Трубка пыльцы - Pollen tube

СЭМ-изображение пыльцевых трубок, растущих из Лили пыльцевые зерна.

А пыльцевая трубка представляет собой трубчатую конструкцию, изготовленную самцом гаметофит из семенные растения когда он прорастает. Удлинение пыльцевой трубки - неотъемлемый этап жизненного цикла растения. Пыльцевая трубка действует как канал для транспортировки мужских клеток гамет из пыльца - либо из клеймо (в цветущие растения ) к семяпочкам у основания пестик или непосредственно через ткань яйцеклетки в некоторых голосеменные. В кукуруза, эта одиночная ячейка может вырасти более чем на 12 дюймов (30 см), чтобы пересечь длину пестик.

Пыльцевые трубки были впервые обнаружены Джованни Баттиста Амичи в 19 ​​веке.

Они используются в качестве модели для понимания поведения растительных клеток. Продолжаются исследования, чтобы понять, как пыльцевая трубка реагирует на внеклеточные управляющие сигналы для достижения оплодотворения.

Описание

Пчела опыляет подсолнечник. Пыльца передается с пыльника одного растения на рыльце другого, когда пчела собирает нектар.

Пыльцевые трубки уникальны для растений, и их структура развивалась на протяжении всей истории растений. Образование пыльцевых трубок сложное, и механизм до конца не изучен, но представляет большой интерес для ученых.[1]Образование пыльцевой трубки важно для полового размножения семенных растений. Ветер, вода или опылители переносят пыльцевые зерна к женскому гаметофиту. Один из таких способов передвижения предполагает путешествие через стиль от стигмы. Как только пыльцевое зерно имплантировано на совместимое клеймо через несовместимость с самим собой механизмы, прорастание процесс начат.[2] Во время этого процесса пыльцевое зерно претерпевает конформационные изменения, после чего заданная часть начинает выступать наружу, образуя трубчатую структуру, известную как пыльцевая трубка.[3] Эта структура быстро опускается вниз по длине стиля за счет роста, направленного на кончик, со скоростью 1 см / ч, неся при этом две неподвижные сперматозоиды. [2] По достижении яйцеклетка разрывается пыльцевая трубка, тем самым доставляя сперматозоиды к женский гаметофит, что в конечном итоге привело к двойное оплодотворение мероприятие. [4] Первое событие оплодотворения производит диплоидная зигота и второе событие оплодотворения производит триплоидный эндосперм.


Пыльцевые трубки производятся самцом гаметофиты из семенные растения. Пыльцевые трубки действуют как каналы для транспортировки мужских клеток гамет из пыльца - либо из клеймо (в цветущие растения ) к семяпочкам у основания пестик или непосредственно через ткань яйцеклетки в некоторых голосеменные. Пыльцевые зерна имеют отдельные структуры, такие как микроспороциты и мегаспороциты.


Покрытосеменные

Жизненный цикл покрытосеменных растений.

Мужской репродуктивный орган цветка, тычинка, производит пыльцу. Открытие пыльники делает пыльцу доступной для последующего опыление (перенос пыльцевых зерен в пестик, женский репродуктивный орган). Каждый пыльца зерно содержит вегетативная клетка, а генеративная клетка что делится на два сперматозоиды. Абиотические векторы, такие как ветер, воды, или биотические векторы, такие как животные осуществлять раздачу пыльцы.

Когда пыльцевое зерно оседает на совместимом пестике, оно может прорасти в ответ на сладкую жидкость, выделяемую зрелым рыльцем. Липиды на поверхности рыльца может также стимулировать рост пыльцевых трубок для совместимой пыльцы. Растения, которые самостерильный часто препятствуют росту пыльцевых зерен собственных цветков пыльцевыми трубками. Было замечено, что наличие нескольких зерен пыльцы стимулирует более быстрый рост пыльцевых трубок у некоторых растений.[5] Затем вегетативная клетка производит пыльцевую трубку, трубчатый выступ из пыльцевого зерна, который несет в себе сперматозоиды. цитоплазма. Сперматозоиды мужские гаметы который соединится с яйцеклеткой и центральной ячейкой в двойное оплодотворение. Первое событие оплодотворения производит диплоидная зигота и второе событие оплодотворения производит триплоидный эндосперм.


Проросшая пыльцевая трубка должна прокладывать себе путь через богатую питательными веществами стиль и свернуться к основанию яичника, чтобы достичь семяпочки. Как только пыльцевая трубка достигает семяпочки, она лопается, чтобы доставить две сперматозоиды. Одна из сперматозоидов оплодотворяет яйцеклетку, из которой развивается зародыш, который станет будущим растением. Другой сливается с обоими полярные ядра центральной ячейки, чтобы сформировать эндосперм, который служит питанием эмбриона. Наконец, яичник превратится в фрукты и семяпочки разовьются в семена.

Голосеменные

Поперечный разрез семяпочки голосеменных и покрытосеменных

Пыльца голосеменных выращивается в микроспорангия на чешуйках мужской шишки или микростробил. У большинства видов растения опыляются ветром, а пыльцевые зерна хвойных пород имеют воздушные пузыри, обеспечивающие плавучесть при воздушных потоках. Зерна откладываются в микропиле семяпочки женской шишки или мегастробилуса, где созревают до года. В хвойных и Гнетофиты пыльца прорастает, образуя пыльцевую трубку, которая проникает в мегаспорангий или нуцеллус несущие с собой ядра сперматозоидов, которые переносятся в яйцеклетку в развивающейся архегония женского растения.[6][7]

Механизм роста пыльцевой трубки

Признание

Пыльца на стигме

Самка спорофита должна распознавать пыльцу, прилипшую к рыльцу. Часто может успешно расти только пыльца одного вида. Разросшаяся пыльца растет успешнее.[8][9] С несовместимость с самим собой системы, пыльца вне скрещенных растений растет и вытесняет саму пыльцу. Взаимодействие со стилем и пыльцой определяет совместимость и влияет на скорость роста пыльцевой трубки.[10] Этот процесс отбора основан на регуляции на уровне генов, в которых локусы генов гинецей позволить собственной пыльце медленно расти, прекратить рост или взорваться, в то время как происходит более быстрый рост разросшейся пыльцы. Системы самонесовместимости поддерживают генетическое разнообразие.[11][12] Что касается голосеменных, то они не содержат пестика с рыльцем. Следовательно, пыльца должна проникать сквозь каплю опыления, которая переносит мужской гаметофит в яйцо обнаженной семяпочки. Однако пыльца разных видов не погрузится в каплю; пыльца остается плавающей наверху, а капля втягивается обратно в микропиле.[13]

Посвящение

Механизм предотвращения самоопыления и обеспечения роста совместимой пыльцы пыльцевой трубки для оплодотворения

Как только пыльцевое зерно распознается и гидратируется, пыльцевое зерно прорастает и вырастает пыльцевую трубку.[14] На этом этапе существует конкуренция, поскольку многие пыльцевые зерна могут конкурировать, чтобы добраться до яйца. Клеймо играет роль в направлении сперматозоидов к рецептивной яйцеклетке в случае многих яйцеклеток.[14] Только совместимые пыльцевые зерна могут расти, что определяется сигналом рыльца.

