для подсчета лейкоцитов и определения концентрации гемоглобина. . Некоторые инструменты измеряют гемоглобин в отдельном канале, а дополнительные каналы могут использоваться для дифференциального подсчета лейкоцитов. ретикулоцит подсчет и специальные измерения тромбоцитов.[46][47][48] Ячейки подвешены в потоке жидкости, и их свойства измеряются, когда они проходят мимо датчиков с помощью метода, известного как проточной цитометрии.[заметка 3][49][52] Гидродинамическая фокусировка может использоваться для изоляции отдельных ячеек, чтобы можно было получить более точные результаты: разбавленный образец вводится в поток жидкости низкого давления, в результате чего ячейки в образце выстраиваются в один файл через ламинарный поток.[53][54]

Образцы общего анализа крови в стойке, ожидающие обработки на настольном анализаторе
Sysmex XT-4000i автоматизированный гематологический анализатор
Схема принципа Коултера. Частица, взвешенная в проводящей среде, проходит через отверстие, вызывая увеличение импеданса.
Принцип Коултера - переходное падение тока пропорционально объему частицы.

Для измерения концентрации гемоглобина реагент химикат добавляется в образец для разрушения (лизировать ) эритроциты в отдельном канале от канала, используемого для подсчета эритроцитов. На анализаторах, которые выполняют подсчет лейкоцитов в том же канале, что и измерение гемоглобина, это упрощает подсчет лейкоцитов.[55] Гематологические анализаторы измеряют гемоглобин с помощью спектрофотометрия и основаны на линейная связь между поглощение света и количества присутствующего гемоглобина. Химические вещества используются для преобразования различных форм гемоглобина, таких как оксигемоглобин и карбоксигемоглобин, к одной стабильной форме, обычно цианметгемоглобин, и создать постоянное изменение цвета. Поглощение полученного цвета при измерении на определенной длине волны - обычно 540 нанометры - соответствует концентрации гемоглобина.[56][57]

Датчики подсчитывают и идентифицируют клетки в образце, используя два основных принципа: электрический импеданс и рассеяние света.[58] Подсчет ячеек на основе импеданса работает на Принцип соултера: клетки взвешены в жидкости, несущей электрический ток, и, проходя через небольшое отверстие (апертуру), они вызывают уменьшение тока из-за своего плохого электрическая проводимость. В амплитуда из Напряжение импульс, генерируемый при пересечении ячейкой апертуры, коррелирует с количеством жидкости, вытесняемой ячейкой, и, следовательно, с объемом ячейки,[59][60] в то время как общее количество импульсов коррелирует с количеством ячеек в образце. Распределение объемов ячеек нанесено на гистограмма, а также путем установки пороговых значений объема, основанных на типичных размерах каждого типа клеток, можно идентифицировать и подсчитывать различные популяции клеток.[61]

В методах светорассеяния свет от лазер или вольфрамово-галогенная лампа направлен на поток ячеек для сбора информации об их размере и структуре. Клетки рассеивают свет под разными углами при прохождении луча, что определяется с помощью фотометры.[62] Прямое рассеяние, которое относится к количеству света, рассеянного вдоль оси луча, в основном вызвано дифракция света и коррелирует с размером клетки, в то время как боковое рассеяние (свет, рассеянный под углом 90 градусов) вызван отражение и преломление и предоставляет информацию о клеточной сложности.[62][63]

Радиочастота методы, основанные на импедансе, могут использоваться в сочетании с импедансом. Эти методы работают по тому же принципу измерения прерывания тока, когда клетки проходят через отверстие, но поскольку высокая частота Радиочастотный ток проникает в клетки, амплитуда результирующего импульса зависит от таких факторов, как относительный размер ядро, структуру ядра и количество гранул в цитоплазма.[64][65] Маленькие эритроциты и клеточный мусор, которые по размеру схожи с тромбоцитами, могут влиять на подсчет тромбоцитов, а большие тромбоциты могут быть подсчитаны неточно, поэтому некоторые анализаторы используют дополнительные методы для измерения тромбоцитов, например флуоресцентный окрашивание, многоугловое рассеяние света и моноклональное антитело маркировка.[48]

Большинство анализаторов напрямую измеряют средний размер эритроцитов, который называется средний объем ячейки (MCV) и рассчитайте гематокрит, умножив количество эритроцитов на MCV. Некоторые измеряют гематокрит, сравнивая общий объем эритроцитов с объемом взятой пробы крови, и получают MCV из гематокрита и количества эритроцитов.[66] Концентрация гемоглобина, количество эритроцитов и гематокрит используются для расчета среднего количества гемоглобина в каждом эритроците, средний корпускулярный гемоглобин (МЧ); и его концентрация, средняя концентрация корпускулярного гемоглобина (MCHC).[67] Другой расчет, ширина распределения эритроцитов (RDW), получается из стандартное отклонение среднего объема клеток и отражает изменение размера клеток.[68]

Диаграмма рассеяния, отображающая множество разноцветных кластеров, помеченных типом лейкоцитов, которым они соответствуют.
Пример диаграммы рассеяния лейкоцитов: кластеры разного цвета указывают на разные популяции клеток

После обработки реагентами белые кровяные тельца образуют три различных пика, когда их объемы наносятся на гистограмму. Эти пики примерно соответствуют популяциям гранулоциты, лимфоциты и др. мононуклеарные клетки, позволяя выполнять трехчастный дифференциал только на основе объема ячейки.[69][70] Более продвинутые анализаторы используют дополнительные методы для обеспечения дифференциала от пяти до семи частей, такие как анализ светорассеяния или радиочастотный анализ,[70] или использовать красители для окрашивания определенных химических веществ внутри клеток, например, нуклеиновые кислоты, которые обнаруживаются в более высоких концентрациях в незрелых клетках[71] или же миелопероксидаза, фермент найдено в камерах миелоидная линия.[72][73] Базофилы могут быть подсчитаны в отдельном канале, где реагент разрушает другие белые клетки и оставляет базофилы нетронутыми. Данные, собранные в результате этих измерений, анализируются и наносятся на диаграмма рассеяния, где он образует кластеры, которые коррелируют с каждым типом лейкоцитов.[70][72] Другой подход к автоматизации дифференциального подсчета - использование программного обеспечения для цифровой микроскопии.[74] который использует искусственный интеллект классифицировать лейкоциты из микрофотографии мазка крови. Изображения ячеек отображаются оператору-человеку, который при необходимости может вручную переклассифицировать ячейки.[75]

Большинству анализаторов требуется менее минуты для выполнения всех анализов общего анализа крови.[58] Поскольку анализаторы отбирают и подсчитывают множество отдельных клеток, результаты очень точные.[76] Однако некоторые аномальные клетки могут быть идентифицированы неправильно, что требует ручного просмотра результатов прибора и идентификации аномальных клеток другими способами, которые прибор не может классифицировать.[5][77]

Тестирование в месте оказания медицинской помощи

Тестирование в месте оказания медицинской помощи относится к тестам, проводимым вне лаборатории, например, у постели больного или в клинике.[78][79] Этот метод тестирования быстрее и требует меньше крови, чем обычные методы, и не требует специально обученного персонала, поэтому он полезен в экстренных ситуациях и в районах с ограниченным доступом к ресурсам. Обычно используемые устройства для гематологического тестирования в местах оказания медицинской помощи включают HemoCue, портативный анализатор, который использует спектрофотометрию для измерения концентрации гемоглобина в образце, и i-STAT, который выводит показания гемоглобина путем оценки концентрации красных кровяных телец по проводимости крови.[79] Гемоглобин и гематокрит можно измерить с помощью устройств, предназначенных для анализ газов крови, но эти измерения иногда плохо коррелируют с результатами, полученными стандартными методами.[78] Существуют упрощенные версии гематологических анализаторов, предназначенных для использования в клиниках, которые могут выполнять полный анализ крови и дифференциальный анализ.[80]

Руководство

Диаграмма ручного теста на гематокрит, показывающая долю эритроцитов, измеренную как 0,46.
Ручное определение гематокрита. Кровь была центрифугирована, разделена на эритроциты и плазму.

Тесты можно проводить вручную, когда автоматизированное оборудование недоступно или когда результаты анализатора указывают на необходимость дальнейшего исследования.[45] Автоматические результаты помечаются для ручного анализа мазка крови в 10–25% случаев, что может быть связано с аномальными популяциями клеток, которые анализатор не может правильно подсчитать.[5] внутренние флаги, генерируемые анализатором, которые предполагают, что результаты могут быть неточными,[81] или числовые результаты, выходящие за установленные пороговые значения.[77] Чтобы исследовать эти проблемы, кровь наносится на предметное стекло микроскопа, окрашенное Романовский морилка, и рассмотрено под микроскоп.[82] Оценивается внешний вид красных и белых кровяных телец и тромбоцитов, и при их наличии сообщается о качественных отклонениях.[83] Изменения внешнего вида эритроцитов могут иметь большое диагностическое значение - например, наличие серповидных клеток свидетельствует о серповидноклеточная анемия, и большое количество фрагментированных эритроцитов (шистоциты ) требует срочного расследования, так как может указывать на микроангиопатическая гемолитическая анемия.[84] При некоторых воспалительных состояниях и при парапротеин расстройства как множественная миелома, высокий уровень белка в крови может привести к тому, что красные кровяные тельца будут складываться вместе на мазке, что называется руло.[85] Немного паразитарные болезни, Такие как малярия и бабезиоз, можно обнаружить, обнаружив возбудители в мазке крови,[86] и количество тромбоцитов можно оценить по мазку крови, что полезно, если автоматический подсчет тромбоцитов неточен.[77]

