Исследование смешивания - Mixing study

Смешивание исследований проводятся ли тесты на плазма крови пациентов или испытуемых, чтобы отличить факторный дефицит от ингибиторы факторов, Такие как волчаночный антикоагулянт, или ингибиторы специфических факторов, такие как антитела направлен против фактор VIII. [1]Основная цель этих тестов - определить причину продления Протромбиновое время (PT), Частичное тромбопластиновое время, а иногда и тромбиновое время (TT). В исследованиях смешивания используется тот факт, что уровни факторов, составляющие 50 процентов от нормы, должны давать нормальные значения. Протромбиновое время (PT) или Частичное тромбопластиновое время (PTT) результат.[2] Плазма с дефицитом фактора (адсорбированная плазма и выдержанная плазма и т. Д.) Используется в исследованиях смешения. Плазма с известным дефицитом факторов коммерчески доступна, но очень дорога, поэтому ее часто готовят в лаборатории и затем можно использовать для экспериментов по смешиванию.

Метод испытания

В свежей нормальной плазме все факторы свертывания крови находятся на нормальном уровне. Плазма пациентов, принимающих пероральные антикоагулянты (Варфарин др.) в течение 48-72 часов не хватает Фактор VII. Адсорбированная плазма или плазма пациентов, принимающих пероральные антикоагулянты (Варфарин и т. д.) в течение недели или более имеет дефицит фактора II, фактора VII, фактора IX и фактора X. Фактор V & Фактор VIII C. В сыворотке недостаточно факторов I, V и VIIIC.

Если проблема заключается в недостаточности простого фактора, смешивание плазмы пациента 1: 1 с плазмой, которая содержит 100% нормального уровня фактора, приводит к уровню ≥50% в смеси (скажем, у пациента активность 0%; 100% + 0% = 50%).[3] PT или PTT будут нормальными (исследование микширования показывает исправление). Коррекция смешением указывает на дефицит фактора; невозможность исправить указывает на ингибитор. Измерение тромбинового времени для исследуемой плазмы может предоставить полезную дополнительную информацию для интерпретации тестов на смешение.

Коррекция протромбинового времени

Протромбиновое время (PT) можно исправить следующим образом:[4][5]

Факторный дефицит / аномалияПротромбиновое время скорректировано путем смешивания с
Нормальная плазмаАдсорбированная плазмаСостаренная плазмаКумарин плазма
Фактор Iдададада
Фактор IIдаЧастичноедада
Фактор VдадаНетда
Фактор VIIдаНетдаНет
Фактор XдаНетдада
АнтикоагулянтыНетНетНетНет

Коррекция частичного тромбопластинового времени

Частичное тромбопластиновое время (PTT) можно исправить следующим образом:[4]

Факторный дефицит / аномалияЧастичное тромбопластиновое время корректируется путем смешивания с
Нормальная плазмаАдсорбированная плазмаСостаренная плазма
Фактор VIIICдадаНет
Фактор IXдаНетда
Фактор XIдадада

Ингибиторы, зависящие от времени

Некоторые ингибиторы зависят от времени. Другими словами, антителу требуется время, чтобы реагировать и инактивировать добавленный фактор свертывания крови. Тест на свертывание, выполняемый сразу после смешивания образцов, может показать исправление, поскольку антитело не успело инактивировать свой целевой фактор. Тест, проведенный после инкубации смеси в течение 1-2 часов при 37 ° C, покажет значительное увеличение времени свертывания, полученного после немедленного смешивания. Неспецифические ингибиторы, такие как волчаночный антикоагулянт, обычно не зависят от времени; немедленное перемешивание покажет пролонгацию. Многие специфические ингибиторы факторов зависят от времени, и ингибитор не будет обнаружен, если тест не будет повторен после инкубации (ингибиторы фактора VIII печально известны этим).[6]

Аномальные результаты теста на коагуляцию

Распространенная проблема - необъяснимое повышение PT и / или PTT. Если это наблюдается, испытание следует повторить со свежим образцом. Еще одно соображение гепарин. Возможно, образец крови был ошибочно взят через бегущую линию. Вмешательство гепарина может быть обнаружено путем абсорбции гепарина смолой («Heparsorb») или с помощью фермент переваривать гепарин («Hepzyme[7]»). Кроме того, пациента история следует проверить, особенно в отношении использования антикоагулянтов или болезнь печени. При условии, что ненормальный результат воспроизводится на свежем образце и нет очевидного объяснения из истории, следует выполнить исследование смешивания. Если исследование смешивания показывает исправление и отсутствие продления при инкубации, следует искать факторную недостаточность, начиная с VIII и IX. Витамин К -зависимые и не зависящие от витамина К факторы следует учитывать, чтобы исключить случайные или скрытые варфарин проглатывание.