В пыльцевом зерне генеративная клетка дает начало сперматозоиду, в то время как вегетативные клетки имеют трубочную клетку, из которой растет пыльцевая трубка. У некоторых растений есть механизмы предотвращения самоопыления, такие как стигма и пыльники, созревают в разное время или имеют разную длину, что в значительной степени способствует увеличению генетического разнообразия следующего поколения.[15][16]

Скорость роста пыльцевых трубок сильно различается, и многие исследования сосредоточены на передаче сигналов.[15] Экспрессия гена в пыльца Было установлено, что зерно гаметофита, а не родительского спорофита, поскольку оно экспрессирует свою собственную уникальную мРНК и собственные ферменты.[15] У персикового растения среда, в которой прорастает пыльцевая трубка, обеспечивает питание для роста трубки до семяпочки.[14] Пыльцевые трубки толерантны, и даже на пыльце, поврежденной рентгеновскими и гамма-лучами, могут расти пыльцевые трубки.[15]

Рост и сигнализация

семяпочка покрытосеменных

На рост пыльцевых трубок влияет взаимодействие стигмы и пыльцевого зерна. Удлинение трубки достигается за счет удлинения цитоскелет и он идет от кончика, что регулируется высоким уровнем кальция в цитозоле.[12] Уровни кальция помогают синаптическим пузырькам в мембранах расти и расширяться на кончике.[9] Полипептиды, обнаруженные в этом стиле, также регулируют рост пробирки, и были идентифицированы специфические пептиды, которые играют роль в передаче сигналов для роста.

Пептиды LURE, которые секретируются синергидами, занимающими пространство, прилегающее к яйцеклетке, могут использовать аттрактанты. В мутанте Арабидопсис у зародышей растений, особенно у тех, у кого не было синергидов, пыльцевые трубки не могли расти[нужна цитата ]. Пыльцевая трубка растет в направлении яиц того же вида, что и пыльца. Внутривидовая передача сигналов помогает оплодотворять яйцеклетку и сперму одного и того же вида. Передача сигналов в стиле важна, так как пыльцевые трубки могут расти без наличия зародышевого мешка, просто взаимодействуя со стилем.[12][8] Другие части яичника включают цитоплазматические факторы, такие как miRNA и химические градиенты, которые притягивают пыльцевую трубку к синергидам.[8][17]

Кальций и этилен в Arabidopsis thaliana участвовали в окончании пыльцевой трубки, когда она растет рядом с завязью. Увеличение кальция позволило высвободить две сперматозоиды из трубки, а также вызвать дегенерацию синергидной клетки.[8] Химический градиент кальция также может способствовать прекращению роста пробирки на ранней стадии или в подходящее время.[17]

Длина пыльцевой трубки зависит от вида. Он растет колебательно, пока не будет готов выпустить сперму рядом с яйцеклеткой для оплодотворения.[18][19] Некоторые быстрорастущие пыльцевые трубки наблюдались у лилий, табака и Impatiens sultanii.[19][20] Скорость роста дает организму преимущество, но неясно, существует ли разница в скорости роста в популяции или она выбиралась на протяжении поколений из-за повышенной приспособленности.[15]

Эволюция

Гимнопермы в перспективе филогении

Было идентифицировано множество переходных особенностей, которые показывают корреляцию между эволюцией пыльцевой трубки и неподвижной спермы.[16] Ранние семенные растения, такие как папоротники, имеют споры и подвижные сперматозоиды, плавающие в водной среде, называемой зооидогамия.[21] Пыльцевая трубка покрытосеменных проста, неразветвлена ​​и быстро растет, однако это не относится к предковым растениям.

У голосеменных вроде Гинкго билоба и cycadophyta, образует гаусториальную пыльцевую трубку. Трубка просто всасывает питательные вещества из нуцеллуса самки и растет в два этапа. Пыльцевая трубка сильно разветвлена ​​и растет на тканях женских спорофитов. Во-первых, у него растет основная трубка, за которой следует более сферический кончик на конце, чтобы позволить сперматозоиду лопнуть рядом с архегониями.[21] В двухъядерный, многоцветковые сперматозоиды могут подплыть к яйцеклетке.[16] Cycads имеют менее разветвленную структуру и разбухают так же, как и в гинкго. У саговников, однако, в пыльцевой трубке были обнаружены различные ферменты, которые направляют рост, и ткани нуцеллуса больше повреждаются при росте трубки.[21]

В других типах голосеменных кониферофита и gnethophyta, сперма неподвижна, называется сифоногамия пыльцевая трубка прорастает через архегонии, помогая сперматозоидам напрямую достигать яйцеклетки. Хвойные деревья могут быть разветвленными или неразветвленными, и они вызывают дегенерацию женской ткани, поскольку она прорастает через большее количество тканей.[21] Сосны, например, выделяют цитоплазму сперматозоидов, и слияние одной спермы происходит по мере того, как другая сперма дегенерирует. Тем не менее, в gnetophyta, есть особенности, более похожие на пыльцевые трубки покрытосеменных, где трубка достигает яйца при ранней форме двойного оплодотворения. Однако эндосперм не образуется, и второе оплодотворение прерывается.[16]

У покрытосеменных этот механизм изучен более широко, так как пыльцевые трубки у цветковых растений очень быстро растут за счет длинных стилей, чтобы достичь хорошо защищенного яйца. Существует большое разнообразие пыльцевых трубок у покрытосеменных и многих модельных растений, таких как петуния, Арабидопсис растения лилии и табака были изучены на предмет внутривидовой изменчивости и сигнальных механизмов.[15] У цветущих растений может возникать явление, называемое полиамбрией, когда оплодотворяется много семяпочек, а общая приспособленность организма к скорости роста пыльцевых трубок еще не изучена.[16][15]