Чтобы провести ручной дифференциальный анализ лейкоцитов, микроскопист подсчитывает 100 клеток в мазке крови и классифицирует их по внешнему виду; иногда считается до 200 клеток.[87] Это дает процентное содержание каждого типа лейкоцитов, и умножая эти проценты на общее количество лейкоцитов, можно получить абсолютное количество лейкоцитов каждого типа.[88] Ручной подсчет подлежит ошибка выборки потому что подсчитывается так мало клеток по сравнению с автоматическим анализом,[76] но он может идентифицировать аномальные клетки, которые анализаторы не могут,[72][77] такой как бластные клетки наблюдается при остром лейкозе.[89] Клинически значимые особенности, такие как токсическая грануляция и вакуолизация также можно установить при микроскопическом исследовании лейкоцитов.[90]

Гематокрит можно определить вручную, заполнив капиллярную пробирку кровью, центрифугировав ее и измерив процент крови, состоящей из эритроцитов.[66] Это полезно в некоторых условиях, которые могут привести к неправильным результатам автоматического определения гематокрита, например: полицитемия (сильно повышенное количество эритроцитов)[66] или серьезный лейкоцитоз (сильно повышенное количество лейкоцитов, которое мешает измерениям красных кровяных телец, заставляя лейкоциты считаться эритроцитами).[91]

= Стеклянное предметное стекло, содержащее две камеры для жидкости, покрытое покровным стеклом
Микроскопическое изображение, показывающее многочисленные клетки, наложенные на сетку
Слева: модифицированный Fuchs-Rosenthal гемоцитометр. Справа: вид через микроскоп гемоцитометра. Встроенная сетка помогает отслеживать, какие ячейки были подсчитаны.

Красные и белые кровяные тельца и тромбоциты можно подсчитать с помощью гемоцитометр - предметное стекло микроскопа, содержащее камеру, в которой содержится определенный объем разбавленной крови. Камера гемоцитометра покрыта калиброванной сеткой для облегчения подсчета клеток. Клетки, видимые в сетке, подсчитываются и делятся на исследуемый объем крови, который определяется по количеству квадратов, подсчитанных на сетке, для получения концентрации клеток в образце.[45][92] Ручной подсчет клеток трудоемок и неточен по сравнению с автоматическими методами, поэтому они редко используются, за исключением лабораторий, у которых нет доступа к автоматическим анализаторам.[45][92] Для подсчета лейкоцитов образец разбавляется жидкостью, содержащей соединение, разлагающее эритроциты, например оксалат аммония, уксусная кислота, или же соляная кислота.[93] Иногда к разбавителю добавляют краситель, который выделяет ядра лейкоцитов, что упрощает их идентификацию. Ручной подсчет тромбоцитов выполняется аналогичным образом, хотя при некоторых методах эритроциты остаются нетронутыми. Используя фазово-контрастный микроскоп, а не оптический микроскоп, может облегчить идентификацию тромбоцитов.[94] Ручной подсчет эритроцитов выполняется редко, поскольку он неточен, и для оценки эритроцитов доступны другие методы, такие как гемоглобинометрия и ручной гематокрит; но если это необходимо, количество эритроцитов можно подсчитать в крови, разбавленной физиологическим раствором.[95]

Гемоглобин можно измерить вручную с помощью спектрофотометр или же колориметр. Чтобы измерить гемоглобин вручную, образец разбавляют с помощью реагентов, которые разрушают эритроциты и высвобождают гемоглобин. Другие химические вещества используются для преобразования разных типов гемоглобина в одну форму, что позволяет легко его измерить. Затем раствор помещается в мерную кювета и поглощение измеряется на определенной длине волны, которая зависит от типа используемого реагента. Эталонный стандарт, содержащий известное количество гемоглобина, используется для определения взаимосвязи между поглощением и концентрацией гемоглобина, что позволяет измерить уровень гемоглобина в образце.[96]

В сельских и экономически неблагополучных районах доступное тестирование ограничено доступом к оборудованию и персоналу. В первая помощь В центрах этих регионов тестирование может быть ограничено исследованием морфологии эритроцитов и ручным измерением гемоглобина, тогда как более сложные методы, такие как ручной подсчет и дифференциация клеток, а иногда и автоматический подсчет клеток, выполняются в районных лабораториях. Региональные и провинциальные больницы и академические центры обычно имеют доступ к автоматическим анализаторам. Если лабораторное оборудование недоступно, оценку концентрации гемоглобина можно получить, поместив каплю крови на стандартный тип впитывающей бумаги и сравнив ее с цветовой шкалой.[97]

Контроль качества

Дальнейшая информация: Лабораторный контроль качества

Автоматизированные анализаторы необходимо регулярно откалиброванный. Большинство производителей предоставляют консервированную кровь с определенными параметрами, и анализаторы настраиваются, если результаты выходят за установленные пороговые значения.[98] Чтобы результаты оставались точными, образцы для контроля качества, которые обычно предоставляются производителем прибора, проверяются не реже одного раза в день. Образцы составлены таким образом, чтобы обеспечить конкретные результаты, и лаборатории сравнивают их результаты с известными значениями, чтобы убедиться, что прибор работает должным образом.[99][100] Для лабораторий, не имеющих доступа к коммерческим материалам контроля качества, индийская регулирующая организация рекомендует анализировать образцы пациентов в двух экземплярах и сравнивать результаты.[101] А скользящая средняя Измерение, при котором средние результаты для образцов пациентов измеряются через определенные промежутки времени, может использоваться как дополнительный метод контроля качества. Если предположить, что характеристики популяции пациентов остаются примерно неизменными с течением времени, среднее значение должно оставаться постоянным; большие сдвиги в среднем значении могут указывать на проблемы с прибором.[99][100] В этом отношении особенно полезны значения MCHC.[102]

Помимо анализа внутренних контроль качества образцы с известными результатами, лаборатории могут получить внешняя оценка качества образцы из контролирующих организаций. Целью внутреннего контроля качества является обеспечение достоверности результатов анализатора. воспроизводимый В рамках данной лаборатории внешняя оценка качества подтверждает, что результаты, полученные в разных лабораториях, соответствуют друг другу и целевым значениям.[103] Ожидаемые результаты для образцов внешней оценки качества не сообщаются лаборатории.[104] Программы внешней оценки качества получили широкое распространение в Северной Америке и Западной Европе.[99] и лаборатории часто должны участвовать в этих программах для поддержания аккредитация.[105] Из-за логистических проблем лабораториям в районах с ограниченными ресурсами может быть сложно внедрить схемы внешней оценки качества.[106]

Включенные тесты

Тесты CBC измеряют количество тромбоцитов, красных и белых кровяных телец, а также значения гемоглобина и гематокрита. Показатели эритроцитов - MCV, MCH и MCHC - которые описывают размер эритроцитов и их содержание гемоглобина, сообщаются вместе с шириной распределения эритроцитов (RDW), которая измеряет степень вариации размеров эритроцитов. клетки. Может быть проведен дифференциальный анализ лейкоцитов, который подсчитывает различные типы лейкоцитов, и иногда включается подсчет незрелых эритроцитов (ретикулоцитов).[4][107]

Эритроциты, гемоглобин и гематокрит

Основные статьи: эритроцит, гемоглобин, гематокрит, и показатели эритроцитов
Общий анализ крови при микроцитарной анемии
АналитРезультатНормальный диапазон
Количество эритроцитов5,5 х 1012/ Л4.5–5.7
Количество белых клеток9,8 х 109/ Л4.0–10.0
Гемоглобин123 г / л133–167
Гематокрит0.420.35–0.53
MCV76 фл77–98
MCH22,4 пг26–33
MCHC293 г / л330–370
RDW14.5%10.3–15.3
Пример результатов CBC, показывающих низкий уровень гемоглобина, средний объем эритроцитов (MCV), средний гемоглобин эритроцитов (MCH) и среднее содержание гемоглобина в эритроцитах (MCHC). У человека была анемия. Причиной может быть недостаток железа или гемоглобинопатия.[108]

Красные кровяные тельца доставляют кислород от легкие к тканям и по возвращении переносят углекислый газ обратно в легкие, где он выдыхается. Эти функции опосредуются гемоглобином клеток.[109] Анализатор подсчитывает эритроциты, сообщая результат в единицах 106 клеток на микролитр крови (× 106/ мкл) или 1012 клеток на литр (× 1012/ L) и измеряет их средний размер, который называется средний объем ячейки и выражается в фемтолитры или кубические микрометры.[4] Умножая средний объем клеток на количество эритроцитов, можно получить гематокрит (HCT) или объем упакованных клеток (PCV), измерение процента крови, которая состоит из эритроцитов;[66] и когда гематокрит определяется напрямую, средний объем клеток может быть рассчитан на основе гематокрита и количества эритроцитов.[110][111] Гемоглобин, измеряемый после лизирования эритроцитов, обычно выражается в граммах на литр (г / л) или граммах на децилитр (г / дл).[112] Если предположить, что красные кровяные тельца в норме, существует постоянная взаимосвязь между гемоглобином и гематокритом: процент гематокрита примерно в три раза больше, чем значение гемоглобина в г / дл, плюс-минус три. Эти отношения, названные правило трех, можно использовать для подтверждения правильности результатов клинического анализа крови.[113]

Два других измерения рассчитываются на основе количества эритроцитов, концентрации гемоглобина и гематокрита: средний корпускулярный гемоглобин и средняя концентрация корпускулярного гемоглобина.[114][115] Эти параметры описывают содержание гемоглобина в каждом эритроците. MCH и MCHC могут сбивать с толку; по сути, MCH является мерой среднего количества гемоглобина на эритроцит. MCHC дает среднюю долю гемоглобина в клетках. MCH не принимает во внимание размер красных кровяных телец, тогда как MCHC делает.[116] В совокупности MCV, MCH и MCHC называются показатели эритроцитов.[114][115] Изменения этих показателей видны на мазке крови: аномально большие или маленькие красные кровяные тельца можно идентифицировать по размеру белых кровяных телец, а клетки с низкой концентрацией гемоглобина выглядят бледными.[117] Другой параметр рассчитывается из начальных измерений красных кровяных телец: ширина распределения красных кровяных телец или RDW, которая отражает степень вариации размеров клеток.[118]

См. Подпись.
Мазок крови от человека с железодефицитная анемия, отображающие характерную морфологию эритроцитов. Красные кровяные тельца аномально маленькие (микроцитоз ), имеют большие участки центральной бледности (гипохромия ) и сильно различаются по размеру (анизоцитоз ).

