Коагулаза - Википедия - Coagulase

S. aureus использует коагулазу для образования фибриновой оболочки из фибриногена, присутствующего в кровотоке. Это помогает бактериям избежать обнаружения и фагоцитоза иммунной системой.

Коагулаза это белок фермент произведено несколькими микроорганизмы что позволяет преобразовать фибриноген к фибрин. в лаборатория, он используется для различения разных типов Стафилококк изолирует. Важно отметить, что S. aureus обычно коагулазо-положительный, а это означает, что положительный тест на коагулазу указывает на наличие S. aureus или любой из других 11 коагулазо-положительных Стафилококки.[1] Отрицательный тест на коагулазу вместо этого покажет присутствие коагулазонегативных организмов, таких как S. epidermidis или же S. saprophyticus. Однако сейчас известно, что не все S. aureus коагулазо-положительные.[2][3]

Он также производится Yersinia pestis.[4]

Коагулаза реагирует с протромбин в крови. Полученный комплекс называется стафилотромбин, что позволяет ферменту действовать как протеаза превращать фибриноген, белок плазмы, продуцируемый печенью, в фибрин. Это приводит к свертыванию крови. Коагулаза прочно связана с поверхностью бактерии. S. aureus и может покрывать свою поверхность фибрином при контакте с кровью. Сгусток фибрина может защитить бактерию от фагоцитоза и изолировать ее от других защитных механизмов хозяина.[5] Следовательно, фибриновая оболочка может сделать бактерии более опасными. Связанная коагулаза является частью большого семейства MSCRAMM адгезиновые белки.

Коагулазный тест

В коагулазный тест традиционно использовался для различения Золотистый стафилококк из коагулазонегативных стафилококки. S.aureus производит две формы коагулазы (т.е. связанную коагулазу и свободную коагулазу). Связанная коагулаза, иначе известная как "фактор слипания", может быть обнаружен путем проведения теста на коагулазу на слайде, а свободная коагулаза может быть обнаружена с помощью теста на коагулазу в пробирке.

Слайд-тест

Тест на коагулазу на слайдах проводится с отрицательным контролем, чтобы исключить аутоагглютинацию. Две капли физиологического раствора наносят на предметное стекло с номером образца, Test (T) и контролем (C). Две капли физиологического раствора эмульгируют с тестируемым организмом с помощью проволочной петли, прямой проволоки или деревянной палочки. Капля плазмы (кроличья плазма с антикоагулянтом EDTA Рекомендовано)[6] помещается на каплю засеянного физиологического раствора, соответствующую тесту, и хорошо перемешивается, затем предметное стекло осторожно покачивается в течение примерно 10 секунд.

  • Если результат «положительный», в плазме будет наблюдаться макроскопическое комкование в течение 10 секунд без комкования в капле физиологического раствора.
  • Если «отрицательный», комкования не будет.

Если тест на коагулазу на слайдах отрицательный, в качестве подтверждения следует провести тест в трубке. Слипание обеих капель является признаком аутоагглютинации, поэтому следует провести тест через трубку. Пробирки не проводятся в каждом учреждении, но большая часть результатов зависит от лабораторных посевов крови.

Тест трубки

Фибриновый сгусток, образованный в пробирке коагулазная реакция

В пробирке используется кролик плазма который был инокулирован колонией стафилококков (т.е. грамположительными кокками, которые каталаза положительный). Затем пробирку инкубируют при 37 ° C в течение 1,5 часов. В случае отрицательного результата инкубацию продолжают до 18 часов.

  • Если «положительный» (например, подозреваемая колония S. aureus), плазма будет свертываться,[7] в результате образуется сгусток (иногда сгусток настолько выражен, что жидкость полностью застывает).
  • Если «отрицательный», плазма остается жидкой. Отрицательный результат может быть S. epidermidis но только более подробный идентификационный тест может подтвердить это с использованием биохимических тестов, как в индекс аналитического профиля методы испытаний. Ложноотрицательный результат можно получить, если образец не охладить в течение примерно 30 минут при комнатной температуре или 10 минут в морозильной камере, учитывая, что сыворотка может расплавиться. Если результат действительно отрицательный, после охлаждения сыворотка останется жидкой.
  • Список коагулазоположительных стафилококков: Золотистый стафилококк subsp. анаэробиус, S. aureus subsp. aureus, С. дельфини, С. hyicus, С. промежуточный, S. lutrae, и Стафилококк шлейфери subsp. коагулянты.
  • Список коагулазонегативных стафилококков клинического значения: S. saprophyticus, S.cohnii subsp. Cohnii, С. cohnii subsp. уреалитик, S. captitus subsp. captitus, S. warneri, S.hominis, S.epidermidis, S. caprae, и S.lugdunensis

Рекомендации

  1. ^ Becker et al., 2014. PMID: 25278577
  2. ^ Райан KJ, Рэй CG (редакторы) (2004). Шеррис Медицинская микробиология (4-е изд.). Макгроу Хилл. ISBN  0-8385-8529-9.
  3. ^ PreTest, Surgery, 12-е изд., Стр.88
  4. ^ "коагулаза " в Медицинский словарь Дорланда
  5. ^ Тортора, Джерард Дж .; Funke, Berdell R .; Случай, Кристин Л. (2013). Микробиология: введение (11-е изд.). Гленвью, Иллинойс: Pearson Education Inc., стр. 434. ISBN  978-0-321-73360-3.
  6. ^ А. Форбс, Бетти; Дэниел Ф. Сахм; Алиса С. Вайсфельд (1998). Диагностическая микробиология BAILEY & SCOTT'S (Десятое изд.). Дон Ладиг. стр.430–431. ISBN  0-8151-2535-6.
  7. ^ "коагулазный тест " в Медицинский словарь Дорланда

внешняя ссылка