Поведение

Пыльцевые трубочки - отличная модель для понимания поведения растительных клеток.[22] Их легко выращивать in vitro и иметь очень динамичный цитоскелет который полимеризуется с очень высокой скоростью, обеспечивая пыльцевую трубку интересными механическими свойствами.[23] Пыльцевая трубка имеет необычный рост; он распространяется исключительно на вершину. Расширение клеточная стенка только на кончике минимизирует трение между трубкой и пораженной тканью. Этот рост наконечника происходит скорее пульсирующим, чем постоянным образом.[12] Путешествие пыльцевой трубки по стилю часто приводит к соотношению глубины к диаметру выше 100: 1 и до 1000: 1 у некоторых видов. В кукуруза, эта одиночная ячейка может вырасти более чем на 12 дюймов (30 см), чтобы пересечь длину пестик. Внутренний механизм и внешние взаимодействия, которые управляют динамикой роста пыльцевых трубок, изучены далеко не полностью.

Роль актинового цитоскелета

В актиновый цитоскелет оказался критически важным в содействии росту пыльцевых трубок.[24] С точки зрения пространственного распределения актиновые филаменты расположены в трех разных структурах внутри пыльцевой трубки.[24] Каждое уникальное расположение или узор способствует поддержанию поляризованных характеристик роста клеток пыльцевой трубки. В апикальной области - месте направленного на кончике роста - актиновых филаментов меньше, но они очень динамичны. Более того, маленькие пузырьки накапливаются на верхушке, указывая тем самым, что эта область является местом критических событий нацеливания и слияния пузырьков. Такие события важны для регулирования скорости и направления роста пыльцевых трубок.[25] В субапикальной области актиновые филаменты расположены в форме воротничка. Обратно-фонтанный поток цитоплазмы происходит на подвернутой вершине; направление потока цитоплазмы меняется на противоположное и продолжается вдоль актиновых актиновых тросов, составляющих стержень. В области стержня находится центральная часть пыльцевой трубки. В этой области актиновые филаменты расположены в осевые пучки с однородной полярностью, что позволяет транспортировать различные органеллы и везикулы от основания пыльцевой трубки к кончику, способствуя общему росту трубки.[25]

Динамика актинового филамента

Как пространственное распределение, так и динамика актинового цитоскелета регулируются актин-связывающие белки (АД). Чтобы экспериментально наблюдать изменения распределения, которые происходят в актиновом цитоскелете во время роста пыльцевой трубки, зеленые флуоресцентные белки (GFP) были введены в действие.[24] GFP были выбраны в основном для целей динамической визуализации из-за того, что они предоставили эффективные средства для неинвазивной визуализации актиновых филаментов у растений. Среди различных GFP, используемых во время экспериментов, были GFP-мТАлин, LIM-GFP и GFP-фимбрин / ABD2-GFP.[26]Однако каждый из этих маркеров либо нарушает естественную структуру актиновых филаментов, либо неблагоприятно маркирует такие филаменты. Например, GFP-mTalin приводил к чрезмерному связыванию волокон, а GFP-фимбрин / ABD2-GFP не метил актиновые филаменты, расположенные в апикальной или субапикальной областях пыльцевой трубки.[26] В свете этих недостатков Lifeact-mEGFP был признан предпочтительным маркером актиновых филаментов в пыльцевой трубке; Lifeact-mEGFP способен обнаруживать все три расположения актиновых филаментов и оказывает минимальное влияние на естественную структуру актиновых филаментов.[26] Lifeact-mEGFP был использован в качестве маркера для изучения динамики актиновых филаментов в растущих пыльцевых трубках табака, лилий и других растений. Арабидопсис.[26]

Исследования, проведенные с GFP, подтвердили, что динамическое состояние актиновых филаментов, расположенных в апикальной области, важно для роста пыльцевых трубок. Эксперименты с актиновыми филаментами, окрашенными GFP-mTalin, дали результаты, подтверждающие, что локализованные на кончике актиновые филаменты очень динамичны.[27] Такие эксперименты установили связь между динамикой локализованных на кончике актиновых филаментов и их ролью в формировании структур актина в субапикальной области.[27] Более того, эксперименты с актиновыми филаментами, расположенными в апикальном куполе Arabidopsis, показывают, что актиновые филаменты непрерывно производятся из апикальной мембраны пыльцевой трубки; производство этих актиновых филаментов опосредуется Форминс. Эти находки предоставили доказательства, подтверждающие теорию, что актиновые филаменты, расположенные в апикальной области, очень динамичны и являются местом нацеливания и слияния пузырьков. Эксперименты с этиолированными клетками гипокотиля, а также суспензионными клетками BY-2 показывают, что высокодинамичные актиновые филаменты, продуцируемые апикальной мембраной, могут быть либо перевернуты посредством событий отсечения филаментов и деполяризации, либо они могут перемещаться от вершины к апикальному флангу, что приводит к снижение накопления актиновых филаментов в апикальной области пыльцевой трубки.[2]

Эксперименты по динамике актиновых филаментов в области голени также проводились с использованием GFP. Результаты показали, что максимальная длина филамента в этой области значительно увеличилась, а частота отслоения значительно снизилась. Такие находки указывают на то, что актиновые филаменты, расположенные в области голени, относительно стабильны по сравнению с актиновыми филаментами, расположенными в апикальной и субапикальной областях.[2]

Регулирование

АД регулируют организацию и динамику актинового цитоскелета.[2] Как указывалось ранее, актиновые филаменты непрерывно синтезируются из апикальной мембраны. Это указывает на присутствие заякоренных в мембране факторов нуклеации актина. Экспериментально было выдвинуто предположение, что формины являются представителями таких факторов нуклеации актина. Например, формин AtFH5 был идентифицирован как главный регулятор нуклеации актиновых филаментов, особенно для актиновых филаментов, синтезируемых из апикальной мембраны пыльцевой трубки. Генетические нокауты AtFH5 приводили к уменьшению количества актиновых филаментов как в апикальных, так и в субапикальных областях пыльцевой трубки, тем самым обеспечивая больше доказательств в поддержку теории, что AtFH5 нуклеирует сборку актиновых филаментов в апикальных и субапикальных областях пыльцевой трубки. [2]

Формин класса I AtFH3 является еще одним фактором нуклеации актина. AtFH3 зародыширует сборку актиновых филаментов продольных актиновых кабелей, расположенных в области стержня пыльцевой трубки. Более конкретно, AtFH3 использует комплекс актин / профилин, чтобы взаимодействовать с концом актиновых филаментов, тем самым инициируя зарождение актиновых филаментов. [2]