Аномально низкий уровень гемоглобина, гематокрита или количества эритроцитов указывает на анемию.[119] Анемия сама по себе не является диагнозом, но указывает на основное заболевание, влияющее на эритроциты человека.[88] Общие причины анемии включают потерю крови, выработку дефектных эритроцитов (неэффективные эритропоэз ), снижение выработки красных кровяных телец (недостаточный эритропоэз) и повышенное разрушение красных кровяных телец (гемолитическая анемия ).[120] Анемия снижает способность крови переносить кислород, вызывая такие симптомы, как усталость и одышка.[121] Если уровень гемоглобина падает ниже пороговых значений, зависящих от клинического состояния человека, может потребоваться переливание крови.[122]

Повышенное количество красных кровяных телец, которое обычно приводит к повышению гемоглобина и гематокрита, называется полицитемией.[примечание 4][126] Обезвоживание или использование мочегонные средства может вызвать «относительную» полицитемию из-за уменьшения количества плазмы по сравнению с эритроцитами. Истинное увеличение количества красных кровяных телец, называемое абсолютной полицитемией, может произойти, когда организм производит больше красных кровяных телец, чтобы компенсировать хронические заболевания. низкий уровень кислорода в таких условиях, как легкое или же сердечное заболевание, или когда у человека аномально высокий уровень эритропоэтин (EPO), гормон, стимулирующий выработку эритроцитов. В истинная полицитемия костный мозг производит эритроциты и другие клетки крови с чрезмерно высокой скоростью.[127]

Оценка показателей эритроцитов помогает определить причину анемии. Если MCV низкий, анемия называется микроцитарный, а анемия с высоким MCV называется макроцитарная анемия. Анемия с низким MCHC называется гипохромная анемия. Если анемия присутствует, но показатели эритроцитов в норме, анемией считается нормохромный и нормоцитарный.[117] Период, термин гиперхромия, ссылаясь на высокий MCHC, обычно не используется. Подъем MCHC выше верхнего контрольного значения случается редко, главным образом в таких условиях, как сфероцитоз, серповидноклеточная анемия и болезнь гемоглобина C.[115][128] Повышенный MCHC также может быть ложным результатом таких условий, как агглютинация красных кровяных телец (что вызывает ложное уменьшение количества эритроцитов, повышая MCHC)[129][130] или сильно повышенное количество липиды в крови (что вызывает ложное повышение результата гемоглобина).[128][131]

Микроцитарная анемия обычно связана с дефицитом железа, талассемией и анемия хронического заболевания, а макроцитарная анемия связана с алкоголизм, фолиевая кислота и Дефицит B12, употребление некоторых лекарств и некоторые заболевания костного мозга. Острая кровопотеря, гемолитическая анемия, нарушения костного мозга и различные хронические заболевания могут привести к анемии с нормоцитарной картиной крови.[115][132] MCV служит дополнительной цели в лабораторном контроле качества. Он относительно стабилен во времени по сравнению с другими параметрами общего анализа крови, поэтому большое изменение MCV может указывать на то, что образец был взят не у того пациента.[133] Низкий RDW не имеет клинического значения, но повышенный RDW представляет собой увеличенное изменение размера эритроцитов, состояние, известное как анизоцитоз.[118] Анизоцитоз часто встречается при пищевых анемиях, таких как железодефицитная анемия и анемия из-за дефицита витамина B12 или фолиевой кислоты, в то время как люди с талассемией могут иметь нормальную RDW.[118] На основе результатов клинического анализа крови могут быть предприняты дальнейшие шаги по исследованию анемии, например: ферритин тест для подтверждения наличия дефицита железа, или электрофорез гемоглобина диагностировать гемоглобинопатия такие как талассемия или серповидноклеточная анемия.[134]

белые кровяные клетки

Основные статьи: лейкоцит и дифференциал лейкоцитов
Общий анализ крови при хроническом миелоидном лейкозе
АналитРезультат
Количество белых клеток98.8 х 109/ Л
Гемоглобин116 г / л
Гематокрит0,349 л / л
MCV89,0 фл
Количество тромбоцитов1070 х 109/ Л
АналитРезультат
Нейтрофилов48%
Лимфоциты3%
Моноциты4%
Эозинофилы3%
Базофилы21%
Кольцевые нейтрофилы8%
Метамиелоциты3%
Миелоциты8%
Бластные клетки2%
Количество лейкоцитов и тромбоцитов заметно увеличено, присутствует анемия. Дифференциальный счет показывает базофилия и наличие группа нейтрофилов незрелые гранулоциты и бластные клетки.[135]

Лейкоциты защищают от инфекций и участвуют в воспалительная реакция.[136] Высокое количество лейкоцитов, называемое лейкоцитозом, часто возникает при инфекциях, воспалениях и состояниях физиологический стресс. Это также может быть вызвано заболеваниями, которые связаны с аномальным образованием клеток крови, такими как миелопролиферативные и лимфопролиферативные заболевания.[137] Снижение количества лейкоцитов, называемое лейкопения, может привести к повышенному риску заражения инфекциями,[138] и встречается при лечении, таком как химиотерапия и лучевая терапия, а также при многих состояниях, которые подавляют производство клеток крови.[139] Сепсис связан как с лейкоцитозом, так и с лейкопенией.[140] Общее количество лейкоцитов обычно указывается в клетках на микролитр крови (/ мкл) или 109 клеток на литр (× 109/ Л).[4]

В дифференциале лейкоцитов идентифицируются и подсчитываются различные типы лейкоцитов. Результаты представлены в процентах и ​​в абсолютных числах на единицу объема. Пять типов белых кровяных телец -нейтрофилы, лимфоциты, моноциты, эозинофилы, и базофилы - обычно измеряются.[141] Некоторые инструменты сообщают о количестве незрелых гранулоцитов, которое представляет собой классификацию, состоящую из предшественников нейтрофилов; конкретно, промиелоциты, миелоциты и метамиелоциты.[примечание 5][144] Сообщаются другие типы ячеек, если они указаны в ручном дифференциале.[145]

Дифференциальные результаты полезны при диагностике и мониторинге многих заболеваний. Например, повышенное количество нейтрофилов (нейтрофилия ) связано с бактериальной инфекцией, воспалением и миелопролиферативными заболеваниями,[146][147] в то время как уменьшенное количество (нейтропения ) может возникать у людей, которые проходят химиотерапию или принимают определенные лекарства, или у которых есть заболевания, поражающие костный мозг.[148][149] Нейтропения также может быть вызвана некоторыми врожденные нарушения и может возникать временно после вирусных или бактериальных инфекций у детей.[150] Людей с тяжелой нейтропенией и клиническими признаками инфекции лечат антибиотиками, чтобы предотвратить потенциально опасное для жизни заболевание.[151]

См. Подпись.
Фильм крови человека с хронический миелоидный лейкоз: видно много незрелых и аномальных лейкоцитов.

Увеличение количества группа нейтрофилов - молодые нейтрофилы, у которых отсутствуют сегментированные ядра, - или незрелые гранулоциты, называемые левый "шифт и возникает при сепсисе и некоторых заболеваниях крови, но нормален при беременности.[152][153] Повышенное количество лимфоцитов (лимфоцитоз ) связан с вирусная инфекция[6] и лимфопролиферативные расстройства подобно хронический лимфолейкоз;[154] повышенное количество моноцитов (моноцитоз ) связаны с хроническими воспалительными состояниями;[155] и количество эозинофилов часто увеличивается (эозинофилия ) при паразитарных инфекциях и аллергических состояниях.[156] Повышенное количество базофилов, называемых базофилия, может возникать при миелопролиферативных заболеваниях, таких как хронический миелоидный лейкоз и истинная полицитемия.[147] Наличие некоторых типов аномальных клеток, таких как бластные клетки или лимфоциты с неопластический особенности, наводит на мысль о гематологическая злокачественная опухоль.[89][157]

Тромбоциты

Основные статьи: Тромбоцит и средний объем тромбоцитов
См. Подпись.
Фильм крови эссенциальная тромбоцитемия. Тромбоциты выглядят как маленькие фиолетовые структуры.