Ингибитор

Если исследование смешения не дает результатов, следует добавить ингибитор.[8][9] Наиболее распространенным ингибитором является неспецифический ингибитор, такой как волчаночный антикоагулянт.[8] Выполните тест, чтобы продемонстрировать наличие фосфолипид-зависимых антител, таких как тромбоцит процедура нейтрализации. Встречаются спонтанные специфические ингибиторы факторов свертывания (т.е. не в больные гемофилией ), чаще всего против фактора VIII.[10] Это может произойти у пациентов с системная красная волчанка, моноклональные гаммопатии, Другой злокачественные новообразования, в течение беременность и без видимой причины (идиопатический ). У этих пациентов может быть сильное кровотечение. Что нужно сделать, это определить конкретный фактор и выяснить, насколько высок титр. Если у пациента низкий титр ингибитора, попробуйте подавить его высокими дозами фактора. Если у пациента высокий титр антител против фактор VIII, попробуйте фактор VIII свиньи или протромбин комплексные концентраты[11] чтобы остановить кровотечение. Преднизон часто со временем снижает титр. Внутривенный иммуноглобулин Сообщалось, что он также помогает, но, похоже, не работает с ингибиторами у больных гемофилией.

Рекомендации

  1. ^ Ланжковский П. (2005-06-06). Руководство по детской гематологии и онкологии. Эльзевир. ISBN  978-0-08-049731-0.
  2. ^ Деврезе К.М. (2007). «Интерпретация нормальных исследований смешения плазмы в лабораторной диагностике антикоагулянтов волчанки». Исследование тромбоза. 119 (3): 369–76. Дои:10.1016 / j.thromres.2006.03.012. PMID  16704874.
  3. ^ Хоффман Р., Бенц Э.Дж., Зильберштейн Л.Е., Хеслоп Х., Анастаси Дж., Вайц Дж. (01.01.2013). Гематология: основные принципы и практика. Elsevier Health Sciences. ISBN  978-1-4377-2928-3.
  4. ^ а б Гупта П., Менон П.С., Рамджи С., Лодха Р. (2015-08-31). PG Учебник педиатрии: Том 2: Инфекции и системные расстройства. JP Medical Ltd. ISBN  9789351529552.
  5. ^ Med Lab Tech Vol 1, 2 / e. Тата МакГроу-Хилл Образование. 2010 г. ISBN  978-0-07-007659-4.
  6. ^ Bain BJ, Bates I, Laffan MA (11 августа 2016 г.). Электронная книга по практической гематологии Дэйси и Льюиса. Elsevier Health Sciences. ISBN  9780702069253.
  7. ^ «Нейтрализация гепарина». www.clinlabnavigator.com. Получено 2018-05-13.
  8. ^ а б "Осмысление смешанных исследований". Джордж Кинг Био-Медикал, Инк.. 2016-01-07. Получено 2018-05-13.
  9. ^ Макферсон Р.А., Пинкус М.Р. (06.09.2011). Электронная книга Генри по клинической диагностике и лечению с помощью лабораторных методов. Elsevier Health Sciences. ISBN  978-1455726844.
  10. ^ Franchini M, Castaman G, Coppola A, Santoro C, Zanon E, Di Minno G, Morfini M, Santagostino E, Rocino A (июль 2015 г.). «Приобретенные ингибиторы факторов свертывания крови: рекомендации AICE по диагностике и лечению». Переливание крови = Trasfusione del Sangue. 13 (3): 498–513. Дои:10.2450/2015.0141-15. ЧВК  4614303. PMID  26192778.
  11. ^ Люшер Дж. М. (2000). «Ингибиторные антитела к фактору VIII и фактору IX: управление». Семинары по тромбозу и гемостазу. 26 (2): 179–88. Дои:10.1055 / с-2000-9821. PMID  10919411.