Руководство

Большая работа была посвящена пониманию того, как пыльцевая трубка реагирует на внеклеточные управляющие сигналы для достижения оплодотворения.[28][22][29][30] Пыльцевые трубки реагируют на комбинацию химических, электрических и механических сигналов во время прохождения через пестик.[31][32][33] Однако неясно, как работают эти внешние сигналы или как они обрабатываются внутри. Более того, сенсорные рецепторы для каких-либо внешних сигналов еще не идентифицированы. Тем не менее, некоторые аспекты уже были определены как центральные в процессе роста пыльцевой трубки. Актиновые филаменты в цитоскелете, своеобразный клеточная стенка, секреторный везикул динамика и поток ионы и это лишь некоторые из фундаментальных характеристик, которые можно легко определить как решающие, но роль которых еще полностью не выяснена.

Ремонт ДНК

Во время роста пыльцевой трубки Повреждения ДНК возникающие должны быть отремонтирован чтобы мужская геномная информация передавалась в неизменном виде следующему поколению. На заводе Cyrtanthus mackenii, двухклеточная зрелая пыльца содержит генеративную клетку и вегетативную клетку.[34] Сперматозоиды производятся митоз генеративной клетки при удлинении пыльцевой трубки. Вегетативная клетка отвечает за развитие пыльцевых трубок. Возникающие двухцепочечные разрывы ДНК, по-видимому, эффективно восстанавливаются в генеративной клетке, но не в вегетативной, во время процесса транспортировки к самке. гаметофит.[34]

Организация RMD по актиновой нити вносит вклад в рост пыльцевых трубок

Обзор

Для успешного оплодотворения происходит быстрый рост кончиков пыльцевых трубок, которые доставляют мужские гаметы в семяпочки. Пыльцевая трубка состоит из трех разных областей: вершины, которая является областью роста, суб вершины, которая является переходной областью, и стержня, который действует как нормальные растительные клетки со специфическими органеллами.[35][36] В области верхушки происходит рост кончика, требующий слияния секреторных пузырьков. Внутри этих пузырьков в основном находятся пектин и гомогалактуронаны (часть клеточной стенки на кончике пыльцевой трубки).[37] Гомогалактуронаны накапливаются в области апекса посредством экзоцитоза, чтобы ослабить клеточную стенку. Будет формироваться более толстая и мягкая стенка наконечника с более низким пределом текучести при напряжении, что позволяет происходить расширению клеток, что приводит к увеличению роста наконечника. Обратный фонтан цитоплазматического потока происходит во время роста кончика, который необходим для расширения клеток, поскольку он транспортирует органеллы и везикулы между областью голени и областью под верхушкой.

Актиновый цитоскелет является важным фактором роста пыльцевой трубки, потому что существуют разные паттерны актинового цитоскелета в разных областях пыльцевой трубки для поддержания роста поляризованных клеток. Например, есть продольные актиновые кабели в области голени, чтобы регулировать обратный фонтан цитоплазматического потока.[38] F-актин контролирует накопление полных везикул homogalacturonans - по существу, опосредующих рост кончиков - в субапексной области.[39] Актиновые филаменты контролируют взаимодействия апикальной мембраны и цитоплазмы, в то время как пыльцевая трубка растет в области верхушки.[40] F-актин из апикальной мембраны производит связывающий актин белок, называемый формин, который необходим для роста кончика пыльцевой трубки. Формины экспрессируются в клетках роста кончика и делятся на две подгруппы: тип I и тип II. Формины типа I образуют структуры актина и участвуют в цитокинезе. С другой стороны, формины типа II способствуют росту поляризованных клеток, что необходимо для роста кончиков.[41] Рост кончика является формой чрезвычайно поляризованного роста, и этот поляризованный процесс требует организации актинового цитоскелета, опосредованной актин-связывающим белком. Существенным белком, необходимым для роста кончиков, является белок, организующий актин, и белок-формин типа II, называемый детерминантом морфологии риса (RMD). RMD локализован в кончике пыльцевой трубки и контролирует рост пыльцевой трубки, регулируя полярность и организацию массива F-актина.[42][43]

RMD способствует росту пыльцевых трубок

RMD способствует прорастанию пыльцы и росту пыльцевых трубок, и это доказано многочисленными экспериментами. В первом эксперименте сравниваются характеристики пестика и стигмы мутанта rmd-1 (растение риса без функциональной RMD) и растения риса дикого типа (с функциональной RMD). Пыльник и пестик были короче у мутантов rmd-1, чем у дикого типа. Этот эксперимент показал, что RMD имеет решающее значение для развития пыльцы. У растений риса дикого типа скорость прорастания увеличилась, а у мутантов rmd-1 - снизилась. Это было замечено, когда оба были проращены в жидкой среде для проращивания. После проверки скорости прорастания было проведено сравнение длины и ширины пыльцевых трубок двух растений. У растений дикого типа пыльцевые трубки имели большую длину, чем у мутантов, но у мутантов была большая ширина трубки. Эта большая ширина пыльцевой трубки у мутантов указывает на уменьшение роста поляризованных клеток и, следовательно, на уменьшение роста кончиков. Затем были собраны пыльцевые зерна дикого типа и мутантов, чтобы сравнить активность опыления между дикими типами и мутантами. У мутантов наблюдалась пониженная активность и минимальное проникновение, тогда как у диких типов повышалась активность и проникновение через стиль и до дна пестиков. Эти наблюдения указывают на задержку роста пыльцевых трубок у мутантов rmd-1. Кроме того, не было никакого влияния на скорость оплодотворения между диким типом и мутантом, и это было проверено путем измерения скорости завязывания семян между диким типом и мутантом. Было обнаружено, что у обоих были одинаковые нормы заложения семян. Следовательно, RMD не влияет на оплодотворение, а влияет только на рост кончиков.[44]

Экспрессия RMD в пыльцевой трубке

Экстракции тотальной РНК из цельного цветка, чешуи, палеи, лодикулы, пестика, пыльника и зрелых пыльцевых зерен растений дикого типа проводились с целью выявления того, где RMD специфически экспрессируется в растении в целом. Используя RT-qPCR (количественная ПЦР с обратной транскрипцией), было очевидно, что в каждой части растения присутствовали разные количества транскриптов RMD. И затем стало очевидно, где RMD присутствует в каждой части растения, с использованием ОТ-ПЦР (ПЦР с обратной транскрипцией) и использования UBIQUITIN в качестве контроля. Эти два метода продемонстрировали обильное присутствие транскриптов RMD в лемме, пестике, пыльнике и зрелых пыльцевых зернах. Для подтверждения этих результатов был использован другой метод. В этом методе использовались трансгенные растения, в которых промоторная область RMD слита с репортерным геном, кодирующим GUS.[45] Гистохимическое окрашивание тканей этих трансгенных растений затем показало высокую активность GUS в пестике, стенке пыльника и зрелых пыльцевых зернах. Таким образом, эти комбинированные результаты продемонстрировали, что RMD экспрессируется в этих конкретных органах растения.