Тромбоциты играют важную роль в свертывании крови. Когда стена кровеносный сосуд поврежден, тромбоциты прилипают к открытой поверхности в месте повреждения и закрывают щель. Одновременное включение каскад коагуляции приводит к формированию фибрин, который укрепляет пробку тромбоцитов, создавая стабильную сгусток.[158] Низкое количество тромбоцитов, известное как тромбоцитопения, может вызвать сильное кровотечение.[159] Это может произойти у людей, которые проходят лечение, подавляющее костный мозг, такое как химиотерапия или лучевая терапия, или принимающие определенные лекарства, такие как гепарин, которые могут побудить иммунную систему разрушать тромбоциты. Тромбоцитопения является признаком многих заболеваний крови, таких как острый лейкоз и апластическая анемия, а также некоторые аутоиммунные заболевания.[160][161] Если количество тромбоцитов очень низкое, может быть выполнено переливание тромбоцитов.[162] Тромбоцитоз, что означает высокое количество тромбоцитов, может возникать при воспалении или травме,[163] а также при дефиците железа,[164] и количество тромбоцитов может достигать исключительно высокого уровня у людей с эссенциальная тромбоцитемия, редкое заболевание крови.[163] Количество тромбоцитов может быть указано в единицах клеток на микролитр крови (/ мкл),[165] 103 клеток на микролитр (× 103/ мкл), или 109 клеток на литр (× 109/ Л).[4]

Средний объем тромбоцитов (MPV) измеряет средний размер тромбоцитов в фемтолитрах. Это может помочь в определении причины тромбоцитопении; повышенный MPV может возникнуть, когда молодые тромбоциты попадают в кровоток, чтобы компенсировать повышенное разрушение тромбоцитов, в то время как снижение продукции тромбоцитов из-за дисфункции костного мозга может привести к низкому MPV. MPV также полезен для дифференциации врожденных заболеваний, вызывающих тромбоцитопению.[118][166] Некоторые анализаторы сообщают о фракции незрелых тромбоцитов (IPF) или сетчатом количестве тромбоцитов и предоставляют информацию о скорости производства тромбоцитов путем измерения количества незрелых тромбоцитов в крови.[167]

Другие тесты

Количество ретикулоцитов

Основная статья: Ретикулоцит
Микроскопическое изображение красных кровяных телец, окрашенных в синий цвет.
Эритроциты, окрашенные новый метиленовый синий: клетки, содержащие синие структуры, являются ретикулоцитами.

Ретикулоциты - незрелые эритроциты, которые, в отличие от зрелых клеток, содержат РНК. Подсчет ретикулоцитов иногда выполняется как часть общего анализа крови, как правило, для выяснения причины анемии человека или оценки его реакции на лечение. Анемия с высоким содержанием ретикулоцитов может указывать на то, что костный мозг производит эритроциты с большей скоростью, чтобы компенсировать кровопотерю или гемолиз.[74] в то время как анемия с низким количеством ретикулоцитов может указывать на то, что у человека есть состояние, которое снижает способность организма вырабатывать эритроциты.[168] Когда людям с пищевой анемией дают пищевые добавки, увеличение количества ретикулоцитов указывает на то, что их организм реагирует на лечение, производя больше красных кровяных телец.[169] Гематологические анализаторы выполняют подсчет ретикулоцитов, окрашивая эритроциты красителем, который связывается с РНК, и измеряют количество ретикулоцитов с помощью светорассеяния или флуоресцентного анализа. Тест можно провести вручную, окрашивая кровь новый метиленовый синий и подсчет процента красных кровяных телец, содержащих РНК, под микроскопом. Количество ретикулоцитов выражается как абсолютное число.[168] или в процентах красных кровяных телец.[170]

Некоторые инструменты измеряют среднее количество гемоглобина в каждом ретикулоците; параметр, который был изучен как индикатор дефицита железа у людей, у которых есть условия, мешающие стандартным тестам.[171] Фракция незрелых ретикулоцитов (IRF) - это еще одно измерение, производимое некоторыми анализаторами, которое количественно определяет зрелость ретикулоцитов: менее зрелые клетки содержат больше РНК и, таким образом, производят более сильный флуоресцентный сигнал. Эта информация может быть полезна при диагностике анемии и оценке выработки эритроцитов после лечения анемии или трансплантация костного мозга.[172]

Ядерные эритроциты

Основная статья: Ядерные красные кровяные тельца

При их образовании в костном мозге и в печень и селезенка у плодов,[173] красные кровяные тельца содержат ядро ​​клетки, которое обычно отсутствует в зрелых клетках, циркулирующих в кровотоке.[174] При обнаружении наличие ядерных эритроцитов, особенно у детей и взрослых, указывает на повышенную потребность в эритроцитах, которая может быть вызвана кровотечением, некоторыми видами рака и анемией.[118] Большинство анализаторов могут обнаруживать эти клетки как часть дифференциального подсчета клеток. Большое количество ядерных эритроцитов может вызвать ложно высокое количество лейкоцитов, которое требует корректировки.[175]

Прочие параметры

Современные гематологические анализаторы позволяют производить новые измерения клеток крови, которые показали диагностическую значимость в научных исследованиях, но еще не нашли широкого клинического применения.[171] Например, некоторые типы анализаторов производят координировать показания, указывающие размер и положение каждого кластера лейкоцитов. Эти параметры (называемые данными о населении клеток)[176] были изучены как потенциальные маркеры заболеваний крови, бактериальных инфекций и малярии. Анализаторы, которые используют окрашивание миелопероксидазой для получения дифференциального подсчета, могут измерять экспрессию фермента лейкоцитами, которая изменяется при различных заболеваниях.[75] Некоторые инструменты могут сообщать процент гипохромных эритроцитов в дополнение к сообщению среднего значения MCHC или обеспечивать подсчет фрагментированных эритроцитов (шистоциты ),[171] которые возникают при некоторых типах гемолитической анемии.[177] Поскольку эти параметры часто относятся к конкретным маркам анализаторов, лабораториям сложно интерпретировать и сравнивать результаты.[171]

Референсные диапазоны

Смотрите также: Референсные диапазоны для анализов крови
Пример контрольных диапазонов полного анализа крови[178]
ТестЕдиницыВзрослыйПедиатрический

(4–7 лет)

Новорожденный

(0–1 день)

WBC× 109/ Л3.6–10.65.0–17.09.0–37.0
РБК× 1012/ Л
  • М: 4.20–6.00
  • F: 3.80–5.20
4.00–5.204.10–6.10
HGBг / л
  • М: 135–180
  • Ф: 120–150
102–152165–215
HCTЛ / л
  • M: 0,40–0,54
  • Ж: 0,35–0,49
0.36–0.460.48–0.68
MCVfL80–10078–9495–125
MCHpg26–3423–3130–42
MCHCг / л320–360320–360300–340
RDW%11.5–14.511.5–14.5повышенный[примечание 6]
PLT× 109/ Л150–450150–450150–450
Нейтрофилов× 109/ Л1.7–7.51.5–11.03.7–30.0
Лимфоциты× 109/ Л1.0–3.21.5–11.11.6–14.1
Моноциты× 109/ Л0.1–1.30.1–1.90.1–4.4
Эозинофилы× 109/ Л0.0–0.30.0–0.70.0–1.5
Базофилы× 109/ Л0.0–0.20.0–0.30.0–0.7

Полный анализ крови интерпретируется путем сравнения выходных данных с контрольными диапазонами, которые представляют результаты, полученные у 95% практически здоровых людей.[35] На основе статистических нормальное распределение, диапазоны протестированных выборок зависят от пола и возраста. В среднем у взрослых женщин показатели гемоглобина, гематокрита и количества эритроцитов ниже, чем у мужчин; хотя разница уменьшается, но сохраняется после менопауза.[179]

Кровь новорожденных очень отличается от крови детей более старшего возраста, которая также отличается от крови взрослых. Гемоглобин, гематокрит и количество красных кровяных телец у новорожденных чрезвычайно высоки, чтобы компенсировать низкий уровень кислорода в матке, и высокую долю гемоглобин плода, который менее эффективен для доставки кислорода к тканям, чем зрелые формы гемоглобина внутри их красных кровяных телец.[180][181] MCV также увеличивается, и количество лейкоцитов повышается с преобладанием нейтрофилов.[180][182] Количество красных кровяных телец и связанные с ними значения начинают снижаться вскоре после рождения, достигая самого низкого значения примерно в двухмесячном возрасте, а затем увеличиваясь.[183][184] Красные кровяные тельца у младенцев и детей старшего возраста меньше, с более низким MCH, чем у взрослых. В дифференциале белых кровяных телец у детей количество лимфоцитов часто превышает количество нейтрофилов, тогда как у взрослых нейтрофилы преобладают.[180]

Другие различия между популяциями могут повлиять на контрольные диапазоны: например, люди, живущие на больших высотах, имеют более высокие показатели гемоглобина, гематокрита и эритроцитов, а у людей африканского происхождения в среднем более низкое количество лейкоцитов.[185] Тип анализатора, используемого для выполнения CBC, также влияет на контрольные диапазоны. Поэтому контрольные диапазоны устанавливаются отдельными лабораториями на основе их собственных групп пациентов и оборудования.[186][187]

Ограничения

Некоторые медицинские условия или проблемы с анализом крови могут привести к неточным результатам. Если образец заметно сгустился, что может быть вызвано плохим флеботомия метод, он не подходит для тестирования, потому что количество тромбоцитов будет ложно снижено, а другие результаты могут быть ненормальными.[188][189] Образцы, хранящиеся при комнатной температуре в течение нескольких часов, могут давать ложно завышенные значения MCV,[190] потому что красные кровяные тельца набухают, поглощая воду из плазмы; а результаты дифференциальной диагностики тромбоцитов и лейкоцитов могут быть неточными в старых образцах, поскольку клетки со временем разлагаются.[91]

Микрофотография мазка крови, показывающая скопления красных кровяных телец
Агглютинация красных кровяных телец: на мазке крови видны сгустки эритроцитов

Образцы взяты у лиц с очень высоким уровнем билирубин или же липиды в их плазме (называемой желтушной пробой или липемической пробой соответственно)[191] могут показывать ложно высокие значения гемоглобина, поскольку эти вещества изменяют цвет и непрозрачность образца, что мешает измерению гемоглобина.[192] Этот эффект можно смягчить, заменив плазму физиологическим раствором.[91]

Некоторые люди производят антитело это заставляет их тромбоциты образовывать сгустки, когда их кровь забирается в пробирки, содержащие ЭДТА, антикоагулянт, обычно используемый для сбора образцов общего анализа крови. Сгустки тромбоцитов могут быть подсчитаны автоматическими анализаторами как отдельные тромбоциты, что приводит к ложному снижению количества тромбоцитов. Этого можно избежать, используя альтернативный антикоагулянт, такой как цитрат натрия или же гепарин. Частичное свертывание образца из-за затрудненного взятия крови - еще одна причина ложно низкого количества тромбоцитов.[193]

