Лизат тромбоцитов - Platelet lysate
Лизат тромбоцитов человека (или же hPL) заменяет фетальная бычья сыворотка (FBS) в экспериментальной и клинической культуре клеток. Это мутная светло-желтая жидкость, которую получают из крови человека. тромбоциты после цикла (циклов) замораживания / оттаивания. Цикл замораживания / оттаивания заставляет тромбоциты лизировать, высвобождая большое количество факторов роста, необходимых для размножения клеток. Среды для культивирования клеток без FBS, например с лизатом тромбоцитов или химически определенный / без компонентов животного происхождения, используются для клеточная терапия или же регенеративная медицина. Они коммерчески доступны в GMP (хорошая производственная практика ) -качество, которое обычно является основанием для утверждения регулирующими органами.[1]
Процесс
Продолжительность жизни тромбоцитов составляет от 5 до 9 дней. Из-за этого Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США (FDA) истекает срок годности пригодных для переливания тромбоцитов через 5 дней после сбора. Обычно hPL производится из тромбоцитов с истекшим сроком годности, которые хранились в замороженных условиях не позднее, чем через 7 дней после сбора.
hPL создается из единичных или объединенных донорских тромбоцитов, выделенных из цельной крови или аферезом, распределенных в стандартном пакете для сбора тромбоцитов. Между протоколами производства hPL есть некоторые различия, но все они имеют одну и ту же суть: замораживание при очень низких температурах и размораживание. Этот процесс можно повторить два или три раза, чтобы вызвать полный лизис тромбоцитов. Полученный hPL может затем подвергаться различным этапам производства для получения hPL нескольких сортов.
Наиболее распространенная форма hPL проходит несколько этапов обработки, производя продукт, состоящий из супернатанта после процесса замораживания / оттаивания. Включенные факторы свертывания требуют добавления гепарина в среду для культивирования клеток для предотвращения коагуляции во время инкубации.
Другой формой hPL является та, которую можно использовать в культуре клеток без необходимости добавления гепарина или какого-либо антикоагулянта. Этот сорт hPL проходит дальнейшие этапы производства, чтобы подавить эффект факторов свертывания крови.
Многие лаборатории по всему миру создают небольшие количества hPL для удовлетворения потребностей своих лабораторий. Недостатки этого процесса: стоимость и последовательность. При создании небольших партий hPL (объединение одного или нескольких доноров) согласованность hPL от партии к партии становится переменной. Крупномасштабное производство путем объединения множества доноров тромбоцитов является необходимостью для уменьшения вариабельности от донора к донору. Последовательность является главным приоритетом для экспериментального дизайна, чтобы обеспечить воспроизводимые результаты.
Лизат тромбоцитов обычно используется для добавления базальных сред в мезенхимальные стволовые клетки культура. Перед использованием рекомендуется процесс инактивации патогенов, чтобы предотвратить передачу патогенов.[2]
Глобальные продажи
Лизат тромбоцитов человека коммерчески доступен через AventaCell BioMedical, Mill Creek Life Sciences, Compass Biomedical, Inc., Sexton Biotechnologies, Macopharma SA, iBiologics, PL BioScience GmbH, Life Science Productions Ltd (Великобритания) и Trinova Biochem GmbH под линиями продуктов UltraGRO, PLTMax, PLUS, Stemulate, лизат тромбоцитов человека, XcytePlus, PLSOLUTION, PLMATRIX и добавки CRUX RUFA. Некоторые компании предоставляют разные сорта лизата тромбоцитов, включая GMP версии и клиническая степень для использования в клинических испытаниях на людях. Лизат тромбоцитов - это настоящий человеческий платформа рекомбинантных белков. Лизат тромбоцитов был протестирован в различных культура клеток приложений, включая использование в расширенных биореактор системы.[3]
Смотрите также
Рекомендации
- ^ Laner ‑ Plamberger et al. Журнал "Перевод", 2015 г.
- ^ Iudicone P (январь 2014 г.). «Свободный от патогенов лизат тромбоцитов с низким содержанием плазмы и распространение мезенхимальных стволовых клеток человека». J Transl Med. 12. Дои:10.1186/1479-5876-12-28. ЧВК 3918216. PMID 24467837.
- ^ Лизат тромбоцитов, состоящий из протеома естественной репарации, поддерживает пролиферацию мезенхимальных стволовых клеток человека и хромосомную стабильность. Cell TransplantCell Transplant 2011 19; 20 (6): 797-811. Epub 2010 19 ноября.http://www.bioprocessintl.com/manufacturing/cell-therapies/expansion-human-mesenchymal-stem-cells-using-microcarriers-human-platelet-lysate/