Обнаружение сигналов GUS было использовано еще раз, чтобы изучить, где RMD специфически экспрессируется в пыльцевой трубке. Во-первых, пыльцевые зерна были собраны с трансгенных растений proRMD :: GUS, и было отмечено, что в этих зрелых пыльцевых зернах был сильный сигнал GUS. Эти пыльцевые зерна затем проращивали in vitro, и сигналы GUS наблюдались внутри кончика пыльцевых трубок. Однако сила этих сигналов GUS варьировалась на разных стадиях прорастания. Сигналы GUS были слабыми на кончике пыльцевой трубки на ранней стадии прорастания, но сильнее на более поздних стадиях прорастания. Таким образом, эти результаты подтверждают, что RMD участвует в прорастании пыльцы и росте пыльцевых трубок.

Локализация RMD в пыльцевой трубке

RMD, которые представляют собой формины типа II, состоят из фосфатазного (PTEN) -подобного домена (ответственного за локализацию белка) и доменов FH1 и FH2 (способствует полимеризации актина).[46][47][48]Чтобы обнаружить локализацию RMD в пыльцевой трубке, были выполнены временные анализы растущих пыльцевых трубок табака и использован флуоресцентный белок-GFP.Наблюдалось множество конфокальных изображений различных пыльцевых трубок при определенных условиях: pLat52 :: eGFP (одиночный eGFP, управляемый специфическим для пыльцы промотором Lat52, который действует как контроль); pLat52 :: RMD-eGFP (белок RMD, слитый с eGFP); pLat52 :: PTEN-eGFP (домен PTEN, слитый с eGFP); и pLat52 :: FH1FH2-eGFP (домены FH1 и FH2, слитые с eGFP). Сравнивая изображения контроля с pLat52 :: RMD-eGFP, было замечено, что один GFP распределялся по всей пробирке, тогда как RMD-eGFP накапливался в области кончика пробирки. Следовательно, это показывает, что RMD локализован внутри кончика пыльцевой трубки.

Чтобы выяснить, отвечает ли PTEN-подобный домен за локализацию RMD, было проведено сравнение конфокальных изображений GFP, слитого с доменом PTEN, и укороченного RMD без домена PTEN (pLat52 :: FH1FH2-eGFP). Сигналы PTEN-eGFP были локализованы на кончике пыльцевых трубок, как сигналы RMD-eGFP, тогда как сигналы FH1FH2-eGFP присутствовали по всей пыльцевой трубке и не были локализованы полярным образом. Следовательно, эти комбинированные результаты демонстрируют, что PTEN-подобный домен отвечает за локализацию кончика RMD в пыльцевых трубках.

RMD контролирует распределение и полярность F-актина в пыльцевой трубке

Чтобы определить, контролирует ли RMD организацию F-актина в пыльцевой трубке, наблюдали массивы F-актина в зрелых пыльцевых зернах дикого типа и rmd-1 с использованием окрашивания Alexa Fluor 488-фаллоидином. Сильно связанные актиновые филаменты присутствовали вокруг отверстий пыльцевых зерен дикого типа, хотя не было накопления актиновых филаментов вокруг отверстий в пыльцевых зернах rmd-1. Кроме того, наблюдались слабые сигналы и случайная организация актиновых филаментов внутри пыльцевого зерна rmd-1. Таким образом, эти результаты подтверждают, что RMD важен для контроля прорастания пыльцы.

Интенсивность флуоресценции измеряли с помощью статистического анализа для наблюдения за плотностью актиновых волокон в пыльцевых трубках.[49] Была более высокая интенсивность флуоресценции в области хвостовика пробирок с rmd-мутантом, что означает, что в этой области была более высокая плотность F-актина. Но наблюдалась более низкая плотность F-актина в области кончика пробирок с rmd-мутантом по сравнению с пробирками дикого типа. Это демонстрирует, что картина распределения F-актина в пыльцевых трубках изменяется без функционального RMD.

Чтобы определить полярность актиновых кабелей, измеряли углы между актиновыми кабелями и осью удлинения пыльцевой трубки. Углы в области стержня пыльцевых трубок дикого типа были преимущественно менее 20 °, тогда как углы для пыльцевых трубок rmd-мутантов были больше 60 °. Эти результаты подтверждают тот факт, что RMD важен для роста поляризованных кончиков, потому что rmd-мутантные пыльцевые трубки (без функционального RMD) демонстрируют увеличенную ширину и, таким образом, уменьшение роста кончиков. Максимальная длина отдельных кабелей нитей F-актина от апикальной области до стержня удлиненных пыльцевых трубок также была измерена для проверки полярности внутри пыльцевой трубки. Максимальная длина кабелей F-актина была короче в пыльцевых трубках rmd-мутантов по сравнению с таковыми в трубках дикого типа. Следовательно, эти комбинированные результаты подтверждают, что правильная организация актиновых кабелей, а также нормальная плотность F-актина внутри кончика трубки может быть достигнута только при наличии RMD.