Еще одно обусловленное антителами состояние, которое может повлиять на результаты общего анализа крови, - это агглютинация красных кровяных телец. Это явление приводит к слипанию красных кровяных телец из-за связывания антител с поверхностью клетки.[194] Агрегаты эритроцитов подсчитываются анализатором как отдельные клетки, что приводит к заметному снижению количества эритроцитов и гематокрита, а также к значительному увеличению MCV и MCHC.[53] Часто эти антитела активны только при комнатной температуре (в этом случае их называют холодные агглютинины ), и агглютинацию можно обратить вспять, нагревая образец до 37 ° C (99 ° F). Образцы от людей с теплая аутоиммунная гемолитическая анемия может проявляться агглютинация эритроцитов, которая не рассасывается при нагревании.[130]

В то время как бластные клетки и лимфомы можно идентифицировать с помощью ручного дифференциала, микроскопическое исследование не может надежно определить клетки. гемопоэтическая линия. Эта информация часто необходима для диагностики рака крови. После выявления аномальных клеток используются дополнительные методы, такие как иммунофенотипирование с помощью проточной цитометрии можно использовать для идентификации маркеры которые предоставляют дополнительную информацию о ячейках.[195][196]

История

Черный кожаный футляр с содержимым: свечой и карточками цветов.
Первый гемоглобинометр: образцы крови сравнивали с цветной диаграммой эталонных стандартов для определения уровня гемоглобина.[197]

До того, как были введены автоматические счетчики клеток, полный анализ крови проводился вручную: подсчет лейкоцитов и эритроцитов, а также тромбоцитов проводился с помощью микроскопов.[198] Первым, кто опубликовал микроскопические наблюдения за клетками крови, был Антони ван Левенгук,[199] который сообщил о появлении красных клеток в письме 1674 г. Труды Лондонского королевского общества;[200] Ян Сваммердам описал эритроциты несколькими годами ранее, но тогда не опубликовал свои выводы. На протяжении XVIII и XIX веков усовершенствования в технологии микроскопов, такие как ахроматические линзы разрешены лейкоциты и тромбоциты для подсчета в неокрашенных образцах.[201]

Физиолог Карл Виерордт приписывают проведение первого анализа крови.[8][202][203] Его методика, опубликованная в 1852 году, заключалась в аспирации тщательно отмеренного объема крови в капиллярную трубку и нанесении ее на предметное стекло микроскопа, покрытое Яичный белок. После высыхания крови он пересчитал каждую клетку на предметном стекле; этот процесс может занять более трех часов.[204] Гемоцитометр, представленный в 1874 г. Луи-Шарль Малассес, упростил микроскопический подсчет клеток крови.[205] Гемоцитометр Малассеза состоял из предметного стекла микроскопа, содержащего сплющенную капиллярную трубку. Разбавленная кровь вводилась в капиллярную камеру с помощью резиновой трубки, прикрепленной к одному концу, и окуляр с масштабированной сеткой, прикрепленной к микроскопу, позволяя микроскописту подсчитывать количество клеток в объеме крови. В 1877 г. Уильям Гауэрс изобрели гемоцитометр со встроенной счетной сеткой, избавив от необходимости производить специально калиброванные окуляры для каждого микроскопа.[206]

Черно-белый портрет Дмитрия Леонидовича Романовского
Дмитрий Леонидович Романовский изобрел окраску по Романовскому.

В 1870-х гг. Пол Эрлих разработал метод окрашивания с использованием комбинации кислотного и основного красителя, который может различать разные типы белых кровяных телец и позволять эритроцитам морфология быть исследованным.[201] Дмитрий Леонидович Романовский усовершенствовали эту технику в 1890-х годах, используя смесь эозин и в возрасте метиленовый синий для получения широкого диапазона оттенков, отсутствующих при использовании одного из красителей. Это стало основой для окрашивания по Романовскому, техники, которая до сих пор используется для окрашивания мазков крови для ручного просмотра.[207]

Первые методы измерения гемоглобина были разработаны в конце 19 века и включали визуальное сравнение цвета разбавленной крови с известным стандартом.[203] Попытки автоматизировать этот процесс с помощью спектрофотометрии и колориметрия были ограничены тем фактом, что гемоглобин присутствует в крови во многих различных формах, а это означает, что его нельзя измерить одним длина волны. В 1920 году был внедрен метод преобразования различных форм гемоглобина в одну стабильную форму (цианметгемоглобин или гемиглобинцианид), позволяющий автоматически измерять уровни гемоглобина. Метод цианметгемоглобина остается эталонным методом измерения гемоглобина и до сих пор используется во многих автоматических гематологических анализаторах.[57][208][209]

Максвелл Винтроб приписывают изобретение теста на гематокрит.[66][210] В 1929 г. он защитил кандидатскую диссертацию в Университет Тулейна для определения нормальных диапазонов параметров эритроцитов и изобрел метод, известный как гематокрит Винтроба. Измерения гематокрита ранее были описаны в литературе, но метод Винтроба отличался тем, что в нем использовалась большая трубка со встроенной шкалой, которая могла производиться серийно с точными спецификациями. Фракцию эритроцитов в пробирке измеряли после центрифугирование для определения гематокрита. Изобретение воспроизводимого метода определения значений гематокрита позволило Винтробе определить показатели эритроцитов.[203]

Сложная трубка и колба, прикрепленная к измерительной станции
Модель A Coulter counter

Исследования в области автоматического подсчета клеток начались в начале 20 века.[209] Метод, разработанный в 1928 году, использовал количество света переданный через образец разбавленной крови, измеренный фотометрией, для оценки количества эритроцитов, но это оказалось неточным для образцов с аномальными эритроцитами.[8] Другие попытки, предпринятые в 1930-х и 1940-х годах, были связаны с фотоэлектрическими детекторами, прикрепленными к микроскопам, которые подсчитывали клетки по мере их сканирования; эти методы оказались безуспешными.[209] В конце 1940-х гг. Уоллес Х. Коултер, мотивированные потребностью в улучшенных методах подсчета эритроцитов после бомбардировка Хиросимы и Нагасаки,[211] попытался улучшить методы подсчета фотоэлементов.[примечание 7] Его исследованиям помог его брат Джозеф Р. Коултер в подвальной лаборатории в Чикаго.[60] Их результаты с использованием фотоэлектрических методов были разочаровывающими, и в 1948 году, после прочтения статьи, связывающей проводимость крови с концентрацией эритроцитов, Уоллес разработал принцип Коултера - теорию о том, что клетка, взвешенная в проводящей среде, генерирует падение тока пропорционально до его размера, когда он проходит через отверстие.[211]

В октябре того же года Уоллес построил счетчик, чтобы продемонстрировать этот принцип. Из-за финансовых ограничений отверстие было сделано путем прожигания отверстия в куске целлофана от сигаретной пачки.[60][211] Уоллес подал патент на эту технику в 1949 году, а в 1951 году подал заявку на Управление военно-морских исследований для финансирования развития Счетчик сошников.[211] Заявка на патент Уоллеса была предоставлена ​​в 1953 году, и после улучшения диафрагмы и введения ртути манометр чтобы обеспечить точный контроль над размером выборки, братья основали в 1958 году компанию Coulter Electronics Inc., чтобы продавать свои счетчики. Изначально прибор был разработан для подсчета эритроцитов, но с более поздними модификациями он оказался эффективным для подсчета лейкоцитов.[60] Счетчики Коултера получили широкое распространение в медицинских лабораториях.[209]

Первым анализатором, способным производить подсчет нескольких клеток одновременно, был Техникон SMA 4A-7A, выпущенный в 1965 году. Это достигается путем разделения образцов крови на два канала: один для подсчета эритроцитов и лейкоцитов, а другой - для измерения гемоглобина. Однако инструмент оказался ненадежным и сложным в обслуживании. В 1968 году был выпущен анализатор Coulter Model S, получивший широкое распространение. Как и в приборе Technicon, в нем использовались две разные реакционные камеры, одна из которых использовалась для подсчета эритроцитов, а другая - для подсчета лейкоцитов и определения гемоглобина.Модель S также определила средний объем клеток с помощью измерений импеданса, что позволило определить показатели эритроцитов и гематокрит. Автоматический подсчет тромбоцитов был введен в 1970 году с прибором Technicon Hemalog-8 и был принят на анализаторах серии S Plus компании Coulter в 1980 году.[212]

После того, как основной подсчет клеток был автоматизирован, дифференциация лейкоцитов оставалась сложной задачей. На протяжении 1970-х годов исследователи изучали два метода автоматизации дифференциального подсчета: цифровая обработка изображений и проточная цитометрия. Использование технологий, разработанных в 1950-х и 60-х годах, для автоматизации чтения Пап-мазки, выпущено несколько моделей анализаторов обработки изображений.[213] Эти инструменты будут сканировать окрашенный мазок крови, чтобы найти ядра клеток, а затем делать снимок клетки с более высоким разрешением, чтобы проанализировать его. денситометрия.[214] Они были дорогими, медленными и мало помогали снизить рабочую нагрузку в лаборатории, потому что они по-прежнему требовали подготовки и окрашивания мазков крови, поэтому системы на основе проточной цитометрии стали более популярными.[215][216] и к 1990 году в США и Западной Европе не было коммерческих анализаторов цифровых изображений.[217] Эти методы возродились в 2000-х годах с появлением более совершенных платформ анализа изображений, использующих искусственные нейронные сети.[218][219][220]