Смотрите также

Рекомендации

  1. ^ Ли Х. Дж., Мэн Дж. Г., Ян В. К. (март 2018 г.). «Многослойные сигнальные пути для роста пыльцевых трубок и руководства». Размножение растений. 31 (1): 31–41. Дои:10.1007 / s00497-018-0324-7. PMID  29441420. S2CID  3299624.
  2. ^ а б c d е ж грамм Цюй X, Цзян Y, Чанг М., Лю X, Чжан Р., Хуанг С. (2015). «Организация и регуляция актинового цитоскелета в пыльцевой трубке». Границы науки о растениях. 5: 786. Дои:10.3389 / fpls.2014.00786. ЧВК  4287052. PMID  25620974.
  3. ^ Бедингер П. (август 1992 г.). «Замечательная биология пыльцы». Растительная клетка. 4 (8): 879–87. Дои:10.1105 / tpc.4.8.879. ЧВК  160181. PMID  1392600.
  4. ^ Хеплер ПК, Видали Л., Чунг А.Ю. (2001). «Рост поляризованных клеток у высших растений». Ежегодный обзор клеточной биологии и биологии развития. 17 (1): 159–87. Дои:10.1146 / annurev.cellbio.17.1.159. PMID  11687487.
  5. ^ О'Брайен С. и др. (1981). «Факторы, влияющие на скорость роста пыльцевых трубок у покрытосеменных с использованием Taraxucum в качестве модели». Журнал ботанической науки. 14 (9): 156–178.
  6. ^ Runions CJ, Оуэнс JN (1999). «Половое размножение ели внутренней (Pinaceae). I. Прорастание пыльцы до созревания архегониалов». Международный журнал наук о растениях. 160 (4): 631–640. Дои:10.1086/314170.
  7. ^ Runions CJ, Оуэнс JM (1999). «Половое размножение ели внутренней (Pinaceae). II. Оплодотворение для раннего формирования зародыша». Международный журнал наук о растениях. 160 (4): 641–652. Дои:10.1086/314171.
  8. ^ а б c d Канаока М.М., Хигасияма Т. (декабрь 2015 г.). «Передача сигналов пептида в руководстве по пыльцевым трубкам». Текущее мнение в области биологии растений. 28: 127–36. Дои:10.1016 / j.pbi.2015.10.006. PMID  26580200.
  9. ^ а б Дерксен Дж., Руттен Т., ван Амстел Т., де Вин А., Дорис Ф., Стир М. (1995). «Регулирование роста пыльцевой трубки». Acta Botanica Neerlandica. 44 (2): 93–119. Дои:10.1111 / j.1438-8677.1995.tb00773.x. HDL:2066/29215.
  10. ^ Льюис Д., Кроу Л.К. (май 1958 г.). «Односторонняя межвидовая несовместимость у цветковых растений». Наследственность. 12 (2): 233–256. Дои:10.1038 / hdy.1958.26.
  11. ^ Эрреро М., Дикинсон Х.Г. (февраль 1981 г.). «Развитие пыльцевых трубок у Petunia hybrida после совместимых и несовместимых внутривидовых спариваний». Журнал клеточной науки. 47: 365–83. PMID  7263785.
  12. ^ а б c d Мессерли М.А., Кретон Р., Джаффе Л.Ф., Робинсон К.Р. (июнь 2000 г.). «Периодическое увеличение скорости удлинения предшествует увеличению цитозольного Са2 + во время роста пыльцевой трубки». Биология развития. 222 (1): 84–98. Дои:10.1006 / dbio.2000.9709. PMID  10885748.
  13. ^ Цзинь Б., Чжан Л., Лу И, Ван Д., Цзян XX, Чжан М., Ван Л. (май 2012 г.). «Механизм удаления капли опыления у Ginkgo biloba L». BMC Биология растений. 12 (1): 59. Дои:10.1186/1471-2229-12-59. ЧВК  3403970. PMID  22548734.
  14. ^ а б c Boavida LC, Vieira AM, Becker JD, Feijó JA (2005). «Взаимодействие гаметофитов и половое размножение: как растения образуют зиготу». Международный журнал биологии развития. 49 (5–6): 615–32. Дои:10.1387 / ijdb.052023lb. PMID  16096969.
  15. ^ а б c d е ж грамм Уолш NE, Чарльзуорт D (1992). «Эволюционная интерпретация различий в скорости роста пыльцевых трубок». Ежеквартальный обзор биологии. 67 (1): 19–37. Дои:10.1086/417446. JSTOR  2830891.
  16. ^ а б c d е Эверт РФ (2013). Ворон Биология растений. Нью-Йорк: W.H. Freeman and Co., стр. 430–456.
  17. ^ а б Симидзу К.К., Окада К. (октябрь 2000 г.). «Привлекательные и отталкивающие взаимодействия между женскими и мужскими гаметофитами в руководстве по пыльцевым трубкам Arabidopsis». Разработка. 127 (20): 4511–8. PMID  11003848.
  18. ^ Абдельгадир Х.А., Джонсон С.Д., Ван Стаден Дж. (01.03.2012). «Жизнеспособность пыльцы, прорастание пыльцы и рост пыльцевых трубок в семенной биотопливной культуре Jatropha curcas (Euphorbiaceae)». Южноафриканский журнал ботаники. 79: 132–139. Дои:10.1016 / j.sajb.2011.10.005.
  19. ^ а б «Съемка быстрого роста пыльцевых трубок на камеру, исследователи фиксируют процесс оплодотворения растений». Получено 2018-03-23.
  20. ^ Bilderback DE (январь 1981 г.). «Прорастание пыльцы Impatiens и рост трубок как биологический анализ токсичных веществ». Перспективы гигиены окружающей среды. 37: 95–103. Дои:10.1289 / ehp.813795. ЧВК  1568632. PMID  7460890.
  21. ^ а б c d Фридман В.Е. (январь 1993 г.). «Эволюционная история мужского гаметофита семенного растения». Тенденции в экологии и эволюции. 8 (1): 15–21. Дои:10.1016/0169-5347(93)90125-9. PMID  21236093.
  22. ^ а б Малхо Р. (2006). Пыльцевая трубка: клеточная и молекулярная перспектива. Springer.
  23. ^ Госсот О, Гайтманн А (июль 2007 г.). «Рост пыльцевой трубки: преодоление механических препятствий задействует цитоскелет». Planta. 226 (2): 405–16. Дои:10.1007 / s00425-007-0491-5. PMID  17318608. S2CID  8299903.
  24. ^ а б c Чен Н., Цюй X, Ву И, Хуан С. (август 2009 г.). «Регулирование динамики актина в пыльцевых трубках: контроль уровня полимера актина». Журнал интегративной биологии растений. 51 (8): 740–50. Дои:10.1111 / j.1744-7909.2009.00850.x. PMID  19686371.
  25. ^ а б Гиббон ​​BC, Ковар Д.Р., Штайгер С.Дж. (декабрь 1999 г.). «Латрункулин B по-разному влияет на прорастание пыльцы и рост трубок». Растительная клетка. 11 (12): 2349–63. Дои:10.1105 / tpc.11.12.2349. ЧВК  144132. PMID  10590163.
  26. ^ а б c d Cheung AY, Duan QH, Costa SS, de Graaf BH, Di Stilio VS, Feijo J, Wu HM (июль 2008 г.). «Динамический цитоскелет пыльцевой трубки: исследования живых клеток с использованием актин-связывающих и связывающих микротрубочки репортерных белков». Молекулярный завод. 1 (4): 686–702. Дои:10.1093 / mp / ssn026. PMID  19825573.
  27. ^ а б Хуан С., Цюй Х, Чжан Р. (январь 2015 г.). «Виллины растений: универсальные белки, регулирующие актин». Журнал интегративной биологии растений. 57 (1): 40–9. Дои:10.1111 / jipb.12293. PMID  25294278.
  28. ^ Гайтманн А., Паланивелу Р. (2007). «Оплодотворение требует общения: генерация и восприятие сигналов во время управления пыльцевыми трубками». Цветоводство и декоративная биотехнология. 1: 77–89.
  29. ^ Малхо Р. (1998). «Направление пыльцевой трубки - долгая извилистая дорога». Половое размножение растений. 11 (5): 242–244. Дои:10.1007 / s004970050148. S2CID  12185063.
  30. ^ Окуда С., Хигасияма Т. (2010). «Направление пыльцевой трубки молекулами аттрактанта: приманки». Структура и функции клеток. 35 (1): 45–52. Дои:10.1247 / csf.10003. PMID  20562497.
  31. ^ Mascarenhas JP, Machlis L (январь 1964 г.). «Хемотропный ответ пыльцы Antirrhinum majus на кальций». Физиология растений. 39 (1): 70–7. Дои:10.1104 / стр.39.1.70. ЧВК  550029. PMID  16655882.
  32. ^ Робинсон К.Р. (декабрь 1985 г.). «Реакция клеток на электрические поля: обзор». Журнал клеточной биологии. 101 (6): 2023–7. Дои:10.1083 / jcb.101.6.2023. ЧВК  2114002. PMID  3905820.
  33. ^ Chebli Y, Geitmann A (2007). «Механические принципы, регулирующие рост пыльцевых трубок». Функциональное растениеводство и биотехнология. 1: 232–245.
  34. ^ а б Хирано Т., Такаги К., Хосино Ю., Абэ Т. (2013). "Реакция на повреждение ДНК мужских гамет Cyrtanthus mackenii во время роста пыльцевой трубки". ЗАВОДЫ AoB. 5: plt004. Дои:10.1093 / aobpla / plt004. ЧВК  3583183. PMID  23550213.
  35. ^ Geitmann, A .; Эмонс, А.М.С. (2000). «Цитоскелет в росте кончиков клеток растений и грибов». Журнал микроскопии. 198 (3): 218–245. DOI: 10.1046 / j.1365-2818.2000.00702.x. ISSN 0022-2720. (2000). «Цитоскелет в росте кончиков клеток растений и грибов». Журнал микроскопии. 198 (3): 218–245. Дои:10.1046 / j.1365-2818.2000.00702.x. PMID  10849200.CS1 maint: несколько имен: список авторов (связь)
  36. ^ Крести, Мауро; Кай, Джампьеро; Москателли, Алессандра, ред. (1999). «Удобрение высших растений». DOI: 10.1007 / 978-3-642-59969-9. (1999). Крести, Мауро; Кай, Джампьеро; Москателли, Алессандра (ред.). Удобрение высших растений. Дои:10.1007/978-3-642-59969-9. ISBN  978-3-642-64202-9. S2CID  1876840.CS1 maint: несколько имен: список авторов (связь)
  37. ^ Гайтманн, Аня; Стир, Мартин, «Архитектура и свойства клеточной стенки пыльцевой трубки», The Pollen Tube, Springer-Verlag, pp. 177–200, ISBN 3540311211, получено 21 апреля 2019. Цитировать журнал требует | журнал = (помощь); Отсутствует или пусто | название = (помощь)CS1 maint: несколько имен: список авторов (связь)
  38. ^ Cheung, A. Y .; Niroomand, S .; Zou, Y .; Ву, Х.-М. (2010-08-30). «Трансмембранный формин зарождается в субапикальной сборке актина и контролирует рост в пыльцевых трубках, ориентированный на кончик». Труды Национальной академии наук. 107 (37): 16390–16395. DOI: 10.1073 / pnas.1008527107. ISSN 0027-8424. (2010). «Трансмембранный формин зарождается в субапикальной сборке актина и контролирует рост в пыльцевых трубках, ориентированный на кончик».. Труды Национальной академии наук. 107 (37): 16390–16395. Bibcode:2010PNAS..10716390C. Дои:10.1073 / pnas.1008527107. ЧВК  2941322. PMID  20805480.CS1 maint: несколько имен: список авторов (связь)
  39. ^ Фу, Инь; Ян, Чжэнбяо (2001). «Rop GTPase: главный переключатель развития клеточной полярности у растений». Тенденции в растениеводстве. 6 (12): 545–547. DOI: 10,1016 / s1360-1385 (01) 02130-6. ISSN 1360-1385. (2001). «Rop GTPase: главный переключатель развития полярности клеток у растений». Тенденции в растениеводстве. 6 (12): 545–547. Дои:10.1016 / с 1360-1385 (01) 02130-6. PMID  11738369.CS1 maint: несколько имен: список авторов (связь)
  40. ^ Ли, Ён Джик; Ян, Чжэнбяо (2008). «Рост кончика: сигнал в апикальном куполе». Текущее мнение в биологии растений. 11 (6): 662–671. DOI: 10.1016 / j.pbi.2008.10.002. ISSN 1369-5266. (2008). «Рост кончика: сигнал в апикальном куполе». Текущее мнение в области биологии растений. 11 (6): 662–671. Дои:10.1016 / j.pbi.2008.10.002. ЧВК  2613292. PMID  18977167.CS1 maint: несколько имен: список авторов (связь)