Ранние устройства проточной цитометрии испускали лучи света на клетки с определенной длиной волны и измеряли результирующую оптическую плотность, флуоресценцию или светорассеяние, собирая информацию об особенностях клеток и позволяя клеточному содержимому, например, ДНК подлежат количественной оценке.[221] Один из таких инструментов - Rapid Cell Spectrophotometer, разработанный Луи Каментски в 1965 году для автоматизации цитологии шейки матки - мог генерировать диаграммы рассеяния клеток крови с использованием методов цитохимического окрашивания. Леонард Орнштейн, который помогал разработать систему окрашивания на спектрофотометре Rapid Cell Spectrophotometer, и его коллеги позже создали первый коммерческий проточно-цитометрический дифференциальный анализатор лейкоцитов Hemalog D.[222][223] Представлен в 1974 г.[224][225] в этом анализаторе использовалось рассеяние света, поглощение и окрашивание клеток для определения пяти нормальных типов лейкоцитов в дополнение к «крупным неидентифицированным клеткам», классификация, которая обычно состояла из атипичные лимфоциты или бластные клетки. Hemalog D мог подсчитывать 10 000 ячеек за один проход, что является заметным улучшением по сравнению с ручным дифференциалом.[223][226] В 1981 году компания Technicon объединила Hemalog D с анализатором Hemalog-8, чтобы создать Technicon H6000, первый комбинированный анализатор полного анализа крови и дифференциального анализа. Этот анализатор не пользовался популярностью в гематологических лабораториях, потому что он был трудоемким в эксплуатации, но в конце 1980-х - начале 1990-х аналогичные системы широко производились другими производителями, такими как Sysmex, Эбботт, Рош и Бекман Коултер.[227]

Примечания

  1. ^ Хотя тромбоциты обычно называют таковыми, технически они не являются клетками: они представляют собой фрагменты клеток, образованные из цитоплазма из мегакариоциты в костном мозге.[6]
  2. ^ Данные, используемые для построения контрольных диапазонов, обычно получают от «нормальных» субъектов, но у этих людей может быть бессимптомное заболевание.[34]
  3. ^ В самом широком смысле термин проточной цитометрии относится к любому измерению свойств отдельных ячеек в потоке жидкости,[49][50] и в этом отношении все гематологические анализаторы (кроме тех, которые используют цифровую обработку изображений) являются проточными цитометрами. Однако этот термин обычно используется в отношении методов рассеяния света и флуоресценции, особенно тех, которые включают идентификацию клеток с использованием меченых антител, которые связываются с маркерами клеточной поверхности (иммунофенотипирование ).[49][51]
  4. ^ Это не всегда так. Например, при некоторых типах талассемии высокое количество эритроцитов происходит вместе с низким или нормальным гемоглобином, поскольку эритроциты очень маленькие.[123][124] В Индекс Ментцера, который сравнивает MCV с количеством эритроцитов, может использоваться для различения железодефицитной анемии и талассемии.[125]
  5. ^ Автоматические инструменты группируют эти три типа клеток вместе по классификации «незрелых гранулоцитов».[142] но они учитываются отдельно в ручном дифференциале.[143]
  6. ^ RDW сильно повышается при рождении и постепенно снижается примерно до шести месяцев.[178]
  7. ^ Апокрифическая история гласит, что Уоллес изобрел счетчик Коултера для изучения частиц в красках, используемых на ВМС США корабли; другие аккаунты утверждают, что он был первоначально разработан во время Вторая мировая война посчитать планктон. Однако Уоллес никогда не работал на военно-морской флот, и в его ранних работах об устройстве говорится, что оно впервые было использовано для анализа крови. История с краской в ​​конечном итоге была изъята из документов, подготовленных Фондом Уоллеса Х. Култера.[211]

Рекомендации

  1. ^ Tefferi, A; Хэнсон, Калифорния; Внутри, DJ (2005). «Как интерпретировать и проводить отклонение общего количества клеток крови у взрослых». Труды клиники Мэйо. 80 (7): 923–936. Дои:10.4065/80.7.923. ISSN  0025-6196. PMID  16212155.
  2. ^ а б HealthDirect (август 2018 г.). «Полный анализ крови». HealthDirect.gov.au. В архиве из оригинала 2 апреля 2019 г.. Получено 8 сентября 2020.
  3. ^ «Анализы крови: Хронический лимфолейкоз (ХЛЛ)». Cancer Research UK. 18 сентября 2020. В архиве из оригинала 23 октября 2020 г.. Получено 23 октября 2020.
  4. ^ а б c d е ж Американская ассоциация клинической химии (12 августа 2020 г.). «Полный анализ крови (СВС)». Лабораторные тесты онлайн. В архиве с оригинала 18 августа 2020 г.. Получено 8 сентября 2020.
  5. ^ а б c Смок, KJ. Глава 1 в Greer, JP и другие, изд. (2018), с. «Преимущества и источники ошибок автоматизированной гематологии».
  6. ^ а б Turgeon, ML (2016). п. 309.
  7. ^ Харменнинг, DM (2009). С. 2–3.
  8. ^ а б c Зеленый, R; Wachsmann-Hogiu, S (2015). «Развитие, история и будущее автоматических счетчиков клеток». Клиники лабораторной медицины. 35 (1): 1–10. Дои:10.1016 / j.cll.2014.11.003. ISSN  0272-2712. PMID  25676368.
  9. ^ а б Кеохан, E и другие. (2015). п. 244.
  10. ^ Лич, М. (2014). «Интерпретация общего анализа крови при системном заболевании - руководство для врача». Журнал Королевского колледжа врачей Эдинбурга. 44 (1): 36–41. Дои:10.4997 / JRCPE.2014.109. ISSN  1478-2715. PMID  24995446.
  11. ^ Маршалл, WJ и другие. (2014). п. 497.
  12. ^ а б c Ван Леувен, AM; Блад, ML (2019). п. 377.
  13. ^ Левандровски, К и другие. (2016). п. 96.
  14. ^ Американская ассоциация банков крови (24 апреля 2014 г.). «Пять вещей, которые должны задать вопросы врачам и пациентам». Мудрый выбор: инициатива Фонд ABIM. Американская ассоциация банков крови. Архивировано из оригинал 24 сентября 2014 г.. Получено 12 июля 2020.
  15. ^ а б Левандровски, К и другие. (2016). п. 97.
  16. ^ Хартман, CJ; Кавусси, Л. Р. (2017). С. 4–5.
  17. ^ Деван, М (2016). «Снижение ненужного послеоперационного анализа крови в педиатрическом отделении интенсивной терапии». Журнал Permanente. Дои:10.7812 / TPP / 16-051. ISSN  1552-5767. ЧВК  5283785. PMID  28241909.
  18. ^ Стены, R и другие. (2017). п. 130.
  19. ^ Стены, R и другие. (2017). п. 219.
  20. ^ Стены, R и другие. (2017). п. 199.
  21. ^ Стены, R и другие. (2017). п. 1464.
  22. ^ Мур, Э. и другие. (2017). п. 162.
  23. ^ Льюис, SL и другие. (2015). п. 280.
  24. ^ Wiciński, M; Венклевич, ММ (2018). «Клозапин-индуцированный агранулоцитоз / гранулоцитопения». Текущее мнение в гематологии. 25 (1): 22–28. Дои:10.1097 / MOH.0000000000000391. ISSN  1065-6251. PMID  28984748.
  25. ^ Fatemi, SH; Клейтон, П.Дж. (2016). п. 666.
  26. ^ Дули, ЭК; Ринглер, Р. (2012). С. 20–21.
  27. ^ Кеохан, E и другие. (2015). С. 834–835.
  28. ^ Шафермейер, RW и другие. (2018). С. 467–468.
  29. ^ Смок, KJ. Глава 1 в Greer, JP и другие, изд. (2018), с. "Вступление".
  30. ^ а б Каушанский, К и другие. (2015). п. 11.
  31. ^ Каушанский, К и другие. (2015). п. 43.
  32. ^ Каушанский, К и другие. (2015). С. 42–44.
  33. ^ Макферсон, РА; Пинкус, MR (2017). п. 574.
  34. ^ Bain, BJ и другие. (2017). п. 8.
  35. ^ а б Bain, BJ и другие. (2017). п. 10.
  36. ^ Bain, BJ (2015). п. 213.
  37. ^ Кеохан, E и другие. (2015). п. 245.
  38. ^ а б Левандровски, К и другие. (2016). С. 96–97.
  39. ^ «Стандартные предоперационные тесты для плановой хирургии (NG45)». Национальный институт здравоохранения и передового опыта. 5 апреля 2016. В архиве из оригинала 28 июля 2020 г.. Получено 8 сентября 2020.
  40. ^ Киркхэм, КР и другие. (2016). п. 805.
  41. ^ Смок, KJ. Глава 1 в Greer, JP и другие, изд. (2018), с. «Коллекция образцов».
  42. ^ Кеохан, E и другие. (2015). п. 28.
  43. ^ Bain, BJ и другие. (2017). п. 1.
  44. ^ Смок, KJ. Глава 1 в Greer, JP и другие, изд. (2018), с. «Число клеток», «Объем эритроцитов (гематокрит)», «Дифференциалы лейкоцитов».
  45. ^ а б c d Bain, BJ и другие. (2017). С. 551–555.
  46. ^ Bain, BJ (2015). п. 29.
  47. ^ Дасгупта, А; Сепульведа, JL (2013). п. 305.
  48. ^ а б D’Souza, C; Бриггс, К; Мачин, SJ (2015). «Тромбоциты: немногие, молодые и активные». Клиники лабораторной медицины. 35 (1): 123–131. Дои:10.1016 / j.cll.2014.11.002. ISSN  0272-2712. PMID  25676376.
  49. ^ а б c Коттке-Марчант, К; Дэвис, Б. (2012). п. 8.
  50. ^ Шапиро, HM (2003). п. 1.
  51. ^ Бакке, AC (2001). «Принципы проточной цитометрии». Лабораторная медицина. 32 (4): 207–211. Дои:10.1309 / 2H43-5EC2-K22U-YC6T. ISSN  1943-7730.
  52. ^ Каушанский, К и другие. (2015). п. 12.
  53. ^ а б Bain, BJ и другие. (2017). С. 32–33.
  54. ^ Макферсон, РА; Пинкус, MR (2017). п. 44.
  55. ^ Bain, BJ (2015). С. 29–30.
  56. ^ Уайтхед, Р. Д.; Mei, Z; Мапанго, C; Джеффердс, МЕД (август 2019 г.). «Методы и анализаторы для измерения гемоглобина в клинических лабораториях и полевых условиях». Летопись Нью-Йоркской академии наук. 1450 (1): 147–171. Дои:10.1111 / няс.14124. ЧВК  6709845. PMID  31162693.
  57. ^ а б Смок, KJ. Глава 1 в Greer, JP и другие, изд. (2018), с. «Концентрация гемоглобина».
  58. ^ а б Кеохан, E и другие. (2015). п. 208.
  59. ^ Bain, BJ (2015). С. 30–31.
  60. ^ а б c d Грэм, доктор медицины (2003). «Принцип Коултера: основа отрасли». Журнал ассоциации лабораторной автоматизации. 8 (6): 72–81. Дои:10.1016 / S1535-5535 (03) 00023-6. ISSN  1535-5535.
  61. ^ Кеохан, E и другие. (2015). С. 208–209.
  62. ^ а б Bain, BJ и другие. (2017). п. 32.
  63. ^ Кеохан, E и другие. (2015). С. 210–211.
  64. ^ Кеохан, E и другие. (2015). п. 210.
  65. ^ Коттке-Марчант, К; Дэвис, Б. (2012). п. 27.
  66. ^ а б c d е Смок, KJ. Глава 1 в Greer, JP и другие, изд. (2018), с. «Объем упакованных эритроцитов (гематокрит)».
  67. ^ Смок, KJ. Глава 1 в Greer JP и другие, изд. (2018), с. «Средний корпускулярный объем»; «Средний корпускулярный гемоглобин»; «Средняя концентрация корпускулярного гемоглобина»; «Ширина распределения эритроцитов».
  68. ^ Кеохан, E и другие. (2015). п. 2.
  69. ^ Кеохан, E и другие. (2015). п. 209.
  70. ^ а б c Bain, BJ и другие. (2017). п. 37.
  71. ^ Арнет, БМ; Меньщиковки, М. (2015). п. 3.
  72. ^ а б c Смок, KJ. Глава 1 в Greer JP и другие, изд. (2018), с. «Лейкоцитарные дифференциалы».
  73. ^ Наим, Ф и другие. (2009). п. 210.
  74. ^ а б Turgeon, ML (2016). п. 318.
  75. ^ а б Bain, BJ и другие. (2017). п. 39.
  76. ^ а б Смок, KJ. Глава 1 в Greer, JP и другие, изд. (2018), с. "Вступление"; «Подсчет клеток».
  77. ^ а б c d Гулати, G; Песня, Дж; Дулау Флореа, А; Гонг, Дж (2013). «Цель и критерии исследования мазка крови, исследования мазка крови и анализа мазка крови». Анналы лабораторной медицины. 33 (1): 1–7. Дои:10.3343 / alm.2013.33.1.1. ISSN  2234-3806. ЧВК  3535191. PMID  23301216.
  78. ^ а б Муни, К; Бирн, М; Капуя, П; Пентони, L; De la Salle, B; Cambridge, T; Фоли, Д. (2019). «Терапевтическое тестирование по общей гематологии». Британский журнал гематологии. 187 (3): 296–306. Дои:10.1111 / bjh.16208. ISSN  0007-1048. PMID  31578729.
  79. ^ а б Сиречи, АН (2015). «Гематологическое тестирование в условиях неотложной медицинской помощи и при ограниченных ресурсах: обзор пунктов оказания медицинской помощи и дополнительных исследований». Клиники лабораторной медицины. 35 (1): 197–207. Дои:10.1016 / j.cll.2014.10.009. ISSN  0272-2712. PMID  25676380.
  80. ^ Bain, BJ и другие. (2017). п. 43.
  81. ^ Кеохан, E и другие. (2015). п. 225.
  82. ^ Bain, BJ. (2015). С. 9–11.
  83. ^ Палмер, Л. и другие. (2015). С. 288–289.
  84. ^ Turgeon, ML (2016). С. 325–326.
  85. ^ Bain, BJ (2015). п. 98.
  86. ^ Bain, BJ (2015). п. 154.
  87. ^ Wang, SA; Хассерджян, РП (2018). п. 10.
  88. ^ а б Turgeon, ML (2016). п. 329.
  89. ^ а б д'Онофрио, G; Зини, Г. (2014). п. 289.
  90. ^ Палмер, Л. и другие. (2015). С. 296–297.
  91. ^ а б c Кеохан, E и другие. (2015). п. 226.
  92. ^ а б Смок, KJ. Глава 1 в Greer, JP и другие, изд. (2018), с. «Подсчет клеток».
  93. ^ Кеохан, E и другие. (2017) стр. 189.
  94. ^ Bain, BJ (2015). С. 22–23.
  95. ^ Кеохан, E и другие. (2017). С. 190–191.
  96. ^ Bain, BJ и другие. (2017). С. 19–22.
  97. ^ Bain, BJ и другие. (2017). С. 548–552.
  98. ^ Кеохан, E и другие. (2015). п. 46.
  99. ^ а б c Vis, JY; Хьюсман, А (2016). «Поверка и контроль качества стандартных гематологических анализаторов». Международный журнал лабораторной гематологии. 38: 100–109. Дои:10.1111 / ijlh.12503. ISSN  1751-5521. PMID  27161194.
  100. ^ а б Коттке-Марчант, К; Дэвис, Б. (2012). С. 697–698.
  101. ^ Пай, S; Брат, JL (2019). «Управление качеством и аккредитация в лабораторной гематологии: перспективы из Индии». Международный журнал лабораторной гематологии. 41 (S1): 177–183. Дои:10.1111 / ijlh.13017. ISSN  1751-5521. PMID  31069974.
  102. ^ Грир, JP (2008). п. 4.
  103. ^ Коттке-Марчант, К; Дэвис, Б. (2012). п. 438.
  104. ^ Bain, BJ и другие. (2017). С. 539–540.
  105. ^ Favaloro, EJ; Дженнингс, я; Олсон, Дж; Ван Котт, EM; Bonar, R; Gosselin, R; Мейер, П. (2018). «На пути к гармонизации внешней оценки качества / проверки квалификации в области гемостаза». Клиническая химия и лабораторная медицина (CCLM). 0 (0). Дои:10.1515 / cclm-2018-0077. ISSN  1437-4331. PMID  29668440.