  41. ^ ван Гисберген, Питер А.К .; Ли, Мин; У, Шу-Зон; Безанилла, Магдалена (16.07.2012). «Нацеливание формина класса II на кору клеток путем связывания PI (3,5) P2 является важным для поляризованного роста». Журнал клеточной биологии. 198 (2): 235–250. DOI: 10.1083 / jcb.201112085. ISSN 0021-9525. (2012). «Нацеливание формина класса II на кору клеток путем связывания PI (3,5) P2 является важным для поляризованного роста». Журнал клеточной биологии. 198 (2): 235–250. Дои:10.1083 / jcb.201112085. ЧВК  3410418. PMID  22801781.CS1 maint: несколько имен: список авторов (связь)
  42. ^ Ян, Вейбинг; Рен, Сулин; Чжан, Сяомин; Гао, Минцзюнь; Е, Шэнхай; Ци, Юнбинь; Чжэн, Иянь; Ван, Хуан; Цзэн, Лунцзюнь (2011). «BENT UPPERMOST INTERNODE1 - кодирует формин FH5 класса II, имеющий решающее значение для организации актина и развития риса». Растительная клетка. 23 (2): 661–680. DOI: 10.1105 / tpc.110.081802. ISSN 1040-4651. (2011). «BENT UPPERMOST INTERNODE1 кодирует формин FH5 класса II, важный для организации актина и развития риса». Растительная клетка. 23 (2): 661–680. Дои:10.1105 / tpc.110.081802. ЧВК  3077787. PMID  21307285.CS1 maint: несколько имен: список авторов (связь)
  43. ^ Чжан, Чжэн; Чжан, И; Тан, гексин; Ван, Инь; Ли, банда; Лян, Ванци; Юань, Чжэн; Ху, Цзяньпин; Рен, Хайюнь (2011). «ДЕТЕРМИНАНТ МОРФОЛОГИИ РИСА Кодирует формин FH5 типа II и регулирует морфогенез риса». Растительная клетка. 23 (2): 681–700. DOI: 10.1105 / tpc.110.081349. ISSN 1040-4651. (2011). «ДЕТЕРМИНАНТ МОРФОЛОГИИ РИСА кодирует формин FH5 типа II и регулирует морфогенез риса». Растительная клетка. 23 (2): 681–700. Дои:10.1105 / tpc.110.081349. ЧВК  3077795. PMID  21307283.CS1 maint: несколько имен: список авторов (связь)
  44. ^ Чжан, Чжэн; Чжан, И; Тан, гексин; Ван, Инь; Ли, банда; Лян, Ванци; Юань, Чжэн; Ху, Цзяньпин; Рен, Хайюнь (2011). «ДЕТЕРМИНАНТ МОРФОЛОГИИ РИСА Кодирует формин FH5 типа II и регулирует морфогенез риса». Растительная клетка. 23 (2): 681–700. DOI: 10.1105 / tpc.110.081349. ISSN 1040-4651. (2011). «ДЕТЕРМИНАНТ МОРФОЛОГИИ РИСА кодирует формин FH5 типа II и регулирует морфогенез риса». Растительная клетка. 23 (2): 681–700. Дои:10.1105 / tpc.110.081349. ЧВК  3077795. PMID  21307283.CS1 maint: несколько имен: список авторов (связь)
  45. ^ Чжан, Чжэн; Чжан, И; Тан, гексин; Ван, Инь; Ли, банда; Лян, Ванци; Юань, Чжэн; Ху, Цзяньпин; Рен, Хайюнь (2011). «ДЕТЕРМИНАНТ МОРФОЛОГИИ РИСА Кодирует формин FH5 типа II и регулирует морфогенез риса». Растительная клетка. 23 (2): 681–700. DOI: 10.1105 / tpc.110.081349. ISSN 1040-4651. (2011). «ДЕТЕРМИНАНТ МОРФОЛОГИИ РИСА кодирует формин FH5 типа II и регулирует морфогенез риса». Растительная клетка. 23 (2): 681–700. Дои:10.1105 / tpc.110.081349. ЧВК  3077795. PMID  21307283.CS1 maint: несколько имен: список авторов (связь)
  46. ^ ван Гисберген, Питер А.К .; Безанилла, Магдалена (2013). «Формины растений: мембранные якоря для полимеризации актина». Тенденции в клеточной биологии. 23 (5): 227–233. DOI: 10.1016 / j.tcb.2012.12.001. ISSN 0962-8924. (2013). «Формины растений: Мембранные якоря для полимеризации актина». Тенденции в клеточной биологии. 23 (5): 227–233. Дои:10.1016 / j.tcb.2012.12.001. PMID  23317636.CS1 maint: несколько имен: список авторов (связь)
  47. ^ Ван, Цзяоцзяо; Сюэ, Сюхуа; Рен, Хайюнь (04.01.2012). «Новые взгляды на роль форминов растений: регулирование организации актина и цитоскелета микротрубочек». Протоплазма. 249 (S2): 101–107. DOI: 10.1007 / s00709-011-0368-0. ISSN 0033-183X. (2012). «Новые взгляды на роль растительных форминов: регулирование организации актина и цитоскелета микротрубочек». Протоплазма. 249: 101–107. Дои:10.1007 / s00709-011-0368-0. PMID  22215231. S2CID  15684773.CS1 maint: несколько имен: список авторов (связь)
  48. ^ Чжан, Чжэн; Чжан, И; Тан, гексин; Ван, Инь; Ли, банда; Лян, Ванци; Юань, Чжэн; Ху, Цзяньпин; Рен, Хайюнь (2011). «ДЕТЕРМИНАНТ МОРФОЛОГИИ РИСА Кодирует формин FH5 типа II и регулирует морфогенез риса». Растительная клетка. 23 (2): 681–700. DOI: 10.1105 / tpc.110.081349. ISSN 1040-4651. (2011). «ДЕТЕРМИНАНТ МОРФОЛОГИИ РИСА кодирует формин FH5 типа II и регулирует морфогенез риса». Растительная клетка. 23 (2): 681–700. Дои:10.1105 / tpc.110.081349. ЧВК  3077795. PMID  21307283.CS1 maint: несколько имен: список авторов (связь)
  49. ^ Li, G .; Liang, W .; Чжан, X .; Ren, H .; Hu, J .; Bennett, M. J .; Чжан, Д. (30.06.2014). «Актин-связывающий белок риса RMD является ключевым звеном в регуляторной петле ауксин-актин, которая контролирует рост клеток». Труды Национальной академии наук. 111 (28): 10377–10382. DOI: 10.1073 / pnas.1401680111. ISSN 0027-8424. (2014). «Актин-связывающий белок риса RMD является ключевым звеном в регуляторной петле ауксин-актин, которая контролирует рост клеток». Труды Национальной академии наук. 111 (28): 10377–10382. Bibcode:2014ПНАС..11110377Л. Дои:10.1073 / pnas.1401680111. ЧВК  4104909. PMID  24982173.CS1 maint: несколько имен: список авторов (связь)

внешняя ссылка