  106. ^ Bain, BJ и другие. (2017). п. 551.
  107. ^ Кеохан, E и другие. (2015). С. 4–5.
  108. ^ Бланн, А; Ахмед, Н. (2014). п. 106.
  109. ^ Turgeon, ML (2016). п. 293.
  110. ^ Bain, BJ и другие. (2017). С. 33–34.
  111. ^ Turgeon, ML (2016). С. 319–320.
  112. ^ Бреретон, М. Маккафферти, Р. Марсден, К; Kawai, Y; Etzell, J; Эрменс, А (2016). «Рекомендации по стандартизации гематологических единиц отчетности, используемых при расширенном анализе крови». Международный журнал лабораторной гематологии. 38 (5): 472–482. Дои:10.1111 / ijlh.12563. ISSN  1751-5521. PMID  27565952.
  113. ^ Кеохан, E и другие. (2015). п. 195.
  114. ^ а б Bain, BJ (2015). п. 22.
  115. ^ а б c d Кеохан, E и другие. (2015). п. 196.
  116. ^ Schmaier, AH; Лазарь, HM (2012). п. 25.
  117. ^ а б Bain, BJ (2015). С. 73–75.
  118. ^ а б c d е May, JE; Маркес, МБ; Редди, ВВБ; Гангараджу, Р. (2019). «Три заброшенных числа в CBC: RDW, MPV и NRBC». Кливлендский медицинский журнал клиники. 86 (3): 167–172. Дои:10.3949 / ccjm.86a.18072. ISSN  0891-1150. PMID  30849034.
  119. ^ Кеохан, E и другие. (2015). п. 285.
  120. ^ Кеохан, E и другие. (2015). п. 286.
  121. ^ Каушанский, К и другие. (2015). п. 503.
  122. ^ Vieth, JT; Лейн, Д.Р. (2014). С. 11-12.
  123. ^ Bain, BJ (2015). п. 297.
  124. ^ ДиГрегорио, RV и другие. (2014). С. 491–493.
  125. ^ Айзекс, C и другие. (2017). п. 331.
  126. ^ Bain, BJ (2015). п. 232.
  127. ^ Макферсон, РА; Пинкус, MR (2017). С. 600–601.
  128. ^ а б Смок, KJ. Глава 1 в Greer, JP и другие, изд. (2018), с. «Средняя концентрация корпускулярного гемоглобина».
  129. ^ Кеохан, E и другие. (2015). п. 197.
  130. ^ а б Коттке-Марчант, К; Дэвис, Б. (2012). п. 88.
  131. ^ Bain, BJ (2015). п. 193.
  132. ^ Bain, BJ и другие. (2017). С. 501–502.
  133. ^ Ciesla, B (2018). п. 26.
  134. ^ Пауэлл, диджей; Ачебе, Миссури. (2016). С. 530, 537–539.
  135. ^ Харменнинг, DM (2009). п. 380.
  136. ^ Пагана, TJ и другие. (2014). п. 992.
  137. ^ Стены, R и другие. (2017). С. 1480–1481.
  138. ^ Террито, М. (январь 2020 г.). «Обзор нарушений лейкоцитов». Руководства Merck для потребителей. В архиве из оригинала 23 июня 2020 г.. Получено 8 сентября 2020.
  139. ^ Пагана, TJ и другие. (2014). п. 991.
  140. ^ McCulloh, RJ; Опал С.М. Глава 42 в Oropello, JM и другие, изд. (2016), с. «Количество лейкоцитов и дифференциал».
  141. ^ Американская ассоциация клинической химии (29 июля 2020 г.). «Дифференциальный WBC». Лабораторные тесты онлайн. В архиве с оригинала 19 августа 2020 г.. Получено 8 сентября 2020.
  142. ^ Wang, SA; Хассерджян, РП (2018). п. 8.
  143. ^ Палмер, Л. и другие. (2015). С. 294–295.
  144. ^ Chabot-Richards, DS; Джордж, Т.И. (2015). п. 10.
  145. ^ Палмер, Л. и другие. (2015). п. 294.
  146. ^ Turgeon, ML (2016). п. 306.
  147. ^ а б Каушанский, К и другие. (2015). п. 44.
  148. ^ Хоффман, EJ и другие. (2013). п. 644.
  149. ^ Порвит, А и другие. (2011). С. 247–252.
  150. ^ Стены, R и другие. (2017). п. 1483.
  151. ^ Стены, R и другие. (2017). С. 1497–1498.
  152. ^ Bain, BJ (2015). п. 99.
  153. ^ Bain, BJ и другие. (2017). п. 85.
  154. ^ Bain, BJ и другие. (2017). п. 498.
  155. ^ Bain, BJ (2015). п. 243.
  156. ^ Порвит, А и другие. (2011). п. 256.
  157. ^ Палмер, Л. и другие. (2015). п. 298.
  158. ^ Turgeon, ML (2016). С. 358–360.
  159. ^ Каушанский, К и другие. (2015). п. 1993 г.
  160. ^ Turgeon, ML (2016). п. 315.
  161. ^ Стены, R и другие. (2017). С. 1486–1488.
  162. ^ Кауфман, РМ; Джулбегович, Б; Gernsheimer, T; Клейнман, S; Tinmouth, A T .; Capocelli, KE; и другие. (2015). «Переливание тромбоцитов: руководство по клинической практике AABB». Анналы внутренней медицины. 162 (3): 205. Дои:10.7326 / M14-1589. ISSN  0003-4819. PMID  25383671.
  163. ^ а б Кеохан, E и другие. (2015). п. 4.
  164. ^ Стены, R и другие. (2017). п. 1489.
  165. ^ Герстен, Т. (25 августа 2020 г.). «Подсчет тромбоцитов: Медицинская энциклопедия MedlinePlus». MedlinePlus. Национальная медицинская библиотека США. В архиве из оригинала 9 сентября 2020 г.. Получено 9 сентября 2020.
  166. ^ Wang, SA; Хассерджян, РП (2018). п. 7.
  167. ^ Каушанский, К и другие. (2015). С. 18–19.
  168. ^ а б Каушанский, К и другие. (2015). п. 14.
  169. ^ Turgeon, ML (2016). С. 318–319.
  170. ^ Turgeon, ML (2016). п. 319.
  171. ^ а б c d Каушанский, К и другие. (2015). п. 16.
  172. ^ Bain, BJ и другие. (2017). С. 42–43.
  173. ^ Харменнинг, DM (2009). С. 8–10.
  174. ^ Константино, B; Cogionis, B (2000). «Ядерные эритроциты - значение в мазке периферической крови». Лабораторная медицина. Дои:10.1309 / D70F-HCC1-XX1T-4ETE.
  175. ^ Зандецкий, М и другие. (2007). С. 24–25.
  176. ^ Вирк, H; Варма, Н; Насим, S; Бихана, I; Сухачев, Д (2019). «Полезность данных о клеточной популяции (параметры VCS) в качестве инструмента быстрого скрининга острого миелоидного лейкоза (AML) в лабораториях с ограниченными ресурсами». Журнал клинического лабораторного анализа. 33 (2): e22679. Дои:10.1002 / jcla.22679. ISSN  0887-8013. PMID  30267430.
  177. ^ Bain, BJ (2015). п. 90.
  178. ^ а б Кеохан, E и другие. (2015). Передняя материя.
  179. ^ Bain, BJ (2015). С. 211–213.
  180. ^ а б c Bain, BJ (2015). п. 143.
  181. ^ Ланжковского, П и другие. (2016). п. 197.
  182. ^ Каушанский, К и другие. (2015). п. 99.
  183. ^ Каушанский, К и другие. (2015). п. 103.
  184. ^ Bain, BJ (2015). п. 220.
  185. ^ Bain, BJ (2015). п. 214.
  186. ^ Bain, BJ и другие. (2017). С. 8–10.
  187. ^ Палмер, Л. и другие. (2015). п. 296.
  188. ^ Bain, BJ (2015). п. 195.
  189. ^ Коттке-Марчант, К; Дэвис, Б. (2012). п. 67.
  190. ^ Bain, BJ (2015). п. 194.
  191. ^ Turgeon, ML (2016). п. 91.
  192. ^ Коттке-Марчант, К; Дэвис, B (2012), стр. 80, 86–87.
  193. ^ Bain, BJ (2015). С. 196–197.
  194. ^ Родак Б.Ф .; Карр, Дж. Х. (2013). п. 109.
  195. ^ Wang, SA; Хассерджян, РП (2018). п. 9.
  196. ^ Коттке-Марчант, К; Дэвис, Б. (2012). С. 19–20.
  197. ^ Музей науки, Лондон. «Гемоглобинометр, Великобритания, 1850–1950». Коллекция Wellcome. В архиве из оригинала 29 марта 2020 г.. Получено 29 марта 2020.
  198. ^ Кеохан, E и другие. (2015). С. 1–4.
  199. ^ Коттке-Марчант, К; Дэвис, Б. (2012). п. 1.
  200. ^ Винтроб, ММ. (1985). п. 10.
  201. ^ а б Коттке-Марчант, К; Дэвис, Б. (2012). С. 3–4.
  202. ^ Verso, ML (май 1962 г.). «Эволюция методов подсчета крови». Прочтите на заседании секции истории медицины Первого Австралийского медицинского конгресса. 8 (2): 149–158. Дои:10.1017 / s0025727300029392. ЧВК  1033366. PMID  14139094.
  203. ^ а б c Значит, RT (2011). «Все началось в Новом Орлеане: Винтроб, гематокрит и определение нормы». Американский журнал медицинских наук. 341 (1): 64–65. Дои:10.1097 / MAJ.0b013e3181e2eb09. ISSN  0002-9629. PMID  21191263.
  204. ^ Дэвис, JD (1995). п. 167.
  205. ^ Коттке-Марчант, К; Дэвис, Б. (2012). п. 4.
  206. ^ Дэвис, JD (1995). С. 168–171.
  207. ^ Безруков, А.В. (2017). «Окраска по Романовскому, эффект Романовского и размышления о научном приоритете». Биотехника и гистохимия. 92 (1): 29–35. Дои:10.1080/10520295.2016.1250285. ISSN  1052-0295. PMID  28098484.
  208. ^ Кеохан, E и другие. (2015). п. 134.
  209. ^ а б c d Коттке-Марчант, К; Дэвис, Б. (2012). п. 5.
  210. ^ Робинсон, JP (2013). «Уоллес Х. Коултер: десятилетия изобретений и открытий». Цитометрия Часть А. 83A (5): 424–438. Дои:10.1002 / cyto.a.22296. ISSN  1552-4922. PMID  23596093.
  211. ^ а б c d е Грэм, доктор медицины (2013). «Принцип Коултера: воображаемое происхождение». Цитометрия Часть А. 83 (12): 1057–1061. Дои:10.1002 / cyto.a.22398. ISSN  1552-4922. ЧВК  4237176. PMID  24151220.
  212. ^ Коттке-Марчант, К; Дэвис, Б. (2012). п. 6.
  213. ^ Гронер, W (1995). С. 12–14.
  214. ^ Льюис, С.М. (1981). «Автоматический дифференциальный подсчет лейкоцитов: текущее состояние и будущие тенденции». Blut. 43 (1): 1–6. Дои:10.1007 / BF00319925. ISSN  0006-5242. PMID  7260399.
  215. ^ Да Коста, Л. (2015). п. 5.
  216. ^ Гронер, W (1995). С. 12–15.
  217. ^ Бентли, С.А. (1990). «Автоматический дифференциальный подсчет лейкоцитов: критическая оценка». Клиническая гематология Байера. 3 (4): 851–869. Дои:10.1016 / S0950-3536 (05) 80138-6. ISSN  0950-3536. PMID  2271793.
  218. ^ Кратц, А; Ли, S; Зини, G; Riedl, JA; Гур, М; Мачин, С (2019). «Цифровые морфологические анализаторы в гематологии: обзор и рекомендации ICSH». Международный журнал лабораторной гематологии. Дои:10.1111 / ijlh.13042. ISSN  1751-5521. PMID  31046197.
  219. ^ Да Коста, Л. (2015). С. 5–6.
  220. ^ Макканн, SR (2016). п. 193.
  221. ^ Меламед, М. (2001). С. 5–6.
  222. ^ Шапиро, HM (2003). С. 84–85.
  223. ^ а б Меламед М. (2001). п. 8.
  224. ^ Пико, Дж. и другие. (2012). п. 110.
  225. ^ Мансберг, HP; Сондерс, AM; Гронер, W (1974). «Дифференциальная система лейкоцитов Hemalog D». Журнал гистохимии и цитохимии. 22 (7): 711–724. Дои:10.1177/22.7.711. ISSN  0022-1554. PMID  4137312.
  226. ^ Пьер, Р.В. (2002). п. 281.
  227. ^ Коттке-Марчант, К; Дэвис, Б. (2012). С. 8–9.

